Name: רטרו מסלולית הזרקה של דג הזברה למבוגרים (וידאו) | JoVE Journal
Uploaded: 2009-12-07T18:43:00.000+00:00
Duration: 4 min 50 s
Description: למד את שיטת ההזרקה הרטרו מסלולית בדגי זברה מבוגרים לחקר שתלת תאי גזע המטופויטיים. הטכניקה כוללת איסוף תאי דם אדומים מתורמים ודימות באמצעות מיקרוסקופיית פלואורסצנציה.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

עבודה זו נתמכת על ידי הווארד יוז רפואי מכון מענק מ-NIH לחקר hematopoiesis עובריים.

חלק 1. הכנת חומר הזרקה <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> Tg (גלובין: GFP) בתאים: </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> Bleed דגים התורם מבוגר באמצעות קצה פיפטה 10ul מצופה הפרין (1unit/ul) לדגים לנקב מאחורי הזימים. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> לשאוב כדוריות דם אדומות לוותר במאגר תא (PBS 0.9X + 5% FBS + פן 1% / סטרפטוקוקוס). </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> תא ההשעיה סנן על רשת 40uM ולקבוע ריכוז של תאים באמצעות hemocytometer כפי שתואר לעיל על ידי LeBlanc et al. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> ספין למטה resuspend במאגר תא בריכוז הרצוי כזה נפח הזריקה האחרונה היא לא יותר מאשר 5ul. כאן אנו מזריקים תאים 1.5-2000000 / נמען. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> עבור, dextran טקסס האדום ®, לפזר את הצבע DPBS ריכוז זריקת הסופי של 10-12 מ"ג / מ"ל. תוכנית להזרים 4 UL לכל הדגים. </li></ol> חלק 2. הזרקה <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> הרדימי דגים tricaine (4.2ml (4mg/ml) מים tricaine/100ml דגים). </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> לשטוף המילטון מזרק 3-4 פעמים לפני הזריקה באמצעות אתנול 70%. יש לשטוף 3-4 פעמים עם DPBS 0.9X. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> מקום דגים בצד הגבי מעלה מול ימין על ספוג לח. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> החזק את המזרק המילטון עם יד ימין שלך עם האצבע המורה על הבוכנה. בעדינות לייצב את הגוף של הדג ביד שמאל. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> מקמו את המחט עם שפוע פונה כלפי מעלה כך שאם העין של הדג היו שעון, המחט תהיה הצבעה במיקום 7:00 ו בזווית של 45 מעלות דגים (איור 1). </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> הכנס בעדינות מחט 1-2 מ"מ למצב 7:00 ולאט לאט לוחץ על המתג. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> אפשר לשחזר את הדגים במים E3 טריים. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> לשטוף מחט, כמתואר לעיל, בין זריקות של חומרים כימיים שונים. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> תא Flick פתרון resuspend התאים כל כמה דקות כדי למנוע clumping התא. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> שמור על הדגים את זרימת שבוע 1 עם שינויים מים בכל יום, כדי למנוע זיהום. אנחנו שומרים דג במים לטיפול נמרץ למשך תקופה זו (מעיל 10ml מתח + pemafix 5 מ"ל + melafix 5 מ"ל לכל 38 ליטר מים E3). </li></ol> חלק 3. נציג תוצאות כאשר ביצעו כראוי, אפשר לדמיין החומר מוזרק אם זה כבר מסומן בדרך כלשהי. לדוגמה, Tg (גלובין: GFP) כדוריות הדם האדומות יש לראות תחת מיקרוסקופ פלואורסצנטי לנתיחה במחזור vasculature של דגים קספר הנמען זמן קצר לאחר ההזרקה כפי שמוצג באיור 2. כמו כן, הזרקת dextran 70kDa, מצומדות לטקסס האדום ® ניתן דמיינו vasculature של דג שקוף מיד לאחר ההזרקה רטרו מסלולית (איור 3). תאים כליה מן פלורסנט (β-אקטין: GFP) Tg דגים התורם יכול גם להיות מוזרק רטרו orbitally לתוך הדג קספר מוקרן הנמען. תאים אלה בסופו של דבר הביתה מח הנמען (תמונה 4 א) והוא רשאי מכן להמשיך לאכלס מחדש את כליה לאחר מספר שבועות (איור 4 ב). אם הזריקה הוא רדוד מדי או את הזווית של המחט עוקף את רטרו מסלולית סינוס חלל ורידי, החומר המוזרק עלול להיות דמיינו מתאגדים סביב העין או זורם החוצה. לחילופין, אם הזריקה הוא עמוק מדי, דגים עשויים לחוות נזק לרקמות או דימום מוגזם, למרות שהם עדיין יכולים להתאושש. כאשר ביצעו כראוי, התמותה לאחר ההזרקה רטרו מסלולית צריך להיות פחות מ 5% דגים מוזרק הכולל ההצלחה של משלוח הדם צריך להיות גדול מ 90% של דגים מוזרק מוחלט. <img src="/files/ftp_upload/1645/1645fig1.jpg" alt="איור 1" data-altupdatedat="1787634011000" data-alt="דמות 1"> איור 1: איור של טכניקה רטרו מסלולית ההזרקה. העין הימנית של הדג מיוצג שעון אנלוגי שבו עמדה 7:00 המתאים במקום הזרקה נכונה. <img src="/files/ftp_upload/1645/1645fig2.jpg" alt="איור 2" data-altupdatedat="1787634011000" data-alt="דמות 2"> איור 2: Tg (גלובין: GFP) כדוריות הדם האדומות במחזור vasculature הזנב של דג קספר מבוגר שלושה ימים לאחר ההזרקה רטרו מסלולית. <img src="/files/ftp_upload/1645/1645fig3.jpg" alt="איור 3" data-altupdatedat="1787634011000" data-alt="דמות 3"> איור 3: זריקה מוצלחת של dextran 70kDa מצומדות לטקסס האדום ® משמש לצבוע מייצרת vasculature ניאון הדגים הבוגרים שקוף, קספר והוא מוצג בקלות באמצעות מיקרוסקופ פלואורסצנטי תקן שלם של בעלי חיים. <img src="/files/ftp_upload/1645/1645fig4a.jpg" alt="איור 4א" data-altupdatedat="1787634011000" data-alt="דמות 4a"> תרשים 4 א: שלושה ימים לאחר הזרקת רטרו ההקפה של כל התאים במח כליה מן (β-אקטין: GFP) Tg דגים התורם, התאים ניתן דמיינו ביות עד לשד הכליה של קספר מוקרן דגים בוגרים הנמען. <img src="/files/ftp_upload/1645/1645fig4b.jpg" alt="איור 4ב" data-altupdatedat="1787634011000" data-alt="דמות 4b"> דמות4b: ארבעה שבועות לאחר ההזרקה רטרו ההקפה של כל התאים במח כליה מן (β-אקטין: GFP) Tg דגים התורם, ואכלוס של הכליה הנמען ירוק עם כל תורם כליה תאים במח ניתן דמיינו ב קספר מוקרן דגים בוגרים הנמען.

<ol><li>Steel, C. D., Stephens, A. L., Hahto, S. M., Singletary, S. J., Ciavarra, R. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Comparison+of+the+lateral+tail+vein+and+the+retro-orbital+venous+sinus+as+route+of+intravenous+drug+delivery+in+a+transgenic+mouse+model%5BTitle%5D)+AND+%22Lab+Animal%22%5BJournal%5D)">Comparison of the lateral tail vein and the retro-orbital venous sinus as route of intravenous drug delivery in a transgenic mouse model.</a> Lab Animal. 37, 26-32 (2008).</li>
<li>Pinkerton, W., Webber, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+method+of+injecting+small+laboratory+animals+by+the+ophthalmic+plexus+route%5BTitle%5D)+AND+%22Proc.+Soc.+Exp.+Bio.+Med%22%5BJournal%5D)">A method of injecting small laboratory animals by the ophthalmic plexus route.</a> Proc. Soc. Exp. Bio. Med. 116, 959-961 (1964).</li>
<li>White, R. M., Sessa, A. S., Burke, C., Bowman, T., LeBlanc, J., Ceol, C., Bourque, C., Dovey, M., Goessling, W., Burns, C. E., Zon, L. I. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Transparent+adult+zebrafish+as+a+tool+for+in+vivo+transplantation+analysis%5BTitle%5D)+AND+%22Cell+Stem+Cell%22%5BJournal%5D)">Transparent adult zebrafish as a tool for in vivo transplantation analysis.</a> Cell Stem Cell. 2, 183-189 (2008).</li>
<li>LeBlanc, J., Bowman, T. V., Zon, L. I. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Transplantation+of+whole+kidney+marrow+in+adult+zebrafish%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Vis.+Exp%22%5BJournal%5D)">Transplantation of whole kidney marrow in adult zebrafish.</a> J. Vis. Exp. , (2007).</li>
</ol>

רטרו מסלולית הזרקת דג הזברה מבוגר נותן את היעילות הגבוהה ביותר של מסירת החומר מוזרק לזרם הדם עם השכיחות הנמוכה ביותר של תמותה. בשל אופיו של המקום הזרקה, לנקב מופיע לרפא במהירות, להקטין את המופע של זיהום כמות איבוד הדם. האתר עשוי אפילו להיות מוזרק שוב ושוב במהלך פרק זמן קצר עבור זריקות יומיות של תרופות, למשל. כמויות גדולות של סמים יש לרכוש עבור שיטות טיפול מסורתיות דגים בוגרים אשר הדגים שקועים פשוט ספוגה במים המכי...

<table><tbody><tr><td>מלח נתרני של הפרין מרירית מעי של חזיר</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>2106</td><td>בקבוקון ששוקל מראש 300 יחידות USP</td></tr><tr><td>Tricaine-S</td><td>Western Chemical</td><td></td><td>MS-222</td></tr><tr><td>Dulbecco&amp;rsquo;סלויין פוספט (Phosphate Buffered Saline)</td><td>Invitrogen</td><td>14190-144</td><td></td></tr><tr><td>דקסטראן, Texas Red&amp;#174;</td><td>Molecular Probes, Life Technologies</td><td>D1830</td><td></td></tr><tr><td>E3</td><td></td><td></td><td>5mM NaCl&lt;br/&gt;0.17 mM KCl&lt;br/&gt;0.33 mM CaCl2&lt;sub&gt;2&lt;/sub&gt;&lt;br/&gt;0.33 mM MgSO4&lt;sub&gt;2&lt;/sub&gt;</td></tr><tr><td>מזרק מיקרוליטר</td><td>Hamilton Co</td><td>80300</td><td>701N 10uL SYR (26s/2&amp;#8221;/2)</td></tr></tbody></table>

רטרו מסלולית הזרקה של דג הזברה למבוגרים

Retro-orbital Injection in Adult Zebrafish

טיפול תרופתי של בעלי חיים שלמים היא כלי חיוני בכל מערכת מודל מחקרים גנטיים תרופתי כימי. תוך ורידי (IV) הזרקה היא לעתים קרובות בצורה היעילה ביותר פולשנית המסירה של סוכן של עניין. בשנת דג הזברה (<em&gt; Danio rerio</em&gt;), הזרקה של תרופות IV כבר זמן רב אתגר בגלל קוטר כלי שיט קטנים. זו הוכיחה גם משוכה משמעותית עבור הזרקה של תאים במהלך השתלת תא גזע hematopoeitic. מבחינה היסטורית, זריקות לתוך זרם הדם נעשו ישירות דרך הלב. עם זאת, הליך זה תוך לב יש שיעור תמותה גבוה מאוד כמו הלב הוא ניקב לעתים קרובות במהלך ההזרקה עוזב את הדג נוטה, אובדן דם מסיבי זיהום או נזק איבר קטלנית. בהסתמך על הניסיון שלנו עם העכבר, פיתחנו נוהל הזרקה חדשים דג הזברה שבו ההזרקה עומד מאחורי העין לתוך הסינוס רטרו מסלולית ורידי. רטרו מסלולית זו (RO) טכניקת ההזרקה הועסק בהצלחה הזריקה שתי תרופות הדגים הבוגרים וכן השתלה של תאים במח כל כליה. הזרקת RO יש שיעור תמותה נמוך בהרבה מאשר הזרקה תוך הלב המסורתית. דגים כי הם הזריקו רטרו orbitally נוטים לדמם לאחר הזרקה פחות נמצאים בסיכון נמוך הרבה יותר של פגיעה באיבר גדול כמו הלב. תאים נוספים, כאשר היא מבוצעת כהלכה, הזריק ו / או תרופות במהירות ולהיכנס למחזור הדם ומאפשר תרכובות להפעיל השפעתם על הדג שלם ותאי הכליה בקלות הביתה הנישה שלהם. לכן, בטכניקה זו זריקה חדש ממזער תמותה תוך מתן אפשרות אספקה ​​יעילה של החומר לתוך מחזור הדם של הדגים הבוגרים. כאן אנו מדגימים את הטכניקה הזו על ידי הזרקת רטרו ההקפה של Tg (<em&gt; גלובין</em&gt;: GFP) לתוך תאים בוגרים<em&gt; קספר</em&gt; דגים כמו גם זריקת צבע פלואורסצנטי אדום (dextran, טקסס האדום<em&gt;</em&gt;) לתוך מבוגר<em&gt; קספר</em&gt; דגים. לאחר מכן, אנו לדמיין זריקות מוצלחת על ידי מיקרוסקופ פלואורסצנטי חיים שלמים.

כאן אנחנו מראים איך לעשות רטרו מסלולית הזרקת דג הזברה מבוגר.

טיפול תרופתי בבעלי חיים שלמים הוא כלי חיוני בכל מערכת מודל למחקרים פרמקולוגיים וגנטיים-כימיים. הזרקה תוך-ורידית (IV) היא...

תאי דם אדומים מתורמים נאספים תחילה מדגי globin GFP טרנסגניים על ידי דקירה של לב בעל החיים התורם ושאיבה של תאי הדם האדומים. לאחר שהתאים מוכנים להזרקה, מזריקים אותם לדגים מקבלים בהזרקה רטרו-אורביטלית (retroorbital), ולאחר מכן מדמיינים אותם באמצעות מיקרוסקופיית פלואורסצנציה סטנדרטית של בעל חיים שלם כדי לוודא הזרקה מוצלחת של תאים המסומנים בפלואורסצנציה. באופן דומה, מוכן דקסטרין צבעי המצומד ל-Texas red ומוזרק רטרו-אורביטלית, ובעל החיים המוזרק מדומיין כדי לוודא הזרקה מוצלחת.שלום, אני אמילי אטש מהמעבדה של לאונרד זאן במחלקה להמטולוגיה ואונקולוגיה בבית החולים לילדים בבוסטון. היום נדגים לכם הליך להזרקה רטרו-אורביטלית בדגי זהב בוגרים. אנו משתמשים בהליך זה במעבדה שלנו כדי לחקור השתלה של תאי גזע המטופויטיים.אם כן, נתחיל. נדגים הזרקות רטרו-אורביטליות של תאי globin GFP טרנסגניים ושל צבע פלואורסצנטי אדום, dextrin המשורשר ל-Texas red, לדגי Casper בוגרים, זן שקוף של דגי זברה. כדי להכין תאי globin GFP טרנסגניים, גורמים לדימום מדגי תורם בוגרים באמצעות קצה של פיפטה בנפח 10 µL המצופה בהפרין, לדקור את הדג מאחורי הזימים, לשאוב תאי דם אדומים ולהעביר אותם למסייון תאים (cell buffer).בשלב הבא, סננו את תרחיף התאים דרך רשת של 40 micrometer. לאחר קביעת ריכוז התאים באמצעות hemo cytometer כפי שתיארו בעבר LeBlanc etal, סבבבבו את התאים ב-1500 RPM למשך חמש דקות. השאיבו שוב את התאים בבופר תאים בריכוז הרצוי, כך שנפח ההזרקה הסופי לא יעלה על חמישה microliters.בהדגמה זו, נזריק בין 1.5 ל-2 מיליון תאים לכל מקבל; כדי להכין את הצבע הפלואורסצנטי האדום, נהמס אותו ב-DPBS לריכוז הזרקה סופי של 10 עד 12 mg/mL. נזריק ארבעה µL לכל דג, כיוון שפרוצדור ההזרקה הוא זהה. ללא קשר לחומר המוזרק, נדגים רק את ההזרקה של הצבע הפלואורסצנטי האדום.לפני ההזרקה לדג, שטפו את מזרק ההמילטון (Hamilton syringe) שלוש עד ארבע פעמים באמצעות 70% ethanol. שטפו שלוש עד ארבע פעמים עם 0.9 XDPS. לאחר הרדמת הדג ב-Trica, הניחו את הדג כשהצד הגבי (dorsal side) פונה למעלה והראש פונה ימינה על ספוג לח.החזיקו ביד ימין את מזרק ההמילטון הממולא, ובעזרת האצבע המורה של יד שמאל על הבוכנה, ייצבו בעדינות את גוף הדג. מקמו את המחט כאשר חוד הbevel פונה כלפי מעלה, כך שאם עין הדג הייתה שעון, המחט הייתה מצביעה על השעה שבע. ובזווית של 45 מעלות לדג, הכניסו בעדינות את המחט לעומק של one to two millimeters במיקום של השעה שבע, ולחצו לאט על הבוכנה.אפשרו לדגים להתאושש במי E3 טריים. השאירו את הדגים מחוץ לזרם למשך שבוע עם החלפות מים יומיות כדי למנוע זיהום; במהלך תקופה זו אנו מחזיקים את הדגים במי ICU. כאשר הזרקות רטרו-אורביטליות מבוצעות נכונה, ניתן להבחין בחומר המוזרק שסומן.לדוגמה, ניתן לראות תאי דם אדומים טרנסגניים המבטאים globin GFP תחת מיקרוסקופ דיסקציה פלואורסצנטי, כשהם זורמים בכלי הדם של זנב דג Casper בוגר המקבל, שלושה ימים לאחר ההזרקה; באופן דומה, הזרקה מוצלחת של dextrin במשקל 70 kilodalton המצומד ל-Texas red יוצרת באופן מיידי כלי דם פלואורסצנטיים. בדג Casper בוגר ושקוף, שניתן לדמיין אותו בקלות באמצעות מיקרוסקופיה פלואורסצנטית סטנדרטית של בעל חיים שלם, ניתן להזריק רטרו-אורלית תאי מח עצם של כליה פלואורסצנטיים מדג תורם טרנסגני המבטא beta actin GFP לדג Casper מקבל שהוקרן. תאים אלו ינדדו בסופו של דבר למח העצם של המקבל כפי שמוצג כאן, שלושה ימים לאחר ההזרקה; ארבעה שבועות מאוחר יותר, תאי תורם ירוקים אלו עשויים להמשיך ולאכלס מחדש את כלית המקבל.הרגע הצגנו בפניכם כיצד לבצע הזרקות רטרו-אורביטליות בדגי zebrafish בוגרים. בעת ביצוע הליך זה, חשוב לזכור להזריק עם המחט בזווית של 45 מעלות למישור הדג. זהו כל התהליך.תודה על הצפייה ובהצלחה בניסוייכם.

retro-orbital-injection-in-adult-zebrafish

Research

JoVE Journal

Biology

ביולוגיה

אנו מדגימים intraperitoneal הזרקה לתוך דג הזברה מבוגר. אנו משתמשים microsyringe 10 NanoFil μl נשלט על ידי בקר Micro4 ו UltraMicroPump III. הפגנה זו כוללת את השימוש במים קרים כחומר הרדמה.

הזרקה לתוך intraperitoneal דג הזברה למבוגרים

שיטה א 'תנאי מציאה ביטוי חלבון המטרה ברשתית דג הזברה מבוגר מתואר, הכוללת הזרקת intravitreally morpholinos antisense ו electroporating אותם לתוך הרשתית. החלבון המתקבל הוא הפיל במשך כמה ימים, אשר מאפשר בדיקת תפקידו של החלבון או התחדשות הרשתית ללא פגע.

ב electroporation vivo של Morpholinos לתוך הרשתית דג הזברה למבוגרים

אנו מציגים שיטה יעילה לתאי גנגליון רשתית (RGCs) בדג זברה בוגר.

תיוג מדרדר של תאים ברשתית גנגליון מבוגרים דג הזברה עם צבעי ניאון

כאן, אנו מציגים פרוטוקול להשתלת תאים של שריר השלד של דג הזברה ורבדומיוסרקומה עוברית (ERMS) לתוך דג זברה מוטנטי מוטנטי הומוזיגוטי של rag2E450fs. פרוטוקול זה מאפשר ניתוח יעיל של התחדשות וטרנספורמציה ממאירה של תאי שריר.

השתלת תאי שריר נורמלית וממאירים לחיסון חלש למבוגרים דג הזברה

שיטה זו מסתמכת על הזרקה של 0.5-3 μL של הפתרון לתוך החזה של דג מבוגר. ההליך מספק ביעילות חלבונים ותרכובות כימיות לתוך הסמיכות של הלב דג זברה מבלי לפגוע האיבר. הגישה מתאימה לבדיקת ההשפעות של גורמי אקסוגני על רקמות שונות של הלב.

הזרקת תוך-החזה לחקר בוגרים של לב זברדג

המאמר מסביר כיצד להסיר באופן כירורגי עיניים מזחלי דגי זברה חיים כצעד ראשון לקראת חקירת האופן שבו קלט רשתית משפיע על צמיחת והתפתחות של טקטום אופטי. בנוסף, המאמר מספק מידע על הרדמה של זחלים, קיבוע וכריתת מוח, ולאחר מכן אימונוהיסטוכימיה והדמיה קונפוקלית.

הסרת עיניים בזחלי דגי זברה חיים לבחינת גדילה והתפתחות תלויי עצבנות של מערכת הראייה

מתוארת שיטת הזרקה תוך-צפקית חדשה (IP) בדגי זברה בוגרים. בעת טיפול בתרכובות רעילות כגון דוקסורוביצין, הליך זה יעיל יותר משתי שיטות ה- IP שדווחו בעבר. הטכניקה תוכננה להיות מאומצת בקלות על ידי חוקרים בעלי ניסיון מוגבל במודל דגי הזברה.

טכניקת הזרקה תוך צפקית בדגי זברה בוגרים הממזערת נזקי גוף ותמותה נלווית

כאן, אנו מציגים פרוטוקול אופטימלי ויעיל להזרקה תוך ורידית של תאים או חומרים פרמקולוגיים לדג זברה בוגר, וכתוצאה מכך השתלת תאים משופרת ושיעורי הישרדות מוגברים של דג הזברה המטופל.

הזרקה תוך ורידית אופטימלית בדגי זברה בוגרים

כאן, אנו מציגים פרוטוקול מפורט להשתלת xenograft אוטומטית של גידול בזחלי דג זברה באמצעות מערכת הזרקה רובוטית חדישה. כמו כן, אנו מציגים סרטוני הזרקה ונתוני ולידציה המדגימים את הביצועים המוצלחים של המערכת.

אוטומציה של השתלת גידול בזחלי דג הזברה לחקר סרטן ורפואה

השתלה של מח כליות שלמים דג הזברה למבוגרים

למד את שיטת ההזרקה הרטרו מסלולית בדגי זברה מבוגרים לחקר שתלת תאי גזע המטופויטיים. הטכניקה כוללת איסוף תאי דם אדומים מתורמים ודימות באמצעות מיקרוסקופיית פלואורסצנציה.

רטרו מסלולית הזרקה של דג הזברה למבוגרים

גלה סרטונים נוספים