LAD-קשירת: מודל Murine של אוטם שריר הלב

חתך צוואר הרחם בקו האמצע מבוצע כדי לחשוף את קנה הנשימה וחור קטן נחתך לקנה הנשימה להחדרת צינור אנדוטרכיאלי. העכבר מסובב על צדו הימני ומבוצעת כריתת בית חזה בצד שמאל בין הצלעות השלישית והרביעית. הלב חשוף וה-LAD נקשר בתפר יחיד.

לאחר הנחת צינור חזה וסגירת החתך, בית החזה מתנקז על ידי שאיבת המזרק בזהירות. לבסוף, העכבר מופעל. הגב שלו.

צינור קנה הנשימה מוסר וקנה הנשימה וחתך צוואר הרחם נסגרים. היי, אני סוניה רפה. אני פרופסור לאימונולוגיה וניתוחי לב במחלקה לכירורגיה קרדיווסקולרית במרכז הלב האוניברסיטאי בהמבורג.

המעבדה שלי מתמקדת באימונוביולוגיה של תאי גזע ובאימונולוגיה של השתלות. היום נציג בפניכם את מודל קשירת LID. אנו משתמשים במודל זה במעבדה שלנו כדי לחקור את ההשפעה של טיפול בתאי גזע ליצירת הלב לאחר אוטם שריר הלב.

ואני KA וואן, סטודנט באוניברסיטת סטנפורד ועמית קיץ במעבדת TSI של דרר. ואני מנדי קוץ' ממעבדת TSI של מרכז הלב האוניברסיטאי בהמבורג. אני אראה לך כיצד לבצע קשירת נשים ובהמשך נראה לך כיצד לאמת את הצלחתו של אוטם שריר הלב בשיטות שונות.

אז בואו נתחיל. לגלח את אזור הצוואר ואת הצד השמאלי של כלוב הצלעות של העכבר המורדם הניחו את העכבר על גבו והניחו מסכת פנים על אפו ופיו כדי לשמור על הרדמה עם חיטוי פלואור 2%.

שימוש בבטא איזוד לפני תחילת הניתוח, צבט את הזנב ואת כפות הרגליים האחוריות של העכבר כדי לוודא שהוא מורדם מספיק. בתצוגה מיקרוסקופית, בצע חתך צוואר הרחם בקו האמצע המפריד בין שריר העור לרקמה המכסה את קנה הנשימה. לאחר חשיפת קנה הנשימה, חותכים חור קטן לתוך הרקמה בין שתי טבעות מחסנית מתחת לגלוטיס כדי להכניס את הצינור האנדוטרכיאלי.

הכנס את הצינור האנדוטרכיאלי תוך החזקת החלק הגולגולתי של קנה הנשימה. בעזרת מלקחיים מיקרו-כירורגיים, בדוק את תנועת בית החזה כדי לוודא ששתי הריאות מאווררות היטב. קצב הנשימה צריך להיות כ -110 לדקה עם לחץ שאיפה של 17 עד 18 סנטימטרים. H2O.

סובב את העכבר בזהירות והנח אותו על צדו הימני כשאתה פונה לצדו השמאלי. בצע כריתת בית חזה בצד שמאל בין הצלע השלישית לרביעית ונתח את הרקמה והשריר. השתמש בזהירות בחומר למניעת דימום.

פתח את בית החזה בזהירות. לאחר פתיחת בית החזה, מצא את הלב מבלי לגעת בריאה עם חפצים חדים. לאחר מכן, הסר את החלק של שק קרום הלב המכסה את הלב.

ה-LAD ממוקם בין עורק הריאה לקשר האורקל השמאלי. ה-LAD הפרוקסימלי עם תפר אחד יחיד של שמונה או פרולין. הנח צינור אנדוטרכיאלי 28 מד צנתר בין הצלע הרביעית לחמישית.

סגור את חתך בית החזה בשכבות באמצעות שישה תפרי ריצה של oh proline כדי להתאים את הצלעות וארבעה תפרי ריצה של oh proline. כדי לסגור את העור, יש לנקז את בית החזה בזהירות בעזרת מזרק של שני מיליליטר. לאחר ניקוז בית החזה, הניחו את העכבר על גבו.

הניחו את מסכת הפנים על העכבר והוציאו את הצינור האנדוטרכאלי החוצה. התאם את טבעות מחסנית קנה הנשימה בתפר אחד בודד באמצעות שבעה תפרי או פרולן וסגור את העור באמצעות ארבעה תפרי ריצה או פרולן. הראינו שמודל עכבר קשירת LAD הוא טכניקה אלגנטית ואמינה ליצירת אוטם שריר הלב.

ישנן דרכים שונות לאשר אוטם שריר הלב מוצלח. שיטה אחת היא בדיקת טרופונין שבה מורחים 150 מיקרוליטר דם מהעכבר על ערכת בדיקת טרופונין מותאמת אישית. תוצאה חיובית בה מופיעים שני קווים לאחר מספר דקות מעידה על שחרור טרופונין T מהלב עקב פגיעה ברקמות.

גישה שנייה לאישור אוטם שריר הלב מוצלח היא זלזול בחתכים של הלב עם 2 3 5 trien tetra oleum chloride או TTC כדי למדוד את כדאיות הרקמות ולהעריך את גודל האוטם. הלב מכוסה ב-TTC ומודגר ב-37 מעלות צלזיוס למשך 20 דקות. הרקמה הקיימא תיראה אדומה ואילו האזור האוטם ייראה לבן.

לבסוף, לב העכבר יכול להיות פרפין, מוטבע וחתך להיסטולוגיה. החלקים מוכתמים בכרום משולש כדי להמחיש רקמה פיברוטית. זה עתה הראיתי לך כיצד לבצע קשירת LID בעכברים לאחר מכן.

הראינו לך שיטות שונות כיצד לאשר את אוטם שריר הלב המוצלח שעות לאחר קשירת LID או שבועות לאחר מכן בביצוע קשירת LID. חשוב להתרחק מרקמת הריאה כדי למנוע פגיעה בריאות. אז זהו.

תודה רבה שצפית בסרטון ובהצלחה בניסויים שלך.