פרוטוקול זה מתאר את הטכניקה הכירורגית לקצירת מודל פרפורטור אנושי המבוסס על הפדיקל העמוק של עורק אפיגסטרי תחתון, המיועד למחקר ניסוי.
הרשמה ל-JoVE נדרשת לצפייה בתוכן זה. התחברו או התחילו בגרסת ניסיון בחינם.
מאמר שיטה
פרוטוקול זה מתאר את הטכניקה הכירורגית לקצירת מודל פרפורטור אנושי המבוסס על הפדיקל העמוק של עורק אפיגסטרי תחתון, המיועד למחקר ניסוי.
לאחרונה, גישות שימור כגון הזרקת חומרים מגנים ציטו, פרפוזיה במכונה אקס ויבו וקירור-על הופיעו כאסטרטגיות לשיפור שימור ארוך טווח של איברים סטנדרטיים ושוליים על ידי הפחתת פגיעות איסכמיות והיפוקסיות. למרות שזה מעודד, היישום שלו בתחום האלוטרנסנסלנטציה המרוכבת של כלי דם (VCA) נשאר בעיקר מוגבל למחקר פרה-קליני. עד כה, רוב המחקרים שחקרו אסטרטגיות פרפוזיה של VCA הסתמכו על מודלים של בעלי חיים, במיוחד על תרכובות חזירים או מכרסמים. בעוד שמודלים אלו מספקים תובנות מכניות חשובות, ההבדלים האנטומיים, האימונולוגיים והפיזיולוגיים שלהם מגבילים את השחזוריות והרלוונטיות התרגומית ליישומים אנושיים.
בפרוטוקול זה, כל שלב ניתוחי הנדרש לרכישת פרפורטור אפיגסטרי עמוק תחתון (DIEP) אנושי לצורך מחקרי שימור מתואר בפירוט. הפורפורטור מחובר מעל הפאשיה ללא כל דיסקציה תת-פאסיאלית, מה שיוצר פדיקלה קצרה אך מספקת לקטטריזציה. מודל זה מנצל רקמות שהושלכו מההליכים הסטנדרטיים של הבטן, ואינו מהווה סיכון נוסף למטופל. נקבעו צעדים קריטיים כדי להבטיח שהפל הפונקציונלי יילקח מבלי להאריך את זמן הניתוח או לפגוע בבטיחות המטופל. בהמשך מתבצעת הדמיה פונקציונלית לאישור עמידות הפלפל לפני השימוש הניסוי, וביופסיות עוקבות עשויות להתבצע כדי לעקוב אחרי שלמות הרקמה. מודל זה מתאים במיוחד למחקרים העוסקים בהליכים של VCA לשמירה על שרירים – כגון השתלת פנים חלקית – וייתכן שיש לו רלוונטיות גם למחקר שימור דש חופשי אוטולוגי.
ההשתללות המשולבת הוסקולרית (VCA) מייצגת פתרון משקם מבטיח עבור מטופלים עם פגם רקמתי מורכב, במיוחד בפנים ובגפיים העליונות1. עם זאת, VCA רגיש מאוד לפגיעה באיסכמיה-רפוזיה, מה שעלול לפגוע בחיוניות השתל ובתוצאות ארוכות הטווח2. בהקשר זה, גישות שימור כגון הזרקת חומרים מגנים על ציטו, פרפוזיה במכונה ex vivo וקירור-על הופיעו כאסטרטגיות להארכת זמן השימור, אופטימיזציה של איכות השתל ואפשרות הערכת הקיימות לפני השתלה 3,4,5,6,7. בעוד שפרפוזיה נורתרמית אקס ביבו של איברים מוצקים תורגמה בהצלחה מטכניקת מעבדה ניסיונית לפרקטיקה קלינית בעשור האחרון, עם תוצאות מבטיחות, היא נשארת בעיקר מוגבלת למחקר בתחום VCA9.
עד כה, רוב המחקרים שחקרו פרוטוקולי פרפוזיה של VCA הסתמכו על מודלים של בעלי חיים, במיוחד על תרכובות חזירים או מכרסמים10. בעוד שמודלים אלו מציעים תובנות חשובות, הם מגבילים מטבעם את השחזוריות והרלוונטיות התרגומית בשל הבדלים אנטומיים, אימונולוגיים ופיזיולוגיים11,12. מודלים של רקמות אנושיות מספקים תובנות רלוונטיות יותר, אך רקמות טריות מתורמים עם מוות מוחי קשות מאוד לגישה למטרות מחקר, ודורשות לוגיסטיקה מורכבת, אישור רגולטורי קפדני ומעוררות חששות אתיים13,14. אלטרנטיבה אידיאלית תהיה מודל פלפ שאינו גופתי, מקובל מבחינה אתית, מבוסס על בני אדם, שאינו נושא את המורכבות או הסיכון של הליך VCA מלא ובטוח לחלוטין למטופל. חשוב לציין, היא גם צריכה להיות נגישה בקלות כדי להקל על מחקר שניתן לשחזור ולהרחבה.
כאן מתואר מודל פרפורטור אפיגסטרי תחתון עמוק אנושי (DIEP) למחקר שימור VCA, המשתמש ברקמה שהושלכה מהליכים של בטן ללא סיכון נוסף למטופל.
הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.
כל המטופלים קיבלו טיפול הומני סטנדרטי בהתאם להצהרת הלסינקי, והפרוטוקול אושר על ידי ועדת האתיקה המוסדית (פרויקט מס' IRB00014528_2025_32). המטופל נתן הסכמה מדעת לשימוש ברקמה שהושלכה למטרות מחקר.
1. טיפול טרום-ניתוחי
הערה: פלפים מחוררים עוריים אלו, למעט פאשיה ושריר, מקורם בפסולת ניתוחית אצל מטופלים, לרוב לאחר בריאטריה, וניתן לאסוף אותם רק במקרים של דרמוליפקטומיה קודמת עם טרנספוזיציה טבורית צפויה (כלומר, פאנוס בטני משמעותי). שאיבת שומן מתוכננת במהלך ההליך היא קריטריון של הדרגה. תיקון דיאסטזיס במקביל אינו מניעה, שכן הליך זה מתבצע לאחר קצירת הדפים. הפנוס הבטני מספק בדרך כלל כיסוי לפחות חלקי של אזור הערווה. למטופלים אין היסטוריה של אירועים טרומבומבוליים, ומדד מסת הגוף (BMI) חייב להיות מתחת ל-30 ק"ג/מ"ר, שכן ערכים גבוהים יותר קשורים להשמנה וליחס סיכון-תועלת לא מיטיב בהליכים אלקטיביים לא חיוניים תחת הרדמה כללית. ניתוח בטן קודם, למעט שאיבת שומן, בדרך כלל אינו מהווה תווית נגדה, בתנאי שהפרפורטור מזוהה בבדיקת דופלר או מוצג ישירות במהלך הניתוח. יש להימנע מהליך מחקר זה גם בשחזורי DIEP קליניים חד-צדדיים אמיתיים, שהם ניתוחים ארוכים ומורכבים שבהם שלבים נוספים לפני הניתוח יהיו לא רציונליים ויגביר את הסיכון הפרוצדורלי.

איור 1: הערכה טרום-ניתוחית לפני דרמוליפקטומיה בטנית לאחר בריאטרית עם קטיף פלפ DIEP. (א) סימון טרום-ניתוחי שנעשה באמצעות דופלר אקוסטי ועט דרמוגרפי לזיהוי והצגת הפרפורטורים הפראמביליקליים בכל צד של קו האמצע. (ב) המנתח מדגים את הרפיון של עור הבטן והרקמה התת-עורית שיש להסיר, ומדגיש את הפניקולוס האדיפוקוטני לפני החתך לאורך קו הסימון האופקי. אנא לחצו כאן כדי לצפות בגרסה מוגדלת של הדמות הזו.
2. רכישת פלפים

איור 2: תצוגה תוך ניתוחית של הליך הדרמוליפקטומיה הבטנית עם שלד של הפדיקולות האפיגסטריות העמוקות התחתונות של פורפורטור. התמונה מציגה את שדה הניתוח לפני הניתוח העליון והחלוקה האורכית התת-אונטיאלית. שני הפרפורטורים הדו-צדדיים הדומיננטיים של האפיגסטריה העמוקה התחתונה הפראומביליים חשופים ומודגשים באמצעות כלים כירורגיים. אנא לחצו כאן כדי לצפות בגרסה מוגדלת של הדמות הזו.

איור 3: תצוגה תוך ניתוחית לאחר ניתוח על-אומביאלי המראה את הפרפורטורים האפיגסטריים העמוקים התחתונים הדו-צדדיים. המחוררים אינם קשורים, ומסלול התת-פאסיה ואורכם ניתנים להערכה טובה יותר תחת משיכה עדינה (חצים לבנים). אנא לחצו כאן כדי לצפות בגרסה מוגדלת של הדמות הזו.

איור 4: תצוגה תוך ניתוחית המציגה את דפי ה-DIEP המסומנים על העור בצורת אליפטית לפני הקשירה. (א) משוט העור מכוון ומסומן בצורת אליפטית באמצעות עט דרמוגרפי (עיגול לבן) כדי להבטיח הכללת המקדש לאורך הקצה המדיאלי של הפלפל משני צידי הפניקולוס האדיפוקוטני. (B) תצוגה מורחבת המציגה את קווי המתאר של ה-DIEP ואת המקדש המסומן ב-"x" לפי מיפוי דופלר לפני הניתוח (חץ לבן). אנא לחצו כאן כדי לצפות בגרסה מוגדלת של הדמות הזו.
איור משלים 1: משיכה כלפי מטה על הפלפל העליון של הבטן מסייעת לקבוע את כמות העור המיותר שיש לכרות. הקצה הארוך של התפר הלא-נספג האמצעי שמחבר בין האזורים העליונים לאזור הערווה משמש כמדריך. באמצעות עט דרמוגרפי, ציירו את קו הכריתה לאורך מסלול התפר (חצים לבנים) על הפניקולוס האדיפוקוטני המיותר. הארכי את הקו הזה לרוחב לכיוון כל עמוד שדרה איליאק עליון קדמית. מדפי ה-DIEP ממוקמים מתחת לקו הכריתה המסומן הזה. אנא לחצו כאן להורדת הקובץ הזה.

איור 5: מבט תוך ניתוחי על הפלפים של מפרפורטור העורק האפיגסטרי התחתון העמוק (DIEP) במהלך הקציר, לאחר קשירת הפדיקול. (א) פלפ ה-DIEP, בגודל של כ-10 ס"מ × 6 ס"מ, מסומן בסמן ניתוחי לאחר מיקום המקדש. (ב) חתך עור ואיסוף הפלפל מתבצעים לאורך הסימונים שנקבעו מראש. החתך הראשוני מתבצע עם להב מספר 15, ואחריו ניתוח באמצעות אלקטרוקוטרי מונופולרי בטמפרטורה של כ-50-60 מעלות צלזיוס, ו-80 וואט במצב קרישה, כאשר רקמת השומן העורית העודפת נשארת מחוברת למטופל. כאשר הרקמה מנותקת לחלוטין, משתמשים בעט צריבה חד-פעמי, (קצה גדול, כ-1,200 מעלות צלזיוס) להשלמת ההפרדה. אנא לחצו כאן כדי לצפות בגרסה מוגדלת של הדמות הזו.
3. הכנת הדש

איור 6: תצוגה לאחר הקציר של פלפ DIEP מחקרי. (א) הפלאפ שנקטף מוצג כאשר הפדיקולה הווסקולרית מפורקת ומבודדת באמצעות מלקחיים מיקרוכירורגיים. קצה העורק נחתך בכמה מילימטרים כדי לקבל חיתוך נקי, והלומן נפתח בעדינות באמצעות מלקחיים מיקרו-מרחיבים. (ב) תקריב המראה מלקחיים מיקרוכירורגיים שמחזקים את העורק המחורר הדומיננטי, עם קטטר 24-G שהוחדר ללומן להזרקת חומר ניגוד. אנא לחצו כאן כדי לצפות בגרסה מוגדלת של הדמות הזו.

איור 7: קטטריזציה של פדיקל הפלפל של DIEP. (א) הקטטר מאובטח במקומו עם תפר משי 5-0 קשור בעדינות כדי לא לחסום את הלומן של הפדיקולה. (ב) מבט על הקטטר הממוקם ללא המזרק מחובר, המראה את היקף החדרת הקטטר ללומן הווסקולרי. אנא לחצו כאן כדי לצפות בגרסה מוגדלת של הדמות הזו.

איור 8: פלואורוסקופיה לאחר הקציר של פלפ DIEP המדגים את האנטומיה הוסקולרית. (A,B) חומר ניגוד מוזרק דרך קטטר 24-G לעורק הפרפורטור הדומיננטי, המציג את דפוס ההסתעפות והאזור הוסקולרי, ומאשר את עמידות הפלפל בשני פלפים שונים. אנא לחצו כאן כדי לצפות בגרסה מוגדלת של הדמות הזו.
הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.
נלקחו אחד עשר פלפים משש מטופלות שנכללו במחקר זה. שני מנתחים פלסטיים בכירים, בעלי ניסיון בניתוחי פלפ ובטנופלסטיה, ביצעו את הניתוחים. אצל מטופל אחד, הדש נקטף באופן חד-צדדי עקב בעיית ניתוח. המדפים שנקטפו היו במשקל ממוצע של 198.6 ± 24.4 גרם (n = 11) וגודל ממוצע של 10 ס"מ × 6 ס"מ, מה שהתאים לדרישות המדגם למחקר השימור שבו שימשו המדפים הללו. אורך הפדיקולה, שנמדד תחת מתח עדין, היה בממוצע 3.85 ± 0.74 ס"מ, וקוטר הכלי החיצוני, שנמדד עם קליפר, היה 1.2 ± 0.3 מ"מ. הקטטר נצפה כמוכנס לעומק ממוצע של 1.75...
הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.
מודלים אנושיים מסייעים לגשר בין ממצאים ממחקרי בעלי חיים לפרקטיקה קלינית, ומשפרים את הרלוונטיות והחיזוי של מחקר פרה-קליני 16,17,18. הם חייבים להיות מתוכננים בקפידה כדי להבטיח בטיחות ועמידה אתית, לעיתים תוך הגבלת היקף ופולשני הניסויים17. בכל ארבעת הפלפים שנקטפו, לא היה צורך בניתוח נוסף, ולא נרשמה הארכה משמעותית של זמן הניתוח באף אחד מהמקרים. הקוטר הגדול יחסית של כלי הדפה הזו (ממוצע 1.2 מ"מ) מקל על הקנולציה ...
הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.
למחברים אין מה לחשוף.
| שם | חברה | מספר קטלוג | הערות |
|---|---|---|---|
| מזרק 1 מ"ל ו-5 מ"ל לואר-לוק | בקטון דיקינסון | https://www.bd.com/en-us/products-and-solutions/products/product-page.309646 | |
| 11.5" מיישמת קליפס כלי תפר אוטומטית Surgiclip II פרימיום בינוני וקטן | Covidien | לא זמין | |
| 22– קצה קנולה של כלי 24G | מדטרוניק בע"מ | לא זמין | |
| תפר משי 5-0 | לא זמין | כל תפר תואם | |
| עט צריבה חד-פעמי, המופעל על סוללה | Helpmedical, אירופה | לא זמין | 1200 & מדרגה C, קצה גדול |
| אדסון פורספס | MPM | 106-2112A | |
| מלקחי קרישה דו-קוטביים | אולסן | 20-1320I | |
| סכין חד-פעמית #15 & #21 | סקלאר | לא זמין | |
| אוסין | מיקרו מיקרוטק | U/C0363 | |
| רטרקטורים של פאראבוף | מדיקטה אינסטרומנטס | לא זמין | |
| צריבה דקה במחט | קורמדיקה | לא זמין | |
| OEC MiniView Max | GE Healthcare | לא זמין | מערכת פלואורוסקופיה |
| מדילטורי מלקחיים | WPI | 15910 | |
| המטוקסילין | מיקרו מיקרוטק | U/C0303 | |
| Iohexol 300 מ"ג I/mL | GE Healthcare Canada Inc. | לא זמין | |
| מספריים מיקרו | WPI | 504492 | |
| דיאתרמיה מונופולרית של Valleylab | מדטרוניק בע"מ | ||
| מדיום ניגוד יודיני לא יוני, Omnipaque 300 מ"ג I/mL | GE Healthcare | לא זמין | |
| דופלר אקוסטי נייד, 8 MHz | פארקס מדיקל אלקטרוניקס | https://www.parksmed.com/ | |
| תמיסת מי מלח 0.9% | GenDepot | S0600-101 | |
| סט כלים סטנדרטי לניתוחים פלסטיים | אסקולאפ | לא זמין | כולל ידית סכין מס' 3, מספריים של מטזנבאום ומאיו, מלקחיים של אדסון וגיליס, מספריים לניתוח, המסטטים ומחזיקי מחטים. |
| מספריים של פזילות | סורטקס | 102-4109 | |
| עט סימון ניתוחי | בריאות הקרדינלית | 212PR | |
| תפרים אתילון 4.0 ו-3.0 | אתיקון | 1667G | |
| מלקחי רקמה | MPM | 106-0511 |
הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.