Name: הפיך, לא פולשני שיטת ההתנגדות מדידות דרכי הנשימה ואת נוזל שטיפה ברונכואלוואולרית דגימה של עכברים (וידאו) | JoVE Journal
Uploaded: 2010-04-13T17:00:00.000+00:00
Duration: 9 min 58 s
Description: למד שיטת אינטובציה אוראלית הפיכה לעכברים למדידת תגובתיות דרכי הנשימה ודגימת תאים דלקתיים. טכניקה זו מאפשרת מחקר פיזיולוגיה נשימתית בדגמי מכרסמים.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

אנו מודים לד&quot;ר וו מינצר על ההצעה לבצע אינטובציה orotracheal סיב אופטי. U19AI070973 נתמך על ידי מענקים, R01AI057696, K02HL75243 ו R01HL082487 מן המכונים הלאומיים לבריאות.

<ol><li>Hamelmann, E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Noninvasive+measurement+of+airway+responsiveness+in+allergic+mice+using+barometric+plethysmography%5BTitle%5D)+AND+%22Am.+J.+Respir.+Crit.+Care+Med%22%5BJournal%5D)">Noninvasive measurement of airway responsiveness in allergic mice using barometric plethysmography.</a> Am. J. Respir. Crit. Care Med. 156, 766-775 (1997).</li>
<li>Adler, A., Cieslewicz, G., Irvin, C. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Unrestrained+plethysmography+is+an+unreliable+measure+of+airway+responsiveness+in+BALB%2Fc+and+C57BL%2F6+mice%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Appl.+Physiol%22%5BJournal%5D)">Unrestrained plethysmography is an unreliable measure of airway responsiveness in BALB/c and C57BL/6 mice.</a> J. Appl. Physiol. 97, 286-292 (2004).</li>
<li>Bates, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+use+and+misuse+of+penh+in+animal+models+of+lung+disease%5BTitle%5D)+AND+%22Am.+J.+Respir.+Cell+Mol.+Biol%22%5BJournal%5D)">The use and misuse of penh in animal models of lung disease.</a> Am. J. Respir. Cell Mol. Biol. 31, 373-374 (2004).</li>
<li>Lundblad, L. K., Irvin, C. G., Adler, A., Bates, J. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+reevaluation+of+the+validity+of+unrestrained+plethysmography+in+mice%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Appl.+Physiol%22%5BJournal%5D)">A reevaluation of the validity of unrestrained plethysmography in mice.</a> J. Appl. Physiol. 93, 1198-1207 (2002).</li>
<li>Grunig, G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Requirement+for+IL-13+independently+of+IL-4+in+experimental+asthma%5BTitle%5D)+AND+%22Science%22%5BJournal%5D)">Requirement for IL-13 independently of IL-4 in experimental asthma.</a> Science. 282, 2261-2263 (1998).</li>
<li>Corry, D. B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Requirements+for+allergen-induced+airway+hyperreactivity+in+T+and+B+cell-deficient+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Mol.+Med%22%5BJournal%5D)">Requirements for allergen-induced airway hyperreactivity in T and B cell-deficient mice.</a> Mol. Med. 4, 344-355 (1998).</li>
<li>Corry, D. B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Interleukin+4%2C+but+not+interleukin+5+or+eosinophils%2C+is+required+in+a+murine+model+of+acute+airway+hyperreactivity%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Exp.+Med%22%5BJournal%5D)">Interleukin 4, but not interleukin 5 or eosinophils, is required in a murine model of acute airway hyperreactivity.</a> J. Exp. Med. 183, 109-117 (1996).</li>
<li>Amdur, M. O., Mead, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Mechanics+of+respiration+in+unanesthetized+guinea+pigs%5BTitle%5D)+AND+%22Am+J+Physiol%22%5BJournal%5D)">Mechanics of respiration in unanesthetized guinea pigs.</a> Am J Physiol. 192, 364-368 (1958).</li>
</ol>

המחקר של אסטמה, מחלות שונות אחרות חסימתית בדרכי הנשימה, מהווה שדה פעיל והרחבת של מחקר ביו. מרכיב חשוב של מחקר אסטמה הקשורות ניסיוני הוא היכולת למדוד שינויים בגודל דרכי הנשימה בתנאים משתנים. היצרות דרכי הנשימה מוגזמת בתגובה אתגר פרובוקטיבי, תכונה הקנוני של אסטמה, מחלות ריאה הקשורים מאפיין של hyperresponsiveness כינה דרכי הנשימה הנשימה, מהווה מרכיב מרכזי של התקפות משמעות קלינית המוביל קוצר נשימה ותסמינים אחרים, כולל מוות. <p class="jove_content" style=";text-align:right;directi...

Airway הפיזיולוגיה מדידה תוכנה (Rescomp) היה מוכן אישית (Millennium פרמייר קבוצה: 415-519-4371). הנתונים נותחו באמצעות תחנת PC מערכת הפעלה Windows XP מצויד עם מעבד Pentium III (Intel, Inc בסנטה קלרה, קליפורניה) ו אנלוגי 17 פינים ל אות ממיר דיגיטלי (National Instruments, # PC-LPM16). חיה קטנה בדרכי האוויר תחנת הפיזיולוגיה הורכב אישית (Millennium פרמייר קבוצה) באמצעות מתמרים ללחץ זמינים מסחרית (חלק # TRD5700 TRD4510 ו), מודולים preamp (חלק # MAX2270), מארז (חלק # MAX1320, כל מן Buxco, Inc בווילמינגטון, צפון קרוליינה ) ו plethysmograph אישית חיה קטנה. 0.5mm קוטר חיצוני סיבים אופטיים חוט, מחובר למקור האור (הפנס קול פאלמר, 41722 סדרה) מאוורר (הרווארד Apparatus עכבר מאוורר, # 687) 10 מ&quot;מ, מחט 27ga (BD Biosciences, חתול. לא. 309602) מחממים מנורה 1 מ&quot;ל במזרק (BD Biosciences, חתול. לא. 305109) מהדק 4 (פוני 3200 מהדק קפיץ) חוט 0.5 מ&quot;מ חיצוני עבור מדריך אינטובציה Hemacytometer Superfrost / פלוס מיקרוסקופ שקופיות (חתול פישר. לא. 12-550-15) Shandon סינון כרטיסים (Thermo חתול. לא. 5991022) תא שקופיות דיפרנציאלי כתם (חתול פישר. לא. 122911) מיקרוסקופ אור (לייקה) Cytospin 3 (Shandon) 20 ga, 1.25 אינטש ProtectIV קטטר תוך ורידי (סמית רפואי) 0.5 מ&quot;מ פולימר סיב אופטי (אדמונד אופטיקה # NT02-532).

הפיך, לא פולשני שיטת ההתנגדות מדידות דרכי הנשימה ואת נוזל שטיפה ברונכואלוואולרית דגימה של עכברים

A Reversible, Non-invasive Method for Airway Resistance Measurements and Bronchoalveolar Lavage Fluid Sampling in Mice

Airway (AHR) hyperreactivity מדידות שטיפה ברונכואלוואולרית (BAL) דגימת נוזל חיוניים מודלים ניסיוניים אסטמה, אך הליכים חוזרים ונשנים להשיג מדידות כאלה החיה אותו הם בדרך כלל לא ריאלי. הנה, אנחנו מדגימים פרוטוקולים לקבלת מעכברים מדידות חוזרות של AHR ו ברונכואלוואולרית דגימות נוזל שטיפה. עכברים היו תיגר intranasally שבע פעמים מעל 14 ימים עם אלרגן חזק או טיפול דמה. לפני האתגר הראשוני, ותוך 24 שעות לאחר כל אתגר intranasal, החיות באותו היו מורדמים, מחובר לצינורות בעל פה מאוורר מכאני. AHR, שהוערכו על ידי השוואת עקומות מינון תגובה של התנגדות מערכת הנשימה (RRS) הנגרמת על ידי הגדלת מינון תוך ורידי של כלוריד אצטילכולין (אח) בין זיוף ו-אלרגן תיגר בעלי חיים, היו נחושים. לאחר מכן, ובאמצעות אינטובציה זאת, הריאה השמאלית lavaged כך ההפרש ספירה של תאים בדרכי הנשימה יכול להתבצע. מחקרים אלה מראים כי מדידות חוזרות של AHR ואיסוף נוזל BAL אפשריים מן החיות באותה הנשימה כי hyperresponsiveness מירבית דרכי הנשימה eosinophilia מושגות תוך 7-10 ימים של ייזום אתגר אלרגן. טכניקה חדשנית זו מפחיתה באופן משמעותי את מספר העכברים הנדרש לניסויים האורך הוא ישים מינים מכרסמים שונים, מודלים מחלות דרכי הנשימה מכשירים הפיזיולוגיה.

מדידות חוזרות של הפיזיולוגיה מכרסם הנשימה דגימה של תאים דלקתיים בדרכי האוויר רצויות, אבל בדרך כלל לא ריאלי. כאן אנו מתארים את שיטת הדיר עבור בעל פה intubating עכברים המאפשר מדידות חוזרות של דרכי הנשימה ואת hyperreactivity דגימה של תאים דלקתיים בדרכי האוויר.

מדידות של תגובתיות-יתר של דרכי הנשימה (AHR) ודגימת נוזל שטיפה ברונכואלוולולרית (BAL) הן חיוניות למודלים ניסיוניים של אסמה, אך ביצוע חוזר של...

לפני תחילת הליך זה, יש להרדים את העכברים באמצעות הזרקה של tomate באופן אינטraperיטוני. לאחר מכן, מניחים את בעלי החיים על שולחן ומכניסים דרך הפה קטטר בכיול 20 gauge אל תוך הקנה. את העכברים שעברו אינטובציה מחברים למסייע נשימה מכני, ופותחים קו לווריד בזנב.לאחר מכן, העכברים מוכנסים לתוך SIGGRAPH למכרסמים המחובר לשני חיישני לחץ (pressure transducers). המערכת האלקטרונית מאפשרת מדידה רציפה של התנגדות מערכת הנשימה במהלך אתגר באצטילכולין. לאחר ניתוק המנשם והקו תוך-ורידי, הקטטר הקנה מוקדם לתוך הריאה השמאלית, אשר מנוקה באמצעות שטיפה (lavage) של תמיסת סליין המוזרקת ונשאבת חזרה דרך הקטטר.שלום, אני סימון פאר מהמחלקה לרפואה בבית הספר לרפואה של ביילור (Baylor College of Medicine). היום נראה לכם כיצד לבצע אינטובציה פהית לעכברים, כך שניתן יהיה לאסוף באופן חוזר נתונים על מכניקת דרכי הנשימה ונוזל שטיפה ברונכו-ולגולרי (bronchoalveolar lavage fluid). אנו משתמשים בהליך זה כדי לחקור מחלה אלרגית ניסויית, המהווה מודל ניסיוני לאסתמה, וניתן להתאים הליך זה גם ליישומים אחרים.אם כן, נתחיל. כדי להתחיל את הפרוצדורה, העכבר מושבז בהרדמה עמוקה באמצעות זריקה תו-בטנית (intraperitoneal) של 48 milligrams per kilogram של ate. לאחר מכן, העכבר מונח בתוך קופסה עם תאורה רכה כדי לשמור עליו רגוע.ניתן להשתמש בכלוב עכברים נקי המכוסה בבד למטרה זו. לאחר חמש עד 10 דקות, יש לוודא באמצעות צביטה בבוהן שהבעל חיים נמצא תחת הרדמה מלאה, ולאחר מכן להניחו במצב שכיבה. הצד הבטני פונה כלפי מעלה על שולחן קטן המכוון לזווית של 45 מעלות. כדי לקבע את הנבדק במקומו, הכניסו גומייה ENC המקיפה את השולחן מאחורי שורת השיניים העליונה.יש להשתמש במנורת חימום כדי לשמור על העכבר חם בעזרת יד ימין. השתמשו בפינצטה כדי לתפוס, להושיט ולהרים את הלשון מהפה. לאחר מכן, הכניסו בעדינות מדפיק לשון ממתכת המוחזק ביד שמאל.פעולה זו תאפשר נתיב אוויר ללא הפרעות והדמיה של מיתרי הקול לצורך אינטובציה. לאחר מכן, הכניסו חוט סיב אופטי בקוטר 0.8 מילימטר המחובר למקור אור דרך קטטר angiocatheter והאריכו אותו 10 מילימטרים מעבר לקצה. תוך כדי לחיצה על הלשון ביד שמאל, השתמשו ביד ימין כדי להנחות את הקצה המואר של חוט הסיב האופטי דרך חלל הפה והלוע עד שמיתרי הקול ייראו.לאחר מכן, תחת תצפית ישירה ובתיאום עם הזמן שבו מיתרי הקול פתוחים באופן מקסימלי, העבירו את חוט התמיכה דרך מיתרי הקול הנעים אל תוך הקנה. כעת, העבירו את קטטר האנגיו מעל חוט הסיב האופטי אל תוך הקנה, עד שקצה הקטטר יישאר בחלק המרכזי של הקנה. עבור עכבר השוקל 17 עד 22 גרם, הדבר תואם למקטע קטטר באורך 10 מילימטר שנותר מחוץ לפה.הוצא את חוט הסיב האופטי כדי לאשר הצלחה של האינטובציה. שים לב לנשימות עמוקות וסדירות המסתיימות באופן מיידי לאחר חסימת המחבר באמצעות האגודל. הורד את שולחן הפלתיסמוגרף עד שיהיה מקבילי לשולחן העבודה וסובב את הנבדק ב-180 מעלות עד שיהיה פונה אל פתח מאוורר האוויר.הפכו את החיה על צדה לפני החיבור למנשם. הבטיחו חיבור אטום להרמטיקה והפעילו את המנשם. אינטובציה מוצלחת מאושרת בהמשך כאשר ניתן לראות שתנועת הבטן עולה בקצב של המנשם.כדי להכין את המחט לקו הוורידי, הוצא מחט gauge 27 באורך 10 מילימטר מהמחבר למזרק וכפף אותה בזווית של 90 מעלות במרכז כך שהחלוץ פונה אל הזווית. חבר את הקצה ללא החלוץ לצינור PE 10 המוביל לפתח ההזרקה הוורידי (IV), כדי למנוע תסלילי אוויר שעלולים להיות קטלניים.יש לנקות את הפיתול והמחט באמצעות 0.9% sodium chloride בטמפרטורה של 37 degrees Celsius בעזרת מזרק של one milliliter. פתח ההזרקה מורכב ממחט בכיל 27 gauge שהודחקה דרך חור שנקדח במכסה של מבחנת צנטריפוגה בנפח 15 milliliter. המכסה ממולא בתמיסת סליין כך שקצה המחט שקוע באופן קבוע, ובכך מופחית הסבירות להחדרת אוויר למחט ולהזרקתו לווריד.יישרו את המחט בקצה הזנב (codal extreme). במקביל לו ומעל הווריד הצדי (lateral vein). הניעו את המחט מעט מתחת לעור תוך כדי הכוונתה.בכיוון קרניאל לאורך הווריד, תוך דחיפה תת-עורית אל עבר הכיפוף. כדי לאשר הצבה מוצלחת של ה-IV, משוך מעט את בוכנת המזרק. ניתן יהיה לראות זרימה חוזרת של דם לתוך צינור ה-IV.בנוסף, חייבת להיות זרימה ללא הפרעה בקו ה-IV לאחר הזרקת 50 עד 100 µL של תמיסת מלח לווריד הזנב. לאחר הסרת מנורת החום מהמערך, יש להניח את הנבדק בתוך ה-plasmo graph ולאטום אותו באופן הרמטי באמצעות ארבעה תפסים. הסרת מנורת החום חשובה כדי למנוע חימום של האוויר בתא ה-plasmo graph, דבר שעלול לשנות מדידות עתידיות של התנגדות מערכת הנשימה או RRS; התנגדות מערכת הנשימה או RRS נקבעת על ידי כימות רציף של המנה.שינוי בלחץ דרכי הנשימה ביחס לזרימת האוויר או delta P מעל V בנקודות של נפח ריאה שווה. Delta P נקבע באמצעות מתמר לחץ המחובר לקטטר אנגיו טרכאלי V. הדיפרנציאל של נפח השתל הפלזמה לאורך זמן מחושב על ידי מודול הקדם-מגבר. לאחר קביעת קו בסיס יציב, RRS מזריקה חמישה מנקים רצופים של ריכוזים עולים של acetylcholine chloride או CH במשך שנייה אחת דרך ה-iv.כל מנה עוקבת ניתנת עם חזרת ה-RRS לרמת הבסיס, עד להשגת עלייה של 200% בהתנגדות דרכי הנשימה. הוצא את ה-IV מווריד הזנב ונתק את העכבר מהמעזר. תוך שמירה על נתיב אוויר פתוח על ידי השארת הקנולה הטרכאלית במקומה, ודא שהעכבר חזר לנשימה ספונטנית.אם לא, ניתן לעודד נשימה על ידי עיסוי עדין של בית החזה. ברגע שהעכבר חזר לנשימה ספונטנית, העבירו אותו, כשהקנולה הקנה במקומה, לתא שמנוקה עם 100% oxygen ושמירה על טמפרטורה של 37 degrees Celsius באמצעות מנורת חימום. הקנולה הקנה חייבת להישאר במקומה עד שהבעל החיים יתעורר, כדי למנוע מוות מחנק עקב רטיבת יתר (hypersalivation) המושרה על ידי acetylcholine.ניתן לאסוף נוזל שטיפת סימפונות ונאדיים (bronchoalveolar lavage או BAL) רק לאחר שהעכבר התאושש מספיק ורפלקס הפליטה שלו חזר, דבר שאמור להתרחש כ-20 דקות לאחר ההחזרה לתא ההתאוששות. כדי להעריך את רפלקס הפליטה, החלק בעדינות את קטטר האנגיו פנימה והחוצה; שיעול ברור או מאבק מעידים על כך שרפלקס הפליטה חזר. לצורך איסוף נוזל ה-BAL, יש להחדיר לתוך קטטר האנגיו תיל הובלה מתכתי לאינטובציה עם כיפוף רציף של כ-30 מעלות המופנה לכיוון האונה השמאלית של הריאה.החדירו את תיל ה-G ואת קטטר ה-angio יחד אל תוך האונה השמאלית של הריאה, כך שחלקו של חיבור הקטטר המבצבץ יבלוט מעבר לשיניים הקדמיות במילימטר אחד בלבד. ודאו שקצה תיל ה-G אינו עובר דרך הקצה הפתוח של קטטר ה-angio. כדי למנוע קרע או פגיעה בקנה הנשימה בזמן שקטטר ה-angio נמצא במקומו, הזרים 300 µL של PBS סטרילי pH 7.4 לריאה השמאלית באמצעות מזרק של 1 mL מיד לאחר מכן, תוך כדי משיכת בוכנת המזרק.כדי ליצור לחץ שלילי, הוצא את קטטר האנגיו לאט תוך כדי עיסוי אינטנסיבי של הריאה. צפויה השבה של 100 עד 200 µL של BAL. החזר מיד את עכבר השטיפה לתא החמצן בטמפרטורה של 37 °C וריכוז של 100% חמצן.הנח את החיה על צדה השמאלי עד להחלמה מלאה, כ-20 דקות, ולאחר מכן החזר אותה לכלוב. אנו מציגים כאן תוצאות מייצגות של מדידות התנגדות דרכי הנשימה; תגובתיות-יתר של דרכי הנשימה הוגדרה כערכי RRS הגבוהים באופן מובהק בכל מינון של acetylcholine בהשוואה לערכים של חיות נאיביות, אשר התפתחו לאחר חמישה חשיפות לאלרגן במינון הרביעי. עם זאת, נצפתה תגובתיות-יתר גבוהה בהרבה של דרכי הנשימה לאחר החשיפה השישית, ללא עלייה נוספת ברגישות.באתגר השביעי, הופסק מתן המינון של CH לאחר שערכי ה-RRS שילשו את ערכי הבסיס; הגדלה נוספת במינון תגרום אחרת לברונכוספזם קטלני. עכברים שקיבלו חזרות של חומר השלילה (vehicle) באופן אינטראנזלי לא פיתחו תגובתיות יתר של דרכי הנשימה, ובכל המינונים שניתנו של CH, מדידות ה-RRS לא השתנו באופן משמעותי מערכי הבסיס, כפי שמוצג ברישומי RRS בזמן אמת מייצגים אלו של עכבר נאיבי ועכבר שחוללו שש פעמים עם אלרגן שקיבל מינונים רצופים של CH באופן IV לפני הופעת AHR חזקה. סוג התא הדומיננטי בדרכי הנשימה שהושרה על ידי אלרגן היה נויטרופיל, בדומה למגמה של AHR. עם זאת, האאוזינופיליה התחזקה בהדרגה עם חשיפות חוזרות לאלרגן, והאאוזינופיל הפך לסוג התא הדומיננטי מבחינה מספרית בנוזל BAL. לאחר האתגר השישי, במקביל לירידה ניכרת במספר הנויטרופילים.בעכברים של קבוצת הביקורת שקיבלו PBS. מדידות של התנגדות דרכי הנשימה גם הן לא השתנו באופן מובהק לאורך הזמן. בעכברים אלו נצפתה גם הגברה של גיוס מקרופאגים ונויטרופילים, אך לא אאוזינופילים, לנוזל ה-BAL, בדומה לשינויים שנצפו בעכברים שעברו דגימות חוזרות של נוזל BAL בלבד.כך הצגנו בפניכם כיצד לבצע אינטובציה הפיכה דרך הפה בעכברים ולגשת לקו הוורידי כדי לאסוף נתונים פיזיולוגיים של דרכי הנשימה ונוזל ברונכואלוולארי. לפני ביצוע טכניקות אלו בבעלי חיים חיים, חיוני להתנסות ולשכלל כל טכניקה בנפרד, על בעלי חיים קריו-שמורים (cric).טיפול קפדני ועדין הוא חיוני ויש להקפיד על טכניקה אספטית מחמירה בכל עת. זה הכל. תודה שצפיתם ובהצלחה בניסויים שלכם.

a-reversible-non-invasive-method-for-airway-resistance-measurements

Research

JoVE Journal

Biology

ביולוגיה

אנו מדגימים לא ניתוחי מסירה של חומרי הבדיקה לריאות של העכברים הרדים דרך קנה הנשימה. שיטה זו מאפשרת חשיפה הריאות לפתוגנים, ציטוקינים חיידקים ווירוסים, נוגדנים, חרוזים, כימיקלים, או צבעים. בנוסף, אנו מתארים קציר ועיבוד של הריאות ניקוז ריאה בלוטות לימפה (LDLNs) עבור cytometry הזרימה.

לא ניתוחי Intratracheal החדרה של עכברים עם ניתוח ריאות וניקוז ריאות בלוטות הלימפה על ידי זרימת cytometry

מודלים העכבר ניסיוני של אסטמה אלרגית להציע אפשרויות חדשות ללימוד בהיווצרות המחלה ופיתוח ותרופות חדשות. דגמים אלה מתאימים גם לגורמים השולטים מדידה תגובה חיסונית אלרגית, דלקת בדרכי הנשימה, ו פתופיזיולוגיה ריאתי.

דגם Murine של אסטמה אלרגן מושרה

אנו מתארים טכניקת מחקר לרונכוסקופיה סיב אופטי ושטיפה ברונכואלוואולרית באמצעות שאיבה בלחץ נמוכה. הטכניקה משמשת כדי לקצור תאים חיסוניים ממשטחי רונכואלוואולרית ריאות. משמש הרדמה מקומית וטשטוש קל בהכרה (midazolam). נושאים לסבול את תופעות לוואי מינימליות גם הליך וניסיון.

שטיפה ברונכואלוואולרית (BAL) למחקר; קבלת תשואה הולמת לדוגמא

סרטון זה מדגים את השימוש בציטומטריית זרימה כדי לזהות ולספור תאים חיסוניים שונים בנוזל שטיפה ברונכואלבאולרי. בתחילה, מזהים תאים חיסוניים בודדים באמצעות צבע כדאיות, ולאחר מכן צביעה דיפרנציאלית של חלבוני סמן פני השטח, המאפשרת ספירה מדויקת של כל סוג תא.

זיהוי וספירה של תאי מערכת החיסון בנוזל שטיפה סימפוני לפי ציטומטריית זרימה

הפרוטוקול הנוכחי מספק תיאור מפורט צעד אחר צעד של הנהלים הנדרשים לביצוע מדידות של מכניקה של מערכת נשימה, כמו גם ההערכה של היענות נשימה לשאיפת מטכולין בעכברים באמצעות טכניקת התנודה נאלצה (flexiVent; SCIREQ Inc, מונטריאול, QC , קנדה).

הערכה של מכניקת מערכת נשימה בעכברים באמצעות טכניקת תנודה בכפייה

מאמר זה מתאר שיטת striaghforward ויעילה של intubating עכברים למדידת תפקוד הריאתי או החדרה ריאתי, שמאפשרת לעכברים להתאושש ולהיחקר בתקופות מאוחרות יותר. ההליך כרוך מקור אור סיב אופטי יקר שמאיר ישירות לקנה נשימה.

שיטה פשוטה של ​​אינטובציה ריאות המאוסות

אנו מציגים פרוטוקול להערכת קצב פינוי הנוזל המכתשית או בצקת ריאות בריאות של עכברים יילודים באמצעות טכנולוגיית הדמיית רנטגן.

הדמית רנטגן בזמן אמת של כרכי נוזל ריאות עובריות עכבר ריאות

המטרה של מאמר זה היא לתאר שיטות פשוטות שיסייעו מאוד בהגדרה והניתוח של ריאות עכבר עם סרטן ריאות או פתולוגיות אחרות. אנו מציגים 3 פרוטוקולים פשוט ואמין לביצוע instillations ריאות, קיבעון, ומדידות נפח ריאות.

שיטות החדרה וקיבוע שימושיות בחקר סרטן ריאות עכבר

מצב בריאותי של הריאה משתקף על ידי סוג ומספר של תאים חיסוניים הנמצאים bronchioles של הריאה. אנו מתארים טכניקת שטיפה ברונכואלוואלית המאפשרת בידוד ומחקר של תאים לא דליקים וגורמים מסיסים ממערכת הנשימה התחתונה של עכברים.

ברונכאלווולאר של ריאות Murine כדי לנתח דלקת תאים דלקתית

המטרה של מאמר זה היא לתאר שיטה מעודנת של צנרור העכבר המעבדה. השיטה אינה פולשנית, ולכן אידיאלית למחקרים הדורשים ניטור סדרתי של תפקודי הנשימה ו/או הערכת טיפולים בריאה.

וחזר אורוקנה אל בעכברים

כאן, אנו מתארים את מדידת השיעול באמצעות מערכת פלטיסמוגרפיה לא פולשנית ובזמן אמת של כל הגוף (WBP) ואת ההליכים הנורמטיביים לקצירת דגימות רקמה של עכברים ומציגים כמה שיטות להערכת דלקת בדרכי הנשימה.

שיטות לאיתור שיעול ודלקת בדרכי הנשימה בעכברים

למד שיטת אינטובציה אוראלית הפיכה לעכברים למדידת תגובתיות דרכי הנשימה ודגימת תאים דלקתיים. טכניקה זו מאפשרת מחקר פיזיולוגיה נשימתית בדגמי מכרסמים.

הפיך, לא פולשני שיטת ההתנגדות מדידות דרכי הנשימה ואת נוזל שטיפה ברונכואלוואולרית דגימה של עכברים

גלה סרטונים נוספים