מאמר שיטה

יצירת מטריצת מוח ניתנת להרחבה הניתנת להתאמה אישית בין שלבי ההתפתחות

DOI:

10.3791/68638

⸱

20 בפברואר 2026

 ,  ,  ,  ,  ,  , 
1Spinal Cord and Brain Injury Research Center, Department of Physiology, College of Medicine, University of Kentucky, 2Department of Biomedical Engineering, College of Engineering, University of Kentucky, 3Department of Neurosurgery, University of Kentucky

במאמר זה

סיכום

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

שיטה חדשנית לבניית מטריצות מוח ניתנות להרחבה לחיתוך פרוסות קורונליות או סגיטליות מתוארת, ליישום על גורי חזירים יילודים. גישה חסכונית זו משתמשת בלוחות אקריליק מגולפים בתבניות מתבנית ג'ל אגרוז למוח, מתיישמת על מינים שונים, ומאפשרת התרחבות כדי להתאים לצמיחת המוח.

תקציר

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

העניין הגובר בשימוש בגורי חזירים שזה עתה נולדו כמודל מחקר להתפתחות ולפתולוגיה של יילודים הגביר את הצורך במטריצת מוח לרכישת חתכים היסטולוגיים במדויק. עם זאת, הגידול המהיר של מוח התינוק מגביל את השימושיות של מטריצות זמינות מסחרית לחלון התפתחות צר. לכן, פותחה שיטה לבניית מטריצת מוח מתכווננת. ראשית, מיכל זכוכית הונחה על קרח רטוב, ושכבת ג'ל אגרוז 4% הונחה בתחתית. לאחר מכן, מוח מקובע בפורמלין הונח על שכבה זו והוטמע בג'ל אגרוז 4%. לאחר שהג'ל התקשה, הג'ל מעל המוח הוסר בזהירות, והמוח הוצא. החלל היה מלא בג'ל אגרוז 4% עם 2% דיו הודי. לאחר ההתמצקות, בלוק הג'ל הוסר ונחתך לעובי הרצוי (2 מ"מ או 5 מ"מ) ולכיוון (קורונלי או סגיטל) כדי להדפיס את תבניות המוח על נייר קנה מידה. התבניות הועתקו לסדרה של לוחות אקריליק שקופים (בעובי 2 מ"מ או 5 מ"מ) ונחתכו בהתאם על מסור סרט. לבסוף, הלוחות הורכבו ומאובטחים בשלושה סטים של ברגים ואומים דרך חורי יישור קדחו מראש לבניית מטריצת מוח מותאמת אישית. בניית מטריצות קורונליות וסגיטליות מתוארת עבור מוח חזירון יום 5 עם שלבים של 2 מ"מ ומטריצה קורונלית למוחות לאחר הלידה 32-38 עם שלבים של 5 מ"מ. על ידי הוספת או הסרה של לוחות אקריליק מתאימים, המטריצה הותאמה להתאמה לגדלים השונים של מוחות חזירונים. לכן, שיטה פשוטה וחסכונית להתאים מטריצות מוח לגדלים שונים של בעלי חיים גדולים מוצגת לקהילת המחקר הנוירולוגי.

מבוא

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

התפתחות המוח של החזירונים דומה במידה רבה לזו של בני אדם 1,2,3,4. לכן, יש עניין גובר בשימוש בגורים למחקרים פרה-קליניים של הפרעות נוירו-התפתחותיות, מחלות יילודים וילדים, ופציעות (איור 1A,B)5,6,7,8,9,10. כפי שנראה באיור 1, החזירון התינוק, כמודל של חיה גדולה, בעל גולגולת וגודל מוח קרובים יותר לעובר אדם פג (איור 1A,B), בעוד שגולגולת העכבר והחולדה הבוגרת קטנות לפחות בשני גודלות.

עם זאת, קיימים אתגרים בשימוש ביונקים גדולים יותר במחקר ביו-רפואי בהשוואה למודלים הנפוצים יותר של עכברים. מוח החזירים התינוקות גדלים במהירות בשלושת החודשים הראשונים לאחר הלידה. בחמשת השבועות הראשונים לחיים, מוח החזירון כמעט מכפיל את משקלו ומשלש את נפחו (איור 1C)4,11,12,13. במהלך התקופה שבין p5 ל-p38, צמיחה והתפתחות מוחית של גיריים וסולקים היו בולטים (איור 1C). משקל ונפח מוח החזירון של p5 היו 29.5 גרם ו-18.9 מ"ל, בעוד ששני מוחות p32 היו 51.4 ו-52.6 גרם, ו-49.6 ו-53.5 מ"ל, בהתאמה. ב-38 ימים, המוח גדל ל-53.7 גרם ו-52.5 מ"ל, מה שמייצג עלייה של 80% במשקל ועלייה של 170% בנפח לעומת p5. הצמיחה המהירה הזו של מוח החזיר התינוק מהווה אתגר לחתך היסטולוגי מדויק של מוחות של גורים בגיל, זנים או מינים שונים, באמצעות מטריצה אחת.

מטריצות מוח מסחריות לגורים עולות בערך בין 1,000 דולר ל-3,600 דולר כל אחת, וזמינות רק בגודל אחד, המיועדת לשימוש לחזירורים בני שבועיים ומטה. למרות שיש כמה פרסומים שהשתמשו בסריקה תלת-ממדית ובטכניקת הדפסה תלת-ממדית ליצירת מטריצות מוח שונות לדגי זברה, עכברים ועופות 14,15,16, המטריצות הללו הן בקנה מידה יחסית קטן. אין סדרת הדמיות MRI מבוססת או תרשים גדילה מפורט למוח של גורי חזירים יילודים, במיוחד עבור צעירים בשבועיים ומטה. לכן, יצרנו מספר תבניות פרוסות מוח באמצעות מוחות שנאספו בין יום 5 ליום 38, שעל פיהן הוקמה מערכת מטריצת מוח מתכווננת.

פרוטוקול זה מתאר שיטה חדשנית להקמת תבניות מוח של חזירים יילודים ולפיתוח מבנה מטריצת מוח מבוססת פלטות אקריליות ומותאמת אישית, שניתן להשתמש בה לחתך קורונלי או סגיטלי של מוח במגוון גדלים.

הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.

פרוטוקול

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

במאמר זה, ארבעת מוחות החזירים הושגו והוכנו לצביעה היסטולוגית לאחר המתת חסד הומנית בהתאם לפרוטוקול שאושר על ידי ועדת הטיפול והשימוש בבעלי חיים המוסדית (IACUC) של אוניברסיטת קנטקי למחקר נפרד. כל ההליכים על בעלי חיים אושרו, וטיפול הולם בבעלי חיים נעשה כדי לצמצם לחץ או כאב הקשורים לטיפולים או להמתת חסד.

1. בעלי חיים

  1. רכשו ארבעה זכרים יילודים נאיביים (יום 4 לאחר הלידה, p4) (משקל גוף 1.5-1.8 ק"ג) עם רקע גנטי של 62.5% לנדרייס, 25% לבן גדול, ו-12.5% יורקשייר.
  2. לאחסן את בעלי החיים יחד בחדר ייעודי אחד בכלוב חזירים, עם תמיכה של מנורת חימום ורצפה מכוסה מגבות. האכיל אותם בשבוע הראשון עם מחליף חלב בשבוע הראשון ומעבר בהדרגה למזון פלט אחרי 2-3 שבועות.
  3. עוקבים אחרי הפעילות הפיזיולוגית ומשקל הגוף ובצעו סריקות MRI שבועיות תחת הרדמה איזופלואורנית.
  4. המתת חסד עם מנת יתר של פנטוברביטל ופרפיוז טרנסקרדיאלי עם מלח הפאריניזציה, ואחריה 10% פורמלין בופר ניטרלי.
  5. נתח את המוח מהגולגולת17, מקבע עם פורמלין ללילה, ואז שים 30% סוכרוז ב-PBS למשך 3 ימים לשימור קריופריטור.

2. תבנית ג'ל אגרוז

  1. טבלו מיכל זכוכית בדלי קרח רטוב לגובה חצי-גובה (איור 2A).
  2. השתמש ברצועת פלסטיק עבה כציפוי למיכל וודא שהתחתית והדפנות מכוסות לחלוטין תוך שמירה על שני הקצוות לפחות 5 ס"מ מעל הקצה העליון.
  3. חממו 150 מ"ל PBS בכוס זכוכית לטמפרטורה של 90 מעלות צלזיוס על פלטת חימום מערבבת עם ערבוב מגנט, ומוסיפים בהדרגה 6 גרם אגרוז כדי ליצור ג'ל אגרוז 4% ב-PBS.
  4. שפוך שכבה בעובי 0.5-1 ס"מ לתוך מיכל הזכוכית (איור 2B) והמתין עד שיתקשה.
  5. מרחו שכבה דקה של שמן מינרלי על המוח (איור 2C) והניחו את המוח על שכבת הג'ל (איור 2D).
  6. אפשר לתמיסת האגרוז להתקרר ל-50 מעלות צלזיוס. הטמיעו את המוח בג'ל אגרוז מקורר (איור 2E) ומאפשרים לו להתגבש (איור 2F), שלרוב לוקח ~10 דקות על קרח רטוב.
  7. הסר בזהירות את השכבה העליונה של ג'ל האגרוז מעל המוח (איור 2G) באמצעות גלאי ניתוחי והוצא את המוח מהעובש המוצק (איור 2H,I).
  8. חממו 98 מ"ל PBS בבקבוק זכוכית נוסף לטמפרטורה של 90 מעלות צלזיוס על פלטה חמה מערבבת עם ערבוב מגנט, הוסיפו 4 גרם אגרוז ו-2 מ"ל דיו הודו, ותנו לערבוב ולהתערבב היטב. שפוך 4% אגרוז עם 2% דיו הודי לחלל שהמוח שהוחלט (איור 2J) עד שהוא מלא ומאפשר לו להתקשה על קרח רטוב למשך 15 דקות (איור 2K).
  9. באמצעות החלקים הבולטים של רצועת הפלסטיק, הרם את רצועת הפלסטיק כדי להסיר את כל בלוק האגרוז מהמיכל (איור 2L).

3. חיתוך בלוקים באגרוז והעתקת תבנית לנייר בקנה מידה

  1. כדי להגן על הנייר מלחות במהלך תהליך החיתוך, הניחו חתיכת נייר אבנית אחת בין שתי פלטות אקריליות שקופות בעובי 0.76 מ"מ (0.03 אינץ') (איור 3A), והניחו את צלחת הנייר-אקריליק המלמינציה ליד קצה השולחן.
  2. אבטחו ריבועים בפינה לספסל עם מהדקים במיקום המתאים כדי לשמור על שתי פלטות אקריליות בעובי 5 מ"מ עומדות ולהחזיק היטב את בלוק הג'ל ביניהן בכיוון הרצוי (סגיטל באיור 3). ודא שקצה כל לוח אקרילי אנכי מיושר לאותו קו על נייר הקנה כדי לשמש כהפניה לחיתוך בלוק הג'ל. השתמש במשקולת כדי לקבע את בלוק הג'ל בקצה ההפוך למקום החיתוך (איור 3B).
  3. באמצעות נייר הקנה מידה שמתחת כמדריך, הזז את בלוק הג'ל קדימה מבין לוחות האקריליק בצעד הרצוי (2 מ"מ או 5 מ"מ), מחזיק את להב המיקרוטום בשתי ידיים, וחתוך את החלק שמעבר לקצה הקדמי של הפלטה האקרילית (איור 3B).
  4. אספו כל פרוסה (איור 3C), הניחו אותה על נייר בקנה מידה נפרד (איור 3D), לחצו בעדינות את החלק הצבוע בדיו הודי של היציקה על נייר הקנה כדי להעביר את המתאר (איור 3E), שרטטו את קווי המתאר של כל חלק הג'ל באמצעות עט, הסרו את חלק הג'ל, וציינו את הדפס הדיו ההודי גם כן בעט (איור 3F). שים לב לשמור על כיוון כל פרוסה והתבנית המועתקת עקביים.
  5. חזור על שלבים 2.3 ו-2.4 עד שכל חלקי הג'ל מועתקים לנייר הסקאלה וממוספרים ברצף. בדקו מחדש את הפרוסות והטביעות שלהן (תמונות מייצגות של פרוסות קורונליות והדפסים באיור 3G,H).

4. גילוף לוחות אקריליק

  1. חתכו חריצים על הפלטת האקרילית הגדולה עם סכין חיתוך מפלסיגלס ושברו את הלוחות הגדולים לחתיכות בגודל 10 על 8.5 ס"מ.
    הערה: מספר החלקים הכולל תלוי בגודל המוח, בעובי הפרוסה הרצוי ובכיוון החיתוך. בדרך כלל, אנו מכינים 25 חתיכות של לוחות אקריליק בקוטר 2 מ"מ למטריצה קורונלית או סגיטלית למוח של גורי חזירים ו-15 חלקים של לוחות בגודל 5 מ"מ למוחות גדולים יותר לטיפול קל יותר.
  2. סימן לשלושה חורי עיגון בלוח האקרילי בקואורדינטות x, y כפי שנמדד מהפינה התחתונה השמאלית (במ"מ): (11, 42); (45, 15); ו-(88, 42).
  3. אבטח את לוחות האקריליק בתמיכה של ריבועי פינה וקליפסים על פלטפורמת מקדחה. קדחו שלושה חורי עיגון בקואורדינטות שהוזכרו עם מקדח פלטה אקרילית (איור 4A). שרטט קו צבע בצד ימין של כל הלוחות כדי להצביע על כיוון.
  4. הסר את הסרט המגן מהפלטה האקרילית והניח אותו מעל התבנית על נייר הסקאלה, תוך יישור הקצה העליון של הפלטת האקרילית לקווים העליונים של התבנית שהועתקה לנייר הסקאלה. עקבו אחרי קווי המתאר של המוח על הפלטת האקרילית עם עט טוש קבוע (איור 4B). סמן את הלוחית ברצף כפי שמופיע בתבנית.
  5. חתוך את הפלטת האקרילית על מסור הרצועה לאורך קווי התבנית (איור 4C). חלופה נוספת היא להשתמש בכלי סיבובי עם ערכת חיתוך רב-תכליתית וקצה גילוף עץ כדי להסיר את האזורים הלא רצויים.
  6. ללטש את קצה החיתוך באמצעות כלי סיבובי עם קצה ליטוש כדי להחליק את הקצוות שהשאירו על ידי כלי החיתוך (איור 4D).
  7. בדוק מחדש את החיתוכים על לוחות האקריליק מול התבנית על נייר הסקאלה (איור 4E). גזום וליטוש במידת הצורך.
  8. הרכיבו מראש את המטריצה על ידי ערימת הלוחות החתוכים בסדר רציף ובדקו את יישור הלוחות (איור 4F).

5. הרכבה והרחבה של מטריצת המוח

  1. הניחו שלושה וושרים בין לוחות אקריליק, כל אחד במרכז חור עיגון אחד (איור 5A). הדביקו אותם סביב חורי העיגון עם דבק סופר באותו צד של כל לוחות האקריליק כדי לקצר את זמן ההרכבה (איור 5A).
  2. ערמו את לוחות האקריליק ברצף, הכניסו ברגים מנירוסטה דרך כל חור עיגון להרכבת המטריצה, והדקו את האגומים לקיבוע (איור 5A).
  3. מרח ליטוש סופי על הקצוות החתוכים שיגעו במוח כדי להחליק את הלוחות.
  4. קודד צבע בחלק העליון של המטריצה כדי לסייע בזיהוי השלבים במהלך החיתוך. צבעו לסירוגין את קצוות החלק העליון של הלוח בשחור, אדום ואז בצבע ריק ליצירת דפוס. חזור על שלב זה עד שכל הלוחות מסומנים בצבעים זהים (איור 5).
  5. כדי להתאים את הגיאומטריה או לשנות את גודל החלל כך שיתאים טוב יותר למוחות מסוימים, יש להסיר או להוסיף לוחות אקריליק נבחרים (איור 5B) כדי להתאים לגדלים שונים של מוח, מה שמגביר משמעותית את הגמישות של המטריצות הללו ויכול לחסוך חומרים ומאמץ.

6. חיתוך קורונלי או סגיטלי של המוח

  1. עטוף קצה אחד של להב הקריוסטט הבולט בסרט מעבדה לאורך של לפחות 2 ס"מ כדי להגן על ידו של המשתמש. שים את המוח היטב בחלל המטריקס. בהחזקת הקצה העטוף של הלהב, מניחים בזהירות את הלהב בין לוחות האקריליק של המטריצה, ואז חותכים את המוח לפרוסות קורונליות או סגיטליות כאשר המוח נתמך ומאובטח ביד השנייה (איור 6A,B).
    הערה: זהירות: 1) מכיוון שלכל אחד מחלקי המוח יש מרקמים שונים לאחר קיבוע פורמלין, יש לנקוט זהירות כדי להפעיל לחץ אחיד על הלהב. 2) יתרה מזאת, מוח החזירון גדול, ולכן עדיף להשתמש בתנועת חיתוך כדי חיתוך מוח מאשר תנועת חיתוך ישירה של "דחיפה למטה". 3) קריטי לשמור על המוח מתאים היטב למטריקס עם תמיכת היד השנייה במהלך החיתוך כדי למנוע הטיה או שינוי בכיוון שלה. יש להימנע מלחץ מופרז על המוח נגד המטריקס בכל עת.
  2. שים את כל הפרוסות בצלחת עם 6 בארות או במגש אל-חלד מלא ב-PBS. פרשו בזהירות את הפרוסות באותו כיוון (איור 6C,D) ושמרו או המשיכו לפי הצורך.

הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.

תוצאות

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

חזירון אחד הושמד במנת יתר של פנטוברביטל בגיל p5. שלושת בעלי החיים האחרים הראו פעילות פיזיולוגית תקינה ועלייה דומה במשקל גוף (הגיעה ל-7.44-8.4 ק"ג). שני חזירונים עברו סריקת MRI שבועית תחת הרדמה איזופלורנית עד שהושמתו על p32. החזירון הרביעי נשאר נאיבי עד להמתת חסד ב-p38.

הדמיון בגודל הראש בין חזירון לעובר אנושי ניתן להמחשה באיור 1A,B, שהוא לפחות שני סדרי גודל גדול יותר מזה של מכרסמים. צמיחה משמעותית של מוח החזירורים...

הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.

דיון

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

פרוטוקול זה מציג את המתודולוגיה ליצירת מטריצות מוח זולות וקלות לבנייה, שיכולות לסייע בחיתוך מוח החזירון או כל מין אחר של בעלי חיים גדולים בכיוון ובעובי הרצויים. חשוב לציין, בניגוד למטריצות "בגודל קבוע" מסחריות שפועלות עם טווח מוגבל של גדלי מוח, גישה זו מאפשרת לכוונן או להרחיב את המטריצה בנוחות כדי להתאים למגוון רחב של גדלי מוח. בדוח זה, מטריצה שנבנתה למוח של חזירון במשקל 30 גרם הורחבה בהצלחה כדי להכיל מוח גדול ב-80%, עם התאמה הדוקה להקל על חיתוך מדויק של המוח. מומלץ להוסיף או להסיר את לו...

הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.

גילויים

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

למחברים אין ניגודי עניינים לחשוף.

תודות

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

עבודה זו נתמכה על ידי המכונים הלאומיים לבריאות (NIH) #R21-NS114771 (K.E.S.), #R56-NS117587, #R01-EB028792, #R01-HD101508, #R21-HD091118, #R41-NS122722, #R42-MH135825 (G. Y.), האגודה האמריקאית ללב (AHA) #16GRNT30820006 (G.Y.) ו-#14SDG20480186 (L.C.), ותחום המחקר העדיפות של מדעי המוח של אוניברסיטת קנטקי (L.C.). החזירים הזכרים הנאיביים נרכשו דרך מחלקת משאבי בעלי החיים במעבדה (DLAR) ממרכז החזירים של הפקולטה לחקלאות, אוניברסיטת קנטקי.

הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.

חומרים

רשימת החומרים שנעשה בהם שימוש במאמר זה
שםחברהמספר קטלוגהערות
1/4"-20 x 3-1/2" ראש מכונה פיליפס פיליפס מנירוסטה, (25 יחידות), הברג גס, 18-8 (304) פלדת אל-חלד, באמצעות טפטף בורגבולט מפילhttps://www.amazon.com/
Stainless Phillips-Machine
-Bolt-dropper/dp/B07D1L8
7VB/ref=sr_1_2?crid=38M
PNERXG39Q3& מילות מפתח
=1%2F4%22+3.5+אינץ'+
אל-חלד+ברגים& QID=16427
82626& ס=תעשייתי& sprefix
=1%2F4+3.5+אינץ'+נירוסטה
+ברגים%2Cindustrial%2C62
& sr=1-2
חבילת 10 של 8 על 10" PET Sheet/פאנלים מפלקסיגלס 0.03" עבה קלפאלמיhttps://www.amazon.com/dp
/B084P4YSST/?coliid=I1S59
82XD9P6CB& colid=XJ78FAX
D85BF& psc=1& ref_=lv_ov_lig_dp_it
3 חבילות 3/16 אינץ' (4.5 מ"מ) יריעת אקריליק שקופה, 8" x 12" פלקסיגלס יצוק (0.177") AZM בגודל נומינלי עבהתצוגות AZMhttps://www.amazon.com/4-5mm
-אקריליק-פלקסיגלס-נומינל-AZM
/dp/B082CGYSCK/ref=sr_1_12?
dchild=1& מילות מפתח=אקריליק+גיליון
%2C+4.5mm& qid=1617572206& sr=8-12
3  שימ שטוח לקיצור כתפיים  מכונת כביסה, נירוסטה 18-8, גודל בורג 1/2", מזהה 0.501", 0.750" OD, עובי 0.016" (חבילה של 50)חלקים קטניםhttps://www.amazon.com/Shoulder-
קיצור-ושר-נירוסטה-סטי<בר/> l-0-251/dp/B004K1FFZA/ref=sr_1_
3?crid=1K8LO0VN4GLE& dchild=1
& מילות מפתח=מכונות כביסה & pd_rd_r=
0ffe510e-abe5-4eae-b975-ed945
08AC71A& pd_rd_w=HuED5& pd_r
d_wg=fixK7&; pf_rd_p=b4950e17-f
2f6-494c-bba5-69a9d0aa3887& pf
_rd_r=BRVGS2378CHD1WBC2E
4P& PID=3tntl8w& qid=1617573484
& refinements=p_n_feature_twenty
_browse-bin%3A17420898011%2
Cp_n_feature_twenty-one_browse
-bin%3A19047154011& S=Industria
L& sprefix=washer%2Bfor%2B%2C
aps%2C202& sr=1-3&; th=1
לוח 6 בארותאוונטור76520-650
אגוז משושה 8-32, אגוז משושה גס, אגוז משושה מפלדת אל-חלד 18-8, גוון כסף, ?100 pcs?פולרקרגhttps://www.amazon.com/Fullerkreg
-Machine-Stainless Bright-Quantity/
dp/B078S3J765/ref=sr_1_4?crid=4
VSSI5B9MJ2D& מילות מפתח=1%2F4
%22-20+אינץ'+נירוסטה+פלדה+
משושית+אגוז+גס+חוט& qid=1
642782823& ס=תעשייתי& sprefix
=1%2F4+-20+inch+stainless+ste
el+hex+nut+coarse+thread%2Cin
dustrial%2C61& sr=1-4
ריבועי מיקום 90 מעלות סגסוגת אלומיניוםהינמייhttps://www.amazon.com/Positioni
ng-אלומיניום-נגרות-Carp
Enter-Clamping/dp/B08294FZ7L/r
ef=sr_1_6?crid=1I97TLVRYREPQ
& dchild=1&; מילות מפתח=corner+squ
are& qid=1625683905&; sprefix=co
rner+squ%2Caps%2C182& SR=8-6
אגרוזהאוונטור97062-244
מסור רצועהסקיל
תחליף חלב בירת'רייט (פיפסטון)פיפסטוןSKU  8229https://pipevet.com/birthright-baby-pig-milk-replacer
דליאוונטור89233-340
ערכת כלים סיבובית לביצועים גבוהים Dremel 4300-5/40דרמלhttps://www.amazon.com/dp/B0
1M1SJNVU/?coliid=IMLRI62ZL
JTSJ& colid=2XZ304Y9M7PV7
& psc=1& ref_=lv_ov_lig_dp_it
מקדחים לפלסטיק (אקריליק, פלקסיגלס, ABS, לקסן, פוליקרבונט, PVC)FTMhttps://www.amazon.com/dp/B
07D1B3B51/?coliid=I26RS6UP
UJ3P1Y& colid=2XZ304Y9M7P
V7& psc=1& ref_=lv_ov_lig_dp_it
זכוכית x 2אוונטור470335-854
מיכל זכוכיתכלי צביעת ויטוןWHEATON®   900303
מחברת נייר גרפית: קווי רשת אפורים בהירים בעובי 1 מ"מ דק ו-10 מ"מ עבה יותר (מטרי, 120 עמודים):https://www.amazon.com/
Graph-Paper-Notebook-
דו-צדדי-לא-מחורב
/dp/154319026X/ref=sr_1_13?
dchild=1& מילות מפתח=מילימטר
+נייר& qid=1617634163& sr=8-13
להב סכין מיקרוטום של האקר אינסטרומנטסהאקרים אינסטרומנטס
רצועת פלסטיק כבדהאוונטור89072-136
אינק הודוספידבול סופר בלאק
מהדקי אחיזה מהירה של אירווין, יד אחת, מיני בר, 6 אינץ', 4 חבילה (1964758)אירוויןhttps://www.amazon.com/IRWIN
-QUICK-GRIP-1964758-One-
ידנית-clamp/dp/B001DSY4
QO/ref=sr_1_5?crid=3NJ320
86LJCS6& dchild=1&; מילות מפתח
=מהדקים+ל+עבודות עץ& qid
=1617634545& sprefix=clamp%
2Caps%2C184& sr=8-5
Kreg KHC - מהדק פנים פרימיום  קרגhttps://www.amazon.com/KREG
-KHC-PREMIUM-Kreg-Face-
Clamp/dp/B001DC9UR8/ref=sxin
_11?ascsubtag=amzn1.osa.27
eddff2-544b-4c29-9242-220b3f
760cb0. ATVPDKIKX0DER.en_
ארה"ב & creativeASIN=B001DC9UR
8& crid=3NJ32086LJCS6& cv_ct_
cx=מהדקים+ל+נגרות& CV
_ct_id=AMZN1.OSA.27edDFF2-544B
-4C29-9242-220B3F760CB0. ATVP
DKIKX0DER.en_US& cv_ct_pg=
חיפוש & cv_ct_we=asin& cv_ct_wn
=OSP-Single-Source-Earns-Comm&
dchild=1&; מילות מפתח=מהדקים+ל+
נגרות linkCode=oas& pd_r
d_i=B001DC9UR8& pd_rd_r=eeaf7
178-eee3-4399-862a-479fffb6cfc3&
pd_rd_w=W3Inj& pd_rd_wg=PKPUl&
pf_rd_p=e666d5aa-04ca-46aa-86b0-
07ac28e037d4& pf_rd_r=22RKP4S4S
SS5PYDM2ZFD& qid=1617634545& קידומת s
=clamp%2Caps%2C184& SR=1-
2-64F3A41A-73CA-403A-923C-8152C4
5485FE & תגיג=הבית הישן 05-20
קלטת מעבדהאוונטור76276-016
לוקטיט 1363589 בקבוק 4 גרם דבק סופר גלו אולטרה ג'ל לבקרה, 3 חבילותלוקטיטhttps://www.amazon.com/Loctite-
1363589-4-Gram-Control-Adhesive/
dp/B01HPT0AWQ/ref=sr_1_13?
מילות מפתח=סופר-גלו+כוח+דבק
+ל+פלסטיק& qid=1642782991& s
קידומת=סופר-דבק%2Caps%2C83& sr=8-13
להבי מיקרוטום חד-פעמיים בעלי פרופיל גבוהמדעי אופטימליhttps://www.amazon.com/Optimal
-מדעית-מיקרוטום-פרופיל גבוה
-חד-פעמי/dp/B08MCSN6SL/ref
=sr_1_1?dchild=1& מילות מפתח=hig
h+פרופיל+קריוסטט+להב & qid=16
17592221& sr=8-1
שמן מינרליסיגמא-אלדריץ'M8410-100ml
PBSאוונטור97062-818
קצה ליטוש השיוף20 חלקים של קרבייד בר, 1/8 אינץ' שנק
Pre Starter Pellet Non-Med - #50 (Pipestone)פיפסטוןSKU  8228https://pipevet.com/pre-starter-pellet-non-med-50-hubbard
Red Devil 1170 PLEXIGLASS TOOLCARDהשטן האדוםhttps://www.amazon.com/dp
/B000BZZ1D0/?coliid=I3C0K3
AKD3TS75& colid=XJ78FAXD8
5BF& psc=1& ref_=lv_ov_lig_dp_it
טושים קבועים של שארפי | סימני קצה אזמלטושhttps://www.amazon.com/
Sharpie-Permanent-Markers
-Chisel-Classic/dp/B00006IFI
A/ref=sr_1_8?crid=2GD78WJ5COF
NN& מילות מפתח=קבוע+סימן
S+מגוון+צבעים& qid=16427831
06& sprefix=permanent+markers%
2Caps%2C129& sr=8-8
ערבוב פלטה חמהקורנינג100493-718
ערבוב מג'נטVWR58948-138
STYLEZONE 10 חלקים לוחות אקריליק שקופים 8 x 10 אינץ' 0.08 אינץ' בעובי 2 מ"מסטייליזוןhttps://www.amazon.com/dp/
B08GJYS4TT/?coliid=I11RLE
V42BKEFB& colid=XJ78FAX
D85BF& psc=1& ref_=lv_ov_lig_dp_it
מגש ניתוחאוונטור10193-194
קרח רטובמעבדה
קצה עץ מעץכלי גילוף בעץ לכלי סיבובhttps://www.amazon.com/
stores/page/28E50A85-D8C
1-4669-8272-D5D435EA126F

מקורות

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,
  1. Jelsing, J., et al. The postnatal development of neocortical neurons and glial cells in the Gottingen minipig and the domestic pig brain. J Exp Biol. 209 (Pt 8), 1454-1462 (2006).
  2. Conrad, M. S., Dilger, R. N., Johnson, R. W. Brain growth of the domestic pig (Sus scrofa) from 2 to 24 weeks of age: a longitudinal MRI study. Dev Neurosci. 34 (4), 291-298 (2012).
  3. Conrad, M. S., Dilger, R. N., Nickolls, A., Johnson, R. W. Magnetic resonance imaging of the neonatal piglet brain. Pediatr Res. 71 (2), 179-184 (2012).
  4. Dobbing, J. The later growth of the brain and its vulnerability. Pediatrics. 53 (1), 2-6 (1974).
  5. Sorby-Adams, A. J., Vink, R., Turner, R. J. Large animal models of stroke and traumatic brain injury as translational tools. Am J Physiol Regul Integr Comp Physiol. 315 (2), R165-R190 (2018).
  6. Sauleau, P., Lapouble, E., Val-Laillet, D., Malbert, C. H. The pig model in brain imaging and neurosurgery. Animal. 3 (8), 1138-1151 (2009).
  7. Huang, C., et al. Speckle contrast diffuse correlation tomography of cerebral blood flow in perinatal disease model of neonatal piglets. J Biophotonics. 14 (4), 2021(2021).
  8. Dobbing, J., Sands, J. Quantitative growth and development of human brain. Arch Dis Child. 48 (10), 757-767 (1973).
  9. Lossi, L., D'Angelo, L., De Girolamo, P., Merighi, A. Anatomical features for an adequate choice of experimental animal model in biomedicine: II. small laboratory rodents, rabbit, and pig. Ann Anat. 204, 11-28 (2016).
  10. Lind, N. M., et al. The use of pigs in neuroscience: modeling brain disorders. Neurosci Biobehav Rev. 31 (5), 728-751 (2007).
  11. Andersen, A. D., et al. Delayed growth, motor function and learning in preterm pigs during early postnatal life. Am J Physiol Regul Integr Comp Physiol. 310 (6), R481-R492 (2016).
  12. Desantis, S., Minervini, S., Zallocco, L., Cozzi, B., Pirone, A. Age-related changes in the primary motor cortex of newborn to adult domestic pig Sus scrofa domesticus. Animals (Basel). 11 (7), 2019(2021).
  13. Pond, W. G., et al. Perinatal ontogeny of brain growth in the domestic pig. Proc Soc Exp Biol Med. 223 (1), 102-108 (2000).
  14. Huang, C. C., Chen, Y. Y., Fang, Y. T., Chen, Y. C., Hung, C. M. Generating brain matrices for zebra finch brain sectioning using three-dimensional printing technology. J Neurosci Methods. 327, 108399(2019).
  15. Yamazaki, Y., Yuguchi, M., Honjo, B., Isokawa, K. Design and fabrication of customized brain slice matrices using CAD and 3D printing technology. PLoS One. 20 (1), e0317616(2025).
  16. Lattin, C. R., et al. A 3D-printed modular device for imaging the brain of small birds. J Neurosci Methods. 293, 183-190 (2018).
  17. Fleming, S. A., Monaikul, S., Mudd, A. T., Jacob, R., Dilger, R. N. Extraction and dissection of the domesticated pig brain. J Vis Exp. (170), e62030(2021).

הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.

הדפסות חוזרות והרשאות

בקש הרשאה לשימוש חוזר בטקסט או באיורים של מאמר JoVE זה

בקש הרשאה

תגיות

מאמרים קשורים