6.10: שימוש נכון בקלאבים אוטומטיים

1. ללבוש ציוד מגן אישי מתאים (PPE)

תנאי הלחץ והטמפרטורה הגבוהים בהם נתקלו במהלך השעבוד האוטומטי מהווים סיכוני שריפת חום או פיצוץ פוטנציאליים. PPE מתאים כולל מעיל מעבדה, משקפי בטיחות, כפפות עמידות בחום ונעלי בוהן סגורות; אלה חייבים להיות משוחקים בעת טעינה ופריקה של חומרים מן autoclave. בעת התמודדות עם דגימות נוזליות, ללבוש סינר ומגן פנים כמו PPE נוסף.

2. הכנת חומרים להעמסה

1. זהה חומר תואם אוטומטית ומנע אוטומטית חומר לא תואם
   למרות autoclaving מייצג שיטה נפוצה וכלכלית לטיהור, לא כל החומרים מתאימים autoclaving בשל הלחץ הגבוה ותנאי העבודה בטמפרטורה. באופן כללי, כל החומרים שיתאדו או יימסו תחת הקיטור בלחץ גבוה אינם תואמים ל- autoclaving. זה כולל חומרים כמו ממיסים אורגניים, פלסטיק עמיד בחום נמוך כגון פוליסטירן, פוליאתילן, ומתכות למעט נירוסטה. לעולם אל תדליק אוטומטית כימיקלים דליקים, מאכלים, רעילים, תגובתיים או רדיואקטיביים. חומרים התואמים עבור autoclaving כוללים Pyrex או סוג I זכוכית בורוסיליקט, פוליפרופילן, פוליקרבונט, כפפות, נירוסטה, טיפים פיפטה, נייר (לשים בתוך שקיות autoclave), ופתרונות מדיה.
2. חומר אריזה
   לאחר זיהוי חומרים תואמי autoclave, אריזה מתאימה חשובה גם מכיוון שהיא מבטיחה בטיחות והפעלה אוטומטית יעילה. להלן העקרונות הבסיסיים בעת אריזת חומרים:
   1. השתמש תמיד במיכל משני עשוי פוליפרופילן או נירוסטה.
   2. עבור דגימות נוזליות, מלא את הקרבון סביב 1/2 מלא ולשחרר את המכסות או להשתמש סגירות מאוורר. לעולם אל תמלאו את המיכלים מעל 2/3 מלאים עם המכסה מהודק לחלוטין.
   3. בדוק את כלי הזכוכית כדי לוודא שאין סדקים. אם מזוהים סדקים, יש להיפטר מכלי זכוכית בכלי קיבול ראויים. לעולם אל תרכב אוטומטית כלי זכוכית שבור ידוע.
   4. השתמש תמיד בשקיות תואמות-תכולה אוטומטית כדי לארוז פסולת. על התיקים צריכות להיות קלטות אינדיקציה ויש לפתוח בקצוות לפני הטעינה כדי לאפשר קיטור בתוך השקית.
   5. לעולם אל תעמיסו על השקיות או המיכל כדי לאפשר זרימת קיטור מספקת לעיקור מלא. השאר רווח בין פריטים.
   6. אל תערבב חומרים לא תואמים.
   7. לעולם אל תשים פריטים חדים בשקית הפסולת.

3. חומר עומס

1. בדוק את פנים ה- autoclave כדי לוודא שלא נותר סכנה פוטנציאלית מהמשתמש הקודם.
2. נקה את הניקוז לפני טעינת חומרים כדי לאפשר זרימת דם טובה.
3. ודא את התיקים לא לגעת בקירות הפנימיים של autoclave כדי למנוע נמס.
4. נוזלים וחומרים יבשים דורשים מחזורים שונים ויש צורך לעבוד באופן אוטומטי בנפרד.
5. סגור את הדלת בחוזקה.

4. פעולת ההקלבה האוטומטית

1. רק כוח אדם מאומן צריך להיות מותר להפעיל autoclaves. עיין במדריך הציוד במידת הצורך, מאחר שפרוטוקולי הפעולה משתנים בין דרכים אוטומטיות שונות.
2. לאחר לוודא את הדלת autoclave סגורה היטב, להגדיר את טמפרטורת autoclaving ל 121 °C (55 °F) ולשמור על לחץ של לפחות 15 פסאיי.
3. כדי להגדיר את הזמן והמחזור של ההקלבה האוטומטית, יש לקחת בחשבון את הגורמים הבאים:
   1. המלצות ציוד ממדריך היצרן.
   2. סוג החומרים הטעונים בפנים: יבש או נוזלי.
   3. כמויות החומרים שנטענו.
   4. צורה וגודל של גורם מכיל בשימוש.
   5. מוליכות חום של מיכל וחומרים.
   6. מטרת הטיהור.

5. פריקת חומרים משועבדים אוטומטית

1. ללבוש PPE מתאים כמתואר לעיל.
2. ודא שהטמפרטורה והלחץ של ה-autoclave חזרו לטווח בטוח.
3. עמדו מאחורי הדלת ופתחו בזהירות את הדלת כדי לשחרר כל שאריות קיטור בתוך האוטוקלבה לחדר.
4. אפשר לחומרים בתוך autoclave לעמוד במשך 10 דקות כדי לשחרר כל קיטור או אוויר חם לכוד בתוך החומר.
5. אין לנער חומר נוזלי בעת הסרתו מהאוטוקלבה. במידת הצורך, לתייג את החומר כמו חם כדי למנוע כוויות חום לאדם אשר עשוי להיות מודע לעובדה כי החומר כבר autoclaved לאחרונה.
6. המתן עד שהחומר יתקרר לטמפרטורת החדר לפני ההובלה בתוך המעבדה או מחוץ למעבדה. בשני המקרים, הקפד להשתמש בלימה מתאימה להובלה.
7. רשום את פרטי החומרים ותנאי השעבוד האוטומטי ביומן המשתמש.

חיטוי הוא אחת השיטות הנפוצות ביותר במעבדה לצורך טיהור.

מדענים רבים, במיוחד אלה העובדים עם דגימות ביולוגיות, זקוקים לציוד ומדיה מעוקרים, ואוטוקלאבים מספקים דרך מהירה וחסכונית לטהר חומרים. הם משתמשים בקיטור בטמפרטורות גבוהות ובלחץ כדי להרוג מיקרואורגניזמים. עם זאת, בשל התנאים הקיצוניים הללו, יש להשתמש בהם בזהירות.

סרטון זה ימחיש כיצד פועלים אוטוקלאבים וכיצד להשתמש בהם נכון.

בחיטוי מחממים חומרים בקיטור לטמפרטורות של 121 מעלות צלזיוס בלחצים של לפחות 15 p.s.i. לאחר 30 דקות לפחות, מצבים אלה יתייבשו ויהרגו תאים.

אוטוקלאבים יכולים לעקר חומרים נוזליים ומוצקים כאחד, אך יש לקחת בחשבון הגדרות הפעלה שונות. נוזלים דורשים זמן רב יותר ממוצקים כדי למצות את האדים, על מנת למנוע רתיחה בזק. בנוסף, לכמויות גדולות יותר של חומרים נוזליים לוקח זמן רב יותר להתחמם לטמפרטורה הנכונה.

לא כל החומרים יכולים לעמוד בטמפרטורות בתוך חיטוי. לכן, לעולם אל תבצע חיטוי של שום דבר שנמס, נשרף, נפיץ או נוזלים שיתאדו. כמו כן, אין לבצע חיטוי כימיקלים רעילים או רדיואקטיביים.

כעת, נראה לך כיצד להכין דוגמאות לחיטוי וכיצד להפעיל אחת.

ראשית, בחר את החומרים שתבצע חיטוי והשתמש רק במיכלים ומכשירים תואמים. ניתן להשתמש בפיירקס, זכוכית בורוסיליקט, נירוסטה, פוליפרופילן ופוליקרבונט לחיטוי.

חומרי מעבדה נפוצים אחרים כגון קצות פיפטות וקופסאות תואמים גם הם. ניתן לבצע חיטוי נייר בשקיות תואמות חיטוי.

פסולת מוצקה ניתנת לחיטוי גם בשקית מתאימה. השאירו מקום בשקית זו כדי לאפשר לאדים להסתובב ולקשור את הקצוות. לבסוף, לפני החיטוי הקפידו ליצור פתח קטן בשקית כדי לאפשר כניסת אדים.

עבור מדיה מימית ודגימות נוזלים תואמות אחרות, השתמש במיכל שלם ללא סדקים. מלאו את המיכל כחצי מלא ולעולם לא יותר משני שליש מלא.

כדי לאוורר גזים ממיכל נוזלי, שחרר את המכסה. אם אין מכסה, מכסים באופן רופף בנייר אלומיניום כדי למנוע זיהום של החומר החיטוי.

הכניסו את כל החומרים למיכל משני עשוי פוליפרופילן או נירוסטה. הפרד חומרים מוצקים ונוזליים לחיטוי. השאירו מרווח בין החומרים, ואל תמלאו את המיכל יתר על המידה.

לבסוף, חבר חתיכת סרט חיטוי לכל החומרים. לקלטת זו יש אינדיקטורים רגישים לטמפרטורה שישחירו אם הושגה טמפרטורה מספקת.

בעת שימוש בחיטוי יש ללבוש ציוד מגן אישי מתאים כדי להגן מפני סיכוני הטמפרטורה והלחץ הגבוהים. זה כולל משקפי בטיחות PPE סטנדרטיים, מעילי מעבדה ונעליים סגורות וכפפות עמידות בחום. השתמש בסינר ובמגן פנים בעת טיפול בדגימות נוזליות.

בחיטוי, פתח תחילה את הדלת ובדוק אם יש סכנות בפנים. טען חומרים נוזליים ויבשים בנפרד, מכיוון שהם דורשים מחזורי חיטוי שונים.

כדי למנוע התכה וודא שהחומרים אינם נוגעים בקירות. הקפידו על זרימת חום טובה על ידי שמירה על מרווח מספיק בין החומרים. לבסוף, סגור ואטום את הדלת.

לאוטוקלאבים שונים יש הוראות הפעלה שונות. ניתן להגדיר מחזורים על ידי הגדרה ידנית של הטמפרטורה והזמן, או על ידי בחירה מתוך רשימה מוגדרת מראש. באופן כללי, השתמש במחזורים המומלצים לסוג החומר שאתה מטהר.

קיימים מגוון מחזורים למוצקים ונוזלים, כמו גם לכמויות שונות של חומר ופסולת לחיטוי. כאשר אתה מריץ מחזור, ודא שהטמפרטורה הגיעה לפחות ל-121 מעלות צלזיוס והלחץ לפחות 15 p.s.i.

לאחר סיום המחזור, ודא שהלחץ חזר לאפס והחיטוי התקרר. פתח בזהירות את הדלת כדי להוציא שאריות אדים. לאחר מכן, אפשר לחומרים לעמוד במשך 10 דקות כדי לשחרר גזים חמים. סרט החיטוי צריך כעת להיות בעל פסים שחורים או לומר עליו חיטוי, אם כי זה לא ערובה לכך שהתרחש עיקור.

לבישת PPE מתאים, הסר את החומרים, הקפד לא לנער דגימות נוזליות. רשום את השימוש שלך ביומן, כולל סוג החומרים וכל נסיבות מיוחדות אם נתקלת בהן. לבסוף, העבירו את החומרים לאזור מאובטח או למכסה זרימה למינרי להתקררות.

זה עתה צפיתם בהקדמה של JoVE לאוטוקלאבים. כעת עליכם להבין אילו חומרים ניתן לבצע חיטוי, כיצד להכין אותם וכיצד להשתמש במכשיר בבטחה. תודה שצפית!