When is intradermal injection used in rodent research?

Intradermal injection delivers compounds into the space between the epidermis and dermis layers. This route is typically used to assess inflammation, measure cutaneous blood flow, or evaluate allergenic reactions to antigens. The procedure requires anesthesia and specialized training to ensure accurate placement and minimize tissue damage at the injection site.

What are the key advantages of intranasal administration in laboratory animals?

Intranasal administration is non-invasive and requires minimal training and simple equipment like a calibrated micropipette. The nasal mucosa's rich blood vessel and nerve supply enables rapid systemic absorption and direct central nervous system targeting. This route is commonly used for vaccine delivery and local decongestant applications in rodents.

Why is anesthesia recommended for intranasal dosing in conscious rodents?

Anesthesia during intranasal administration ensures proper compound placement at the nares for accurate dosing, prevents animals from biting equipment, and eliminates head jerking that could injure nasal tissue or eyes. Anesthesia also reduces the likelihood of the animal snorting and spraying the compound from the nares upon administration.

What volume limits apply to intranasal administration in different rodent species?

For rats, intranasal administration should not exceed 50 microliters per administration. For mice, the maximum total volume is less than 20 microliters. These volume restrictions prevent complications and ensure compliance with institutional guidelines and IACUC-approved protocols for safe compound delivery.

How is needle depth controlled during neonatal intracranial injection?

A needle guard is created by measuring the correct needle against its cap, marking the desired length, and cutting the cap with a razor blade to produce a clean, level cut. This custom depth-control device is prepared aseptically and ensures the needle penetrates only to the validated depth appropriate for the target brain structure and animal age.

What preparation steps are essential before intradermal injection in rodents?

The injection site must be shaved using an electric razor or depilatory cream, then thoroughly cleaned with water-dampened gauze to remove lingering hair. A topical antiseptic solution is applied to the shaved area. The skin is stabilized by stretching it between thumb and index finger before needle insertion to ensure accurate bleb formation.

Why is a separate needle used to draw test articles for intracranial injection?

A separate needle is used to draw the test article because insertion into the stopper significantly dulls fine-gauge needles, which compromises injection quality. Using a fresh needle for intracranial administration preserves needle sharpness and ensures precise, trauma-free delivery directly into the neonatal rodent brain.

ניהול מתחם III

0 views13:19 min

1. ניהול תוך-עורי

רוב זריקות תוך עוריות הן תרכובות מבוססות מימיות. הפתרונות חייבים להיות חוצצים פיזיולוגית כדי לקבל pH נייטרלי, על מנת למנוע נמק רקמה באתר ההזרקה.
טווח גודל המחט הוא 25-30 מד, הקטן ביותר האפשרי.
טווח המינון לכל אתר הזרקה הוא 50-100 μL. הזרקת נפחים מוגזמים עלולה לגרום לנמק באתר ההזרקה או לדליפת המתחם מהאתר עקב לחץ.
עבור מיקום מדויק של המחט לתוך החלל התוך עורי, יש צורך למרדים הן עכברים והן חולדות. הרדמה שאיפה מאפשרת אינדוקציה מהירה והתאוששות; עם זאת, הרדמה להזרקה יש את היתרון של מתן מספיק זמן להכנת האזור וביצוע הזריקה. ¹
הסר את השיער באתר ההזרקה באמצעות קרם depilatory או על ידי גילוח האזור.
יש להסיר ביסודיות כל שאריות של קרם דפילטרי או פסולת שיער.
החל חיטוי אקטואלי, כגון פתרון יוד, פתרון כלורהקסידין, או אלכוהול.
נהלי ניהול
1. מתחו את העור מתוח בין האגודל לאצבע המורה. זה מספק יציבות לעור בעת מיקום המחט.
2. מניחים את המחט משופעת על העור.
3. הכנס בעדינות את המחט לתוך העור בין האפידרמיס והדרמיס. לקדם את המחט ממש מעבר שיכול.
4. הזריקו את החומר לאט. הזרקת המתחם תיצור bleb, או שלפוחית קטנה, בעור.
5. השהה לאחר ההזרקה כדי לאפשר לעור למתוח ולהתאים לפני משיכת המחט.
אמצעי זהירות
1. אין צורך לסגת בבוקעת.
2. אם המחט מוכנסת לחלל התת עורי, לא נוצר bleb. הזרקת עמוק מדי גורמת לזריקה תת עורית.
3. הימנע נפיחות או ניגוב האזור, כמו זה יכול לגרום המתחם לדלוף מאתר ההזרקה.
4. בעת ביצוע זריקות מרובות, רווח אותם כך blebs לא חופפים.

איור 1. הזרקה תוך עורית בעכברים.

2. ניהול תוך-נאואלי

ציוד
1. השתמש בצינור יחידת מיקרו-פיקפיק שניתן לכייל כדי לספק נפח מדויק.
2. יש להשתמש בטיפים חד פעמיים לפיפטה כדי למנוע זיהום צולב. מזרקי שחפת, מחטים קהות וצינורות גמישים יכולים לשמש גם למינום.
3. נפחי הזרקה הכולל עבור חולדות לא יעלה על 40-100 μL, ויש לתת 6-10 טיפות μL. עבור עכברים, הנפח הכולל המרבי הוא 24 μL, נתון 3-4 טיפות μL.
ניהול בבעלי חיים מודעים
1. איפוק ידני בבעלי חיים מודעים דורש כי הראש להיות יחסית חסר תנועה, כך קצה פיפטה או מחט קהה ניתן להציב קרוב מספיק nares כדי לספק את המתחם, אבל לא כל כך קרוב כמו לתקוע או לקרוע את רקמת האף.
2. לרסן את החיה ולהחזיק אותו במצב אנכי.
3. מניחים טיפה קטנה של תרכובת נוזלית בפתח האף. החיה צריכה לשאוף את הטיפה.
4. נהל אמצעי אחסון נוסף, ערך נלווה לסירוגין עד להינתן אמצעי האחסון כולו.
5. בעת מתן כרכים גדולים יותר, חשוב לא לכווץ את החזה במהלך איפוק. דחיסת חזה פוגעת ביכולתו של בעל החיים לנשום נשימות עמוקות מספיק כדי למשוך את הנוזל לתוך הסימפונות והריאות.

איור 2. ניהול תוך-נאוי בעכברים מודעים.

ניהול בבעלי חיים חסרי הכרה
1. שימוש בהרדמה משאיפת אלכוהול מאפשר בעל חיים משותק במהלך הגישה והלידה של המתחם. זה מבטל את האפשרות של החיה לנשוך את ציוד מנון, אובדן המתחם עקב jerking של הראש, ופגיעה ברקמת האף של החיה, עיניים, או עור הפנים. החיה גם פחות סביר להסניף ולרסס את המתחם מן nares על הממשל.
2. מניחים את החיה בתנוחה השופית. מיקום הראש משפיע על מיקום הפתרון ב nares. הוכח כי המיקום האידיאלי עבור משלוח מערכת החולים הוא עם supine בעלי חיים; זה מאפשר ספיגה טובה יותר. ²
3. לנהל מחצית המתחם ישירות לתוך צד אחד של פתח האף, תזמון זה עם שאיפה. ואז, להפוך את החיה מעל.
4. כאמור, נהל את החצי השני של הנפח לתוך פתח האף האחר.

איור 3. ניהול תוך-נאוי בעכברים מחוסרי הכרה.

3. ניהול תוך גולגולתי בעכברים וחולדות יילודים

עכברים או חולדות חייבים להיות מרדים לזריקות תוך גולגולתיות.

עכבר		חולדה
גיל (ימים)	מד מחט (גרם)	גיל (ימים)	מד מחט (גרם)
0-7	29-30	0-5	27-29
7-14	27	5-10	25-27
14-28	25	10-14	25
גיל (ימים)	אורך המחט (מ"מ)	גיל (ימים)	אורך המחט (מ"מ)
0-7	2	0-4	2-3
7-14	3	4-7	3
14-21	4	7-10	4
21-28	5	10-14	5
גיל (ימים)	אמצעי אחסון (μL)	גיל (ימים)	אמצעי אחסון (μL)
0-5	<20	1-3	<20
6-20	<60	4-10	<60
20-28	<100	11-14	<100

טבלה 1. מד מחט, אורך מחט ונפח מרבי של ניהול תוך גולגולתי לפי גיל העכברים והחולדות. ⁴

ציוד
1. קבע את מד המחט הנכון ואת נפח הניהול המרבי לפי טבלה 1.
2. הכן שומר מחט לפני שהוא מרדים את החיה.
  הערה: עומק ההזרקה של המחט נשלט באמצעות שומר שנוצר עם מכסה המחט.
  1. כדי ליצור את השומר, מחט נמדדת כנגד מכסה המחט, וסימן ממוקם על הכובע כדי לציין היכן לחתוך. החתך צריך להיעשות כך 2 עד 5 מ"מ של המחט חשופים כאשר המכסה מוחלף על המחט.
  2. אורך המחט החשופה חייב להיות ארוך מספיק כדי לחדור את העור והגולגולת, ולהגיע לעומק הרצוי במוח.
  3. אורכי המחט הדרושים לעכברים וחולדות מפורטים בטבלה 1.
3. מקור חימום נדרש כדי למנוע היפותרמיה אצל הגורים. ישנם מספר סוגים: כרית חימום חשמלית על נמוך, שמיכת מים במחזור, או כיס חום תגובה כימית רב שימוש חוזר.
איפוק
1. עכבר וגורי חולדה 10 ימים ומטה אינם דורשים הרדמה עבור הליך זה. לרסן אותם באופן ידני על ידי החזקתם ממש מאחורי הראש ומשיכת העור בקהילות כדי להפעיל לחץ קל על הכתפיים.
2. גורים מרדים מעל גיל 10 ימים עם שאיפת איזופלוראן. חברו תא אינדוקציה לאידוי מדויק או לצנצנת פעמון עם כדור כותנה ספוג באיזופלוראן. ברגע שהגור משותק, ההרדמה יעילה למשך כ -40 שניות, מה שמספק מספיק זמן להזרקה.
טכניקת הזרקה
1. צייר את החומר לתוך המזרק ומניחים את מדריך הכובע / המחט מעל המחט.
2. נפח ההזרקה המומלץ כמו נפח המרבי לכל עכבר יילודים או חולדה הוא 100 μL, וכי עבור גגמול או עכברים מבוגרים הוא עד 300 μL.
3. כדי להזריק לתוך קליפת המוח של יילודים, להכניס את המחט 5 מ"מ מאחורי העין, כ 3 מ"מ את קו האמצע של הגולגולת.
4. אתר הזרקת העכבר הגומלי נמצא בערך באמצע הדרך בין העין לאוזן, ממש ליד קו האמצע.