הרשמה ל-JoVE נדרשת לצפייה בתוכן זה. התחברו או התחילו בגרסת ניסיון בחינם.

מאמר שיטה

הערכת טרשת עורקים באבי העורקים מעכברים שהוזרקו AAV8-PCSK9 על ידי צביעת שמן אדום O

1.6K צפיות

⸱

DOI:

10.3791/68795

⸱

8 באוגוסט 2025

 , 
1Department of Endocrinology, The First Affiliated Hospital of USTC, Division of Life Sciences and Medicine, University of Science and Technology of China, 2Anhui Provincial Key Laboratory of Metabolic Health and Panvascular Diseases

במאמר זה

סיכום

פרוטוקול זה מתאר שיטה שלב אחר שלב לניתוח, פרוז, צביעה, הדמיה וכימות נגעים טרשת עורקים בפנים באבי העורקים של עכבר באמצעות צביעת שמן אדום O.

תקציר

מודלים של עכברים הם כבר מזמן כלים בסיסיים בחקר טרשת עורקים, ומספקים תובנות קריטיות לגבי המנגנונים המולקולריים והתאיים העומדים בבסיס היווצרות הפלאק, חילוף החומרים של השומנים ודלקת לב וכלי דם. מעבר לעכברי Apoe-/- או Ldlr-/- , הזרקת AAV8-PCSK9D377Y בעכברי C57BL/6J רגילים עם הזנה תזונתית מערבית במקביל מתגלה כמודל נפוץ למחקר תרגומי בטרשת עורקים. צביעת שמן אדום O היא טכניקת אבן פינה להמחשת הצטברות שומנים ניטרלית ברקמות כלי הדם. הפשטות, העלות-תועלת והרגישות הגבוהה שלו לזיהוי נגעים עמוסים בשומנים הופכים אותו לסטנדרט הזהב להערכת עומס רובד טרשת עורקים במחקרים פרה-קליניים. במחקר זה, אנו מספקים פרוטוקול מפורט וניתן לשחזור עבור דיסקציה, זלוף, פתיחה אורכית, צביעת שמן אדום O, הדמיה וכימות חצי אוטומטי של עומס טרשת עורקים באבי העורקים הפנים, ללא צורך בפינים או שלבי הרכבה מורכבים. התוצאות שלנו מראות כי השילוב של הזרקת AAV8-PCSK9D377Y והאכלה בתזונה מערבית גורם ביעילות להיווצרות נגעים טרשת עורקים משמעותית בעכברים, וכי צביעת שמן אדום O היא טכניקה אמינה ויעילה להערכת שקיעת שומנים ועומס הפלאק. יתר על כן, למרות שפרוטוקול זה מותאם למודל המושרה AAV8-PCSK9 בעכברי C57BL/6J, ניתן להתאים אותו בקלות לשימוש במודלים ומינים אחרים, כגון עכברי Apoe-/- , עכברי Ldlr-/- ואוגרים סוריים זהובים Ldlr-/- .

מבוא

טרשת עורקים, המאופיינת בשקיעת שומנים ודלקת בתוך האינטימה העורקית, מייצגת את הבסיס הפתולוגי של מחלת עורקים כליליים ומגוון רחב של מחלות לב וכלי דם (CVD), כולל אוטם שריר הלב ושבץמוחי 1,2,3,4. מחלות לב וכלי דם נותרו הגורם המוביל לתחלואה ותמותה ברחבי העולם, ומציבות נטל בריאותי וכלכלי עולמי משמעותי 3,5. כבסיס הפתולוגי העיקרי של מחלות לב וכלי דם, טרשת עורקים זכתה לתשומת לב מחקרית נרחבת שמטרתה לחשוף את המנגנונים הבסיסיים שלה ולפתח אסטרטגיות טיפוליות יעילות. מודלים של עכברים ממלאים תפקיד מרכזי בהבהרת המנגנונים העומדים בבסיס אטרוגנזה ובהערכת התערבויות טיפוליות פוטנציאליות6. פיתוח מודלים של בעלי חיים היה חיוני בקידום ההבנה שלנו לגבי עורקים, ואפשר לחוקרים לנתח את המנגנונים התאיים והמולקולריים המעורבים ולהעריך אסטרטגיות טיפוליות מתפתחות 6,7. מודלים עכבריים קלאסיים של טרשת עורקים, כגון עכברים חסרי אפוליפופרוטאין E (Apoe−/-) ועכברים חסרי קולטן ליפופרוטאין בצפיפות נמוכה (Ldlr−/-), שימשו זה מכבר כדי לגרום להיפרליפידמיה והיווצרות פלאק חזקה. עם זאת, הייצור והתחזוקה של קווים מהונדסים גנטית אלה דורשים רבייה נרחבת, שעלולה לגזול זמן ולהגביל את הגמישות הניסויית 8,9,10. כדי להתגבר על מגבלות אלה, גישה חלופית המשתמשת בסרוטיפ 8 של נגיף הקשור לאדנו, המקודד מוטציה של רווח תפקוד בפרו-פרוטאין הממיר סובטיליסין/קקסין סוג 9 (AAV8-PCSK9D377Y) זכתה לבולטות. כאשר היא ניתנת לעכברי C57BL/6J מסוג בר בשילוב עם תזונה עתירת שומן וכולסטרול מהסוג המערבי, שיטה זו גורמת ביעילות להיפרכולסטרולמיה ונגעים טרשת עורקים בתוך מסגרת זמן קצרה יחסית - ללא צורך בהכלאות גנטיות מורכבות או הכלאה לאחור לרקע הנוטה לטרשת עורקים 9,11. למרות יתרונותיו, לדגם AAV8-PCSK9 יש מגבלות מסוימות המצדיקות התייחסות. יש לציין כי היקף ההיפרכולסטרולמיה והתפתחות נגעים טרשת עורקים יכול להיות מושפע ממשתנים כמו מינון ויראלי ואמצעי מתן נגיפי, שעשויים להציג שונות בין-חייתית ולהשפיע על יכולת השחזור של תוצאות ניסויים11.

כדי להעריך את נטל המחלה במודלים כאלה, צביעת שמן אדום O של אבי העורקים מספקת טכניקה מבוססת ורגישה להדמיה וכימות נגעים טרשת עורקים עשירים בשומנים לאורך פני השטח הלומינליים של כלי הדם12,13. גישה זו מציעה נתונים איכותיים וכמותיים כאחד ונמצאת בשימוש נרחב במחקרים פרה-קליניים להערכת ההשפעות של מניפולציה גנטית, התערבות תרופתית או אפנון תזונתי14.

במחקר זה, אנו מציגים פרוטוקול מעשי וניתן לשחזור לבידוד, זלוף, פתיחה אורכית, צביעת O בצבע אדום שמן, הדמיה וכימות אוטומטי למחצה של נגעים טרשת עורקים באבי העורקים של עכבר שלם. בפרוטוקול זה, AAV8-PCSK9D377Y ניתן במינון של 5 × 1011 גנומים וקטוריים (vg) לעכבר באמצעות הזרקת וריד זנב. בשילוב עם תזונה מערבית (WD) המכילה 40% קק"ל משומן ו-1.25% כולסטרול, ניתן להבחין בהתפתחות נגעים טרשת עורקים חזקה תוך 12-16 שבועות. הפרוטוקול כאן מייעל כל שלב בתהליך, מבטל את הצורך בהצמדת רקמות למשטחי שעווה ובמקום זאת משתמש בטכניקת שיטוח פשוטה המפחיתה את השונות והביקוש הטכני. השיטה לא רק מותאמת למודל המושרה AAV8-PCSK9D377Y בעכברי C57BL/6J, אלא גם ישימה בקלות למודלים אחרים של טרשת עורקים, כולל עכברי Apoe-/- ו-Ldlr-/-, כמו גם אוגרים זהובים סוריים Ldlr-/- 15,16,17,18,19שהתגלו כמודל מבטיח בשל חילוף החומרים השומני דמוי האדם שלהם.,

הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.

פרוטוקול

כל ההליכים בבעלי חיים בוצעו בהתאם להנחיות המפורטות ב-NIH ואושרו על ידי ועדת האתיקה של בעלי חיים של האוניברסיטה למדע וטכנולוגיה של סין (אישור אתיקה מס'. USTCACUC27120124102).

הערה: כל ההליכים הכוללים AAV8-PCSK9 צריכים להתבצע בארון בטיחות ביולוגי מאושר Class II בתנאי בטיחות ביולוגית רמה 2 (BSL-2). על הצוות ללבוש ציוד מגן אישי מתאים (PPE), כולל מעיל מעבדה, כפפות חד פעמיות ומשקפי מגן.

1. אינדוקציה של טרשת עורקים בעכברים

  1. הזריק עכבר C57BL/6J בן 8 שבועות תוך ורידי עם AAV8-PCSK9D377Y (5 ×10 11 vg לעכבר דרך וריד הזנב).
  2. הנח את העכבר על WD (המכיל 40% קק"ל משומן ו-1.25% כולסטרול) מיד לאחר ההזרקה.
  3. האכילו את העכבר WD במשך 12-16 שבועות כדי לגרום להיווצרות נגעים טרשת עורקים.
    הערה: תקופת האכלה של 12 שבועות משמשת בדרך כלל והוכחה כגורמת להיווצרות פלאק טרשת עורקים ברורה, במיוחד במודלים המושרים על ידי AAV8-PCSK9. משכי זמן ארוכים יותר (למשל, 16 שבועות) עלולים לגרום לנגעים מתקדמים יותר, ויש לבחור את נקודת הזמן האופטימלית על סמך מטרות הניסוי הספציפיות.
  4. עקוב באופן קבוע אחר משקל הגוף, הבריאות הכללית ורמות השומנים בפלזמה לאורך כל תקופת ההאכלה. לצורך פרופיל שומנים, אסוף דגימות דם בנקודת הזמן הבסיסית ובנקודות זמן נבחרות (למשל, כל 4 שבועות) באמצעות דימום תת-לסת או וריד זנב בהרדמה קצרה של איזופלורן.

2. המתת חסד וזלוף

  1. מתן נתרן פנטוברביטל (200 מ"ג/ק"ג, הזרקה תוך צפקית) כדי להמית את העכבר.
  2. פתח את חלל החזה כדי לחשוף את הלב.
  3. בצע חתך בתוספתן הפרוזדורים הימני והחדיר תמיסת מלח קרה-פוספט (PBS, כ-10 מ"ל) דרך החדר השמאלי באמצעות מחט 21 גרם כדי לשטוף את הדם.

3. דיסקציה של אבי העורקים

  1. הסר רקמות עודפות כגון הריאות ובלוטת התימוס כדי לחשוף את אבי העורקים החזי מהלב לסרעפת.
  2. השתמש במספריים עדינים ומלקחיים מדויקים כדי להסיר את רקמת השומן שמסביב לקשת אבי העורקים. הרם בעדינות את רקמת השומן המקיפה את בסיס אבי העורקים החזי ליד הסרעפת. כריתה לאורך שורש רקמת השומן באמצעות מספריים חיתוך עדינים (הקפדה על כך שמבנה כלי הדם אינו נפגע), המשך הדיסקציה כלפי מעלה לקשת אבי העורקים כדי לחשוף את כלי אבי העורקים במלואו.
    הערה: הדיסוציאציה של רקמת השומן הפרי-וסקולרית מאבי העורקים היא קריטית, ומומלץ לבצע שלב זה עם אבי העורקים באתרו (לפני חיתוך מהעכבר) מכיוון שדיסקציה של שומן פרי-וסקולרי מאבי העורקים קשה מבחינה טכנית לאחר ניתוח אבי העורקים והכנסתו ל-PBS.
  3. חצו את הכלי בבסיס אבי העורקים החזי באמצעות מספריים מדויקים. הרם את הקצה החתוך בעזרת מלקחיים ונתח כלפי מעלה לאורך הכלי לכיוון קשת אבי העורקים. נתק את שלושת הענפים העיקריים של אבי העורקים במרחק מתאים.
  4. יש לחצות את שורש אבי העורקים כדי להפריד את אבי העורקים החזי מהלב, ולבודד את המקטע השלם להמשך ניתוח.
  5. העבירו את הכלי שנכרתה לתמיסת פרפורמלדהיד (PFA) מקוררת מראש של 4% ודגרו בטמפרטורה של 4 מעלות צלזיוס למשך הלילה (12-16 שעות). כדי לתקנן את הטיפול ולהקל על עיבוד אצווה, הנח אבי העורקים הבודדים לבארות של צלחת של 24 בארות או 48 בארות במהלך הקיבוע.
    הערה: הימנע מקיבוע ממושך (מעל 24 שעות), מכיוון שדגירה מוגזמת ב-PFA עלולה לגרום להתקשות הכלי, לעכב חתך אורכי וניתוח נוסף.
    זהירות: 4% PFA הוא חומר קיבוע רעיל ונדיף המהווה סיכונים לחשיפה נשימתית ועורית. כל השלבים הכרוכים בקיבוע PFA חייבים להתבצע במכסה אדים תוך לבישת PPE, כולל כפפות ניטריל, מעיל מעבדה ומשקפי בטיחות. הימנע משאיפה ומגע בעור. יש לאסוף את תמיסת ה-PFA המשומשת במיכלי פסולת פורמלדהיד ייעודיים, מסומנים בבירור ולהשליך כפסולת כימית מסוכנת על ידי שירות פינוי פסולת כימית מוסדי או מורשה.

4. מכתים אדום שמן O

  1. שטפו את אבי העורקים הקבועים שלוש פעמים עם PBS כדי להסיר שאריות PFA.
  2. כפי שמוצג באיור 1, פתחו את אבי העורקים לאורך תחת מיקרוסקופ חיתוך באמצעות מספריים עדינים, החל משורש אבי העורקים לצד העקמומיות הפנימית. לחלופין, פתח את אבי העורקים לפני הקיבוע, מה שעשוי להקל על הפתיחה והיישור של הכלי במהלך ההרכבה. במידת הצורך, פתח לאורך את הענפים העיקריים של קשת אבי העורקים - כגון העורק הברכיוצפלי (BCA), עורק הצוואר הימני (RCA) והעורק התת-בריחי השמאלי - כדי לחשוף אזורים נוספים11. היזהר במהלך שלב זה, מכיוון שפלאק באזורים אלה עלול להתנתק או להינזק.
    הערה: ניתן לבחור בכל אחת מהגישות על סמך העדפת המפעיל ומצב הרקמה.
  3. הכן את תמיסת העבודה Oil Red O על ידי דילול המלאי של 0.5% באיזופרופנול במים נטולי יונים ביחס של 3:2 (v/v, ריכוז סופי 0.3%). יש לדגור באמבט מים של 37 מעלות צלזיוס למשך 5 דקות כדי להמיס את הצבע לחלוטין.
  4. סנן דרך קרום של 0.22-0.45 מיקרומטר כדי להסיר משקעים. שמור את התמיסה באמבט מים של 37 מעלות צלזיוס עד לשימוש.
  5. הסר PBS מכל באר. הוסף תמיסת עבודה Oil Red O כדי לטבול את אבי העורקים במלואו. דגירה בטמפרטורת החדר (RT) למשך 10 דקות.
  6. לאחר הדגירה יש לשאוב את התמיסה ולהוסיף מיד 1 מ"ל של 60% איזופרופנול לכל באר. מניחים את הצלחת על שייקר ומערבבים בעדינות לשטיפה.
  7. לאחר כ-30 שניות, כאשר האזורים שאינם נגעים בכלי נראים שקופים, הפסק את הכביסה על ידי שאיבת האיזופרופנול. שוטפים את הדגימות פעמיים עם PBS.
  8. לאחר צביעת שמן אדום O, חתוך עוד יותר את רקמת השומן הפרי-וסקולרית הנותרת, במידת הצורך. בשלב זה, רקמת השומן בדרך כלל מוכתמת היטב וניתנת להבחנה ויזואלית, מה שמאפשר זיהוי והסרה מדויקים יותר מבלי לפגוע בשלמות דופן כלי הדם.
  9. לאחר צביעת שמן אדום O, פתח את אבי העורקים לאורך והרכיב אותו בזהירות שטוח על שקופית זכוכית להדמיה מיידית תחת סטריאומיקרוסקופ.
  10. לחלופין, אחסן את הדגימות לטווח קצר ב-PBS ב-4 מעלות צלזיוס לפני ההדמיה. עבור עורקים שקשה לשטח, הצמד את הכלים לצלחת שעווה שחורה באמצעות מחטים עדינות כדי להבטיח מיקום ובהירות מיטביים. לשימור ארוך טווח, הרכיבו את הכלים הצבעוניים על שקופיות זכוכית, אטמו אותם בג'לטין גליצרול ואז צלמו אותם ישירות.
    הערה: העבירו את אבי העורקים המוכתמים לצלחת חדשה לשטיפה כדי למנוע זיהום משאריות שמן אדום O.
    זהירות: Oil Red O הוא צבע ליפופילי המוכן בדרך כלל באיזופרופנול, שהוא דליק ומגרה. טפל בתמיסות ORO במכסה אדים כימי כדי למנוע שאיפת אדים. יש להימנע ממגע עם העור והעיניים. יש לאסוף בנפרד תמיסות מכתים של שמן אדום O במיכלי פסולת כימית דליקים. השלך בהתאם לתקנות המקומיות לסילוק פסולת מסוכנת.

5. הדמיה

  1. הרכיבו את אבי העורקים המוכתמים על רקע לבן כדי לשפר את הניגודיות. שמור על גמישות כלי השיט.
    הערה: רקע בעל ניגודיות גבוהה מאפשר זיהוי פלאק יעיל יותר באמצעות תוכנה לניתוח תמונות. ניתן להשתמש גם בצבעי רקע אחרים בהתאם להעדפת המשתמש.
  2. צלם את כל אבי העורקים באמצעות סורק שטוח או מיקרוסקופ מנתח עם מצלמה ברזולוציה גבוהה.
  3. הקפידו על תאורה אחידה והגדלה עקבית על פני הדגימות (למשל, הגדלה פי 6 עד 8). אם אבי העורקים מתייבש במהלך ההדמיה, החזירו לחות באמצעות מגבוני קיווי טבולים במי מלח או PBS.

6. כימות נגעים טרשת עורקים

  1. פתח את התמונה ב-ImageJ. השלבים הבאים מתארים את הליך הניתוח באמצעות ImageJ כדוגמה.
    הערה: ניתן להשתמש גם בתוכנות אחרות לניתוח תמונות (למשל, Zeiss Zen, Fiji) בהתאם להעדפת המשתמש ולזמינותו.
  2. הגדר את קנה המידה באמצעות הפניה ידועה (למשל, סרגל קנה מידה או סרגל). השתמשו בכלי קו ישר כדי לצייר לאורך המרחק הידוע. עבור אל Analyze > Set Scale, הזן את המרחק והיחידות, בחר Global ולחץ על OK.
  3. השתמשו בכלי Polygon או Freehand Selection כדי לתאר את כל אזור אבי העורקים.
  4. מדוד את האזור באמצעות ניתוח > מדידה.
  5. זיהוי אזורי פלאק טרשת עורקים באמצעות Image > Adjust > Color Threshold. התאימו את הרוויה והבהירות כדי לבודד אזורים חיוביים ל-O בצבע אדום שמן.
  6. לחץ על Select כדי ליצור בחירה בינארית של אזורים מוכתמים. מדוד את האזורים שנבחרו באמצעות Analyze > Measure. החילו את אותן הגדרות סף על כל התמונות באצווה.
    הערה: בהתחשב בכך ששאריות שומן או חפצים עלולים לגרום לצביעה חיובית כוזבת, משתמשים עשויים לבחור להגדיר באופן ידני או חצי אוטומטי אזורי פלאק על סמך צרכי הניסוי הספציפיים שלהם ואיכות התמונה. ניתן לבצע מעקב ידני אחר שטח הפלאק באותה שיטה כמו להגדרת שטח הכלי הכולל.
  7. ייצא תוצאות (קובץ > שמור בשם > תוצאות) .csv להמשך ניתוח.
  8. אזור פלאק אקספרס כשטח הפלאק/שטח אבי העורקים הכולל × 100%. כדי לקבל הערכה מדויקת יותר של עומס הפלאק הטרשתי, כמת את שטח הפלאק לפי אזורים אנטומיים (למשל, קשת אבי העורקים, במיוחד העקמומיות הקטנה יותר, ואבי העורקים הכולל), ובטא את התוצאות כאחוז שטח הפלאק ביחס לשטח הפנים הכולל של כל אזור בהתאמה: שטח הפלאק (%) = (שטח הפלאק / השטח הכולל של האזור) × 100%.
    הערה: כדי למזער הטיה פוטנציאלית, מומלץ ניתוח סמיות. אם מנתחים מספר רב של תמונות, ניתן להפוך את כל זרימת העבודה מהסף למדידה לאוטומטית באמצעות מקליט המאקרו (תוספים > פקודות מאקרו > הקלטה) ולעבד אותה בכמות גדולה באמצעות Process > Batch > Macro. זה מאפשר ניתוח יעיל וניתן לשחזור בתפוקה גבוהה.

הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.

תוצאות

כדי להעריך את היקף שקיעת השומנים בדופן אבי העורקים, בוצעה צביעת שמן אדום O על אבי העורקים שבודדו מעכברי C57BL/6J זכרים שהוזרקו עם AAV8-PCSK9D377Y והוזנו בתזונה מערבית במשך 12 שבועות, יחד עם עכברי ביקורת תואמי גיל. לאחר זלוף מערכתי עם PBS ודיסקציה זהירה, כל אבי העורקים נותחו בקפידה לאורך ונצבעו בשמן אדום O כדי לדמיין נגעים טרשת עורקים עמוסי שומנים. הליך הניסוי הכולל מתואר באיור 2. כפי שמוצג באיור 3, אזורים חיוביים ל-O אדום שמן (אדום) נצפו בקושי בעכברי ...

הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.

דיון

שיטת הצביעה של שמן אדום O המתוארת במחקר זה מציעה גישה חזקה, ניתנת לשחזור וחסכונית בזמן להערכת עומס נגעים טרשת עורקים בכל אבי העורקים. במחקר זה, בחרנו באופן ספציפי את קשת אבי העורקים ואת אבי העורקים החזי כאזורי העניין לניתוח הפלאק, ולא את אבי העורקים כולו. החלטה זו הונחה על ידי אופיו של AAV8-PCSK9D377Y מודל20, המייצר בדרך כלל היווצרות רובד טרשת עורקים פחות נרחבת בהשוואה למודלים גנטיים קלאסיים כמו עכברי Apoe−/−

הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.

גילויים

למחברים אין מה לחשוף.

תודות

מחקר זה נתמך על ידי מענקים מהקרן הלאומית למדעי הטבע של סין (מענק מס' 82370444).

הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.

חומרים

רשימת החומרים שנעשה בהם שימוש במאמר זה
שםחברהמספר קטלוגהערות
עכברי C57BL/6JGemPharmatech מס' N000013
  4% פרפורמלדהידBeyotimeP0099לקיבוע רקמות
AAV8-PCSK9D377Y חלקיקים נגיפיים WzbiopAV208001כדי לגרום לטרשת עורקים
מלקחיים עדיניםכלים מדעייםעדינים מס' 11254-20לדיסקציה של אבי העורקים
ImageJNIH1.47
IsopropanolSangon biotechA600918לניקוי עודפי השמן האדום
שמן אדום O 0.5% תמיסה באיזופרופנולPoly Scientific R& D CorpS1849-32OZלשמן אדום O מכתים
מי מלח חוצץ פוספטServicebioG4202לזלוף וניקוי של אבי העורקים
מספריים אביהעורקים כלים מדעיים עדיניםמס' 15003-08לדיסקציה של אבי
העורקים מיקרוסקופ סטריאוסקופיMshotMZ62לדיסקציה והדמיה של אבי העורקים
דיאטה מערבית דיאטת מחקרD12108Cלגרום לטרשת עורקים

מקורות

  1. Libby, P., et al. Atherosclerosis. Nat Rev Dis Primers. 5 (1), 56(2019).
  2. Björkegren, J. L. M., Lusis, A. J. Atherosclerosis: Recent developments. Cell. 185 (10), 1630-1645 (2022).
  3. Libby, P. The changing landscape of atherosclerosis. Nature. 592 (7855), 524-533 (2021).
  4. Wang, Z., Chen, S., Zhang, F., Akhmedov, S., Weng, J., Xu, S. Prioritization of Lipid Metabolism Targets for the Diagnosis and Treatment of Cardiovascular Diseases. Research (Wash D C). (8), 0618(2025).
  5. GBD 2021 Stroke Risk Factor Collaborators. Global, regional, and national burden of stroke and its risk factors, 1990-2021: A systematic analysis for the global burden of disease study 2021. Lancet Neurol. 23 (10), 973-1003 (2024).
  6. Von Scheidt, M., et al. Applications and limitations of mouse models for understanding human atherosclerosis. Cell Metab. 25 (2), 248-261 (2017).
  7. Gisterå, A., Ketelhuth, D. F. J., Malin, S. G., Hansson, G. K. Animal models of atherosclerosis-supportive notes and tricks of the trade. Circ Res. 130 (12), 1869-1887 (2022).
  8. Emini Veseli, B., et al. Animal models of atherosclerosis. Eur J Pharmacol. 816, 3-13 (2017).
  9. Ilyas, I., et al. Mouse models of atherosclerosis in translational research. Trends Pharmacol Sci. 43 (11), 920-939 (2022).
  10. Jiang, H., et al. Innovative atherosclerosis models: Advancing pathophysiology and translational research. Research (Wash D C). 8, 0617(2025).
  11. Bjørklund, M. M., et al. Induction of atherosclerosis in mice and hamsters without germline genetic engineering. Circ Res. 114 (11), 1684-1689 (2014).
  12. Chen, P. -Y., Qin, L., Simons, M. Imaging and analysis of oil red o-stained whole aorta lesions in an aneurysm hyperlipidemia mouse model. J Vis Exp. (183), e61277(2022).
  13. Nunnari, J. J., Zand, T., Joris, I., Majno, G. Quantitation of oil red o staining of the aorta in hypercholesterolemic rats. Exp Mol Pathol. 51 (1), 1-8 (1989).
  14. Xu, S., et al. The novel coronary artery disease risk gene jcad/kiaa1462 promotes endothelial dysfunction and atherosclerosis. Eur Heart J. 40 (29), 2398-2408 (2019).
  15. Sun, L., et al. Endothelial MICU1 protects against vascular inflammation and atherosclerosis by inhibiting mitochondrial calcium uptake. J Clin Invest. 135 (7), e181928(2025).
  16. Su, M., et al. Endothelial IGFBP6 suppresses vascular inflammation and atherosclerosis. Nat Cardiovasc Res. 4 (2), 145-162 (2025).
  17. Zhang, Z., et al. A natural small molecule isoginkgetin alleviates hypercholesterolemia and atherosclerosis by targeting acly. Theranostics. 15 (10), 4325-4344 (2025).
  18. Zhao, Y., et al. Small rodent models of atherosclerosis. Biomed Pharmacother. 129, 110426(2020).
  19. Zhang, F., Yin, Y., Weng, J., Xu, S. Cepharanthine aggravated atherosclerosis and liver injury in Apoe−/− and Ldlr−/− mice. Cardiol Plus. 10 (1), 23-33 (2025).
  20. Liu, M. -N., et al. Revisiting the role of GDF15 in atherosclerosis in mouse and human. Acta Pharmacol Sin. , doi: 10.1038/s41401-025-01561-3 (2025).
  21. Balamurugan, K., et al. Protocol to evaluate hyperlipidemia in zebrafish larvae. STAR Protoc. 3 (4), 101819(2022).
  22. Schneider, C. A., Rasband, W. S., Eliceiri, K. W. NIH image to imageJ: 25 years of image analysis. Nat Methods. 9 (7), 671-675 (2012).

הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.

הדפסות חוזרות והרשאות

תגיות

הערכת טרשת עורקיםעכברי AAV8-PCSK9אאורטה בשיטת En Faceנטל פלאקיםשקיעת ליפידיםעכברים בתזונה מערביתדיסקציה של אאורטה של עכברנגע טרשתיהצטברות ליפידים

מאמר זה פורסם

הסרטון יגיע בקרוב

צרו קשר
המליצו לספרייה

פרטיות

תנאי שימוש

מדיניות

זכויות יוצרים © 2026 MyJoVE Corporation. כל הזכויות שמורות.