Name: Dissection של דיסקים דמותי מן הזחלים 3 תסיסנית Instar (וידאו) | JoVE Journal
Uploaded: 2007-02-17T00:00:00.000+00:00
Duration: 7 min 36 s
Description: למדו את שיטת החיתוך לבידוד דיסקים דמותיים מזחלי Drosophila בשלב התסיסן השלישי. הפרוטוקול מדגים בידוד דיסקי כנף, רגל ועין לצורך חקר תהליכי התפתחות ואפופטוזה.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

playerTrialDesktop

למחברים אין ניגודי עניינים להצהיר עליהם.

dissection של דיסקים דמותי מן הזחלים 3 תסיסנית instar

Dissection of Imaginal Discs from 3rd Instar Drosophila Larvae

פרוטוקול זה מדגים את הטכניקה לנתיחה משמש לבידוד דיסקים דמותי מן הזחלים תסיסנית בשלב instar 3. שיטות לתיקון רקמות אחרי אומר והסרה של הזרוע, רגל, עין ודיסקים הם הוכיחו ישירות על שקופיות מיקרוסקופ להדמיה הבאים.

Dissection של דיסקים דמותי מן הזחלים 3 תסיסנית Instar

היום אני אראה לכם כיצד לבצע דיסקציה של דיסקים דמיוניים (imaginal discs) מz larvae של דרוזופילה בשלב השלב השלישי (third instar). ניתן להשתמש בדיסקים של זחלי שלב שלישי למספר תהליכי התפתחות. במעבדה שלנו אנו בוחנים אותם כדי לצפות בתהליך של אפופטוזיס, אך ניתן לבטא בהם חלבונים שונים וללמוד אותם בדרך זו, ולראות כל מיני תהליכי התפתחות המתרחשים בתוך הדיסקים לפי הסדר.כדי לעשות זאת, אשתמש במספר כלים חשובים מאוד. ראשית, מקל הברירה (picking stick) שבאמצעותו נוציא את הלרוות מהצלחות שלהן. לאחר מכן, וזה חשוב מאוד, פינצטת דיסקציה, שחייבת להיות חדה במיוחד כדי שניתן יהיה להמשיך בתהליך הדיסקציה.לאחר מכן נשתמש בלהב ניתוח, להב ניתוח מספר 11, כדי להוציא את הדיסקים מהראש. לאחר מכן נניח את הדיסקים על תבנית זכוכית עם vector shield כחומר קיבוע. לכן, הדבר הראשון שנעשה הוא לאסוף מספר זחלי third and star wandering.אני פשוט משתמש במקל הברירה שלי כדי למעשה להדליק אותם מדופן המבחנה. לעיתים זה עוזר אם המקל מעט רטוב, ואז מעבירים אותם לטיפה של PBS. אוקיי, כאן יש לנו את הלרבות השלישית שלנו.מכיוון שאני ימני, אני אסובב את ראשו לכיוון ימין, ונשתמש במספר נקודות ייחוס כדי להנחות אותנו היכן לאחוז בו. הראשונה היא החלק המרכזי של ה-trachea כאן וכאן. ולאחר מכן ישנו חתך רוחבי קטן כאן למעלה, לכיוון הראש.ראשית, אני אחזיק בעדינות א

dissection-of-imaginal-discs-from-3rd-instar-drosophila-larvae

Research

JoVE Journal

Biology

ביולוגיה

כאן אנו מתארים פרוטוקול לבחון את ההגירה של ותאי גלייה לתוך העין תסיסנית מתפתחות באמצעות ניתוח מיקרוסקופי לחיות יחד עם התאים GFP גליה מתויג.

הדמיה חיה של נדידת תאים גליה את הדיסק העין דמותי תסיסנית

אנו מתארים רומן אדום חלבון פלואורסצנטי (RFP) כתב כי באה לידי ביטוי במיוחד...

RFP כתב רומן על סיוע ויזואליזציה של דיסק העין דמותי ב תסיסנית</em

הזחלים תסיסנית melanogaster לספק מערכת מודל אידיאלי לחקור את המנגנונים של תחבורה axonal בתוך העצבים סגמנטלי הזחל. באמצעות הליך זה, 3 rd הזחלים instar נושאת מוטציות שונות ניתן להשוות את הזחלים סוג בר.

ויזואליזציה של עצבים המגזרי הזחל ב 3 Rd Instar תסיסנית הכנות הזחל

נתיחה ואימונוהיסטוכימיה של זחל, גלמים ומבוגרים<em&gt; דרוזופילה</em&gt; רשתיות

בעת צביעת דיסקים דמיוניים של דרוזופילה, לעיתים קרובות מתבצעת דיסקציה גסה בה הדיסקים חשופים אך נשארים מחוברים לגוף. לאחר המוכתמים, הדיסקים המעניינים מבודדים ומורכבים. הפרוטוקול לדוגמה מדגים הליך לדיסקציה והרכבה של דיסק דמיוני בכנף.

דרוזופילה דיסקציה דמיונית של הזחל: שיטה להתבוננות בהתפתחות אפיתליה

פרוטוקול זה מפרט שיטה יעילה המשמשת לביצוע הדמיה תא חי בהקשר של מוח זחל בשלמותה. גישות הדמיה תא חי הן לא יסולא בפז לחקר חלוקות תא גזע עצביים סימטריות כמו גם תהליכים עצביים והתפתחותיות אחרים, לחשוף באופן עקבי מנגנונים שהתעלמו בעבר.

הדמיה חיה של<em&gt; דרוזופילה</em&gt; הזחל Neuroblasts

המבנים הבוגרים של דרוזופילה נגזרים ממבנים דמויי שק הנקראים דיסקים דמיוניים. ניתוח דיסקים אלה מספק תובנה לגבי תהליכים התפתחותיים רבים כולל קביעת רקמות, קביעת גבול תאים, התפשטות תאים, מפרט גורל התא וקוטביות תאים מישוריים. פרוטוקול זה משמש להכנת דיסקים דמיוניים למיקרוסקופ אור/פלורסנט.

נתיחה וImmunostaining של דמותי דיסקים מ Melanogaster דרוזופילה

מטרת טכניקה זו היא לאפשר לחוקרים לבצע דיסקציה, צביעה חיסונית והרכבה של דיסקים של עין גולם מדרוזופילה מלנוגסטר בכל גיל.

נתיחה והתקנה<em&gt; דרוזופילה</em&gt; גלמי דיסקי העין

פרוטוקול זה מדגים כיצד ליצור מסומן פלורסנטי, גידולים המשובטים מוגדר גנטית בעין תסיסנית / דיסקים דמותי מחושים (EAD). הוא מתאר כיצד לנתח את EAD והמוח מן הזחלים instar השלישי וכיצד לעבד אותם לחזות ולכמת שינויים בהתבטאות גנים הפולשנות הגידול.

ה<em&gt; תסיסנית</em&gt; דגם גידול דיסק דמותי: ויזואליזציה וכימות של ביטוי גנים סרטניים הפולשנות שימוש פסיפסים גנטי

אנו מתארים פרוטוקול למדידת מגעים בין תאים בשכבות אפיתל סמוכות בדיסקים דמיוניים חיים של כנפי דרוזופילה באמצעות גישה מבוססת בנייה מחדש של GFP.

מערכת ביטוי כפול מבוססת השלמת GFP להערכת מגע תא-תא בתיווך ציטונמים בדיסקים דמיוניים חיים של כנף דרוזופילה

מאמר זה מתאר פרוטוקול יעיל לפירוק דיסק דמיוני וצביעת נוגדנים, שהוא חסכוני עם מגיבים ומקל על טיפול בדיסקים דמיוניים במספרים קטנים.

כריתה בקנה מידה קטן וצביעת נוגדנים של דיסקים דמיוניים באנטנות העיניים והכנף מ-Drosophila melanogaster

למדו את שיטת החיתוך לבידוד דיסקים דמותיים מזחלי Drosophila בשלב התסיסן השלישי. הפרוטוקול מדגים בידוד דיסקי כנף, רגל ועין לצורך חקר תהליכי התפתחות ואפופטוזה.

Dissection של דיסקים דמותי מן הזחלים 3 תסיסנית Instar

גלה סרטונים נוספים