Name: רישום א.ק.ג. אמבולטורי ב עכברים (וידאו) | JoVE Journal
Uploaded: 2010-05-27T17:00:00.000+00:00
Duration: 8 min
Description: למדו כיצד לבצע רישום א.ק.ג. טלמטרי ארוך טווח בעכברים לחקר הפרעות קצב לב ומוות לב פתאומי. השיטה כוללת השתלת טלמטר בבטן ומיקום אלקטרודות בחזה ובבטן.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

סמן מקאולי נתמך על ידי mentored-NIH להעניק הכשרה 5T32HL066991-07 קסנדר Wehrens נתמך על ידי NIH / NHLBI מענקים 1R01HL091947-01A209 3R01HL089598 ו-03S109

1. הכנת מד מרחק להשתלה כירורגי <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> לפני החדרת מד מרחק א.ק.ג. לתוך העכבר, חשוב לוודא את מד מרחק א.ק.ג. הוא סטרילי תקין. מכשירי טלמטריה ניו ניתנים בדרך כלל במצב סטרילי על ידי היצרן. Telemeters א.ק.ג. ניתן לעשות שימוש חוזר בתנאי התקן הוא ניקה באמצעות פתרון Tergazyme 1% לפחות 4 שעות. אתה יכול לשטוף את מד מרחק עם מים סטריליים לאחר ניקוי עם Tergazyme. בנוסף, השימוש Wavicide-01 חיטוי לילה לעקר את מד מרחק אק"ג. הקפידו לשטוף את חומר חיטוי עם מים סטריליים 48 שעות לפני ההשתלה לעכברים. שומרים בכלי סטרילי. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> בדוק מד מרחק מוביל שלמות של שני חוטים ניצוח את נדן בידוד. הפעל את משדר טלמטריה באמצעות מגנט נופף בתוך 5 ס"מ של מד מרחק, ולבדוק את האות עם רדיו AM בתדר 530. האות צריך להיות חזק וברור צריך להשתנות בעוצמה המגרש המבוססת על מניפולציה של החוטים. רשום את מספר הדגם, המספר הסידורי מד מרחק, והערך כיול אק"ג. יצרנים לעתים קרובות ממליצים מד מרחק צריך להיות על 24 שעות לפני ההשתלה, ראה את הוראות השימוש מד מרחק הספציפי שלך לקבלת פרטים. בדוגמה זו, נשתמש למדעי נתונים בינלאומיים (DSI) מד מרחק להשתלה. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> הכנת מד מרחק להוביל עשויה להיות מושגת על ידי חיתוך להוביל שלילי (לבן) של כ 3.5 ס"מ להוביל חיובי (אדום) עד 2.5 ס"מ. אלה הם אורכים אופטימליים עבור השתלת להוביל השלילי בבית החזה הימני, להוביל חיובי בבטן השמאלי (ראה איור 2). בשלב הבא, להסיר את נדן בידוד לחשוף 7 מ"מ של חוט. צייר את הקצה של עופרת המתכת עם דבק מגע סטרילית, כגון בונד וטרינר, ולאחר מכן לצרף כמוסות להוביל את הטיפים מתכת. כמוסות אלו ימנע שחיקה העור בשל להוביל השמה. כ 2-3 מ"מ חוט מתכת צריך להיות חשוף חישה חשמלי של קצב הלב הילידים. </li></ol> 2. השתלה ניתוחית של מד מרחק <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> על מנת להשתמש בטכניקה סטרילית בכירורגיה Murine, תצטרך כפפות סטריליות, וילון סטרילי, 6-0 תפרים Prolene. אתה גם צריך 2 זוגות של מלקחיים מעוקרות, 1 זוג בוטה, הסתיים מספריים, אזמל, ונהג מחט. מכשירי ניתוח עשויים להיות מעוקרים מעקר חרוז זכוכית מחומם ל 250 מעלות צלזיוס. הקפד לחטא ולשטוף את מד מרחק כפי שתואר לעיל לפני השימוש. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> הכינו את העכבר לניתוח על ידי הראשון הרדמה העכבר בתיבה באמצעות אינדוקציה 3% isoflurane ב L 0.5 / min O2 100%. השתמש כרית חימום, כגון משאבת-T, אשר מפיצה מים חמים, כדי לשמור על הטמפרטורה של העכבר בהרדמה. הטמפרטורה עשויה להיות במעקב על ידי בדיקה רקטלית, אם תרצה בכך. כאשר העכבר מסומם כראוי, לחלוטין לגלח את הבטן והחזה של העכבר עם קוצץ חשמלי. Re-להרדים את העכבר עם isoflurane לפני העברת העכבר צינור זרימה קבועה, פרקדן, עם הראש פונה משם בזנב כלפיך. קלטת את הכפות של העכבר לשולחן כירורגי מחומם. נגבו את הבטן עם ספוגית אלכוהול כדי להסיר שיער מגולח לנקות את שדה הניתוח. החל בשלוש שכבות נפרדות של בבטאדין עם מטליות לחטא את הבטן והחזה. ודא רמת הנכונות של הרדמה על ידי הפעלת לחץ על הציפורן העכבר. לאחר עכבר הוכן לניתוח, להשתמש בכפפות סטריליות וליישם את וילון סטרילי לתחום כירורגית. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> ההשתלה מד מרחק intraperitoneal מציעה את היתרון של ניסויים הפיזיולוגיה תרגיל. עבור הכניסה intraperitoneal, להתחיל ניתוח באמצעות אזמל כדי ליצור חתך קו האמצע האנכי של העור המכסה את הבטן בערך 2.5 ס"מ אורך. בזהירות העור להפריד רקמות החיבור הבסיסי באמצעות בוטה, הסתיים מספריים. לאחר מכן, ליצור חתך קו האמצע האנכי של Linea alba שמעל הצפק, בערך 1.5 ס"מ אורך. בנוסף, ליצור חור קטן בדיוק מעל הצפק (הגולגולת) כדי חתך הצפק, אשר תשמש פורקן תת עורי מוביל. בזמן ביצוע הניתוח, לשמור על לחות אתר כירורגית מפעם לפעם על ידי טפטוף תמיסת מלח סטרילית למגרש ההפעלה. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> הכנס את מד מרחק לתוך חלל הצפק הנכון. הכנס מלקחיים לתוך החור מעולה מד מרחק ולמשוך גם מוביל את דרך החור להוביל ולכן הם בולטים מן הצפק. שימוש מתמשך 6-0 תפרים Prolene כדי לסגור את קו האמצע 1.5 ס"מ הצפק חתך אנכי. </li></ol> 3. עופרת השרשה וסגירת בטן <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> מוביל א.ק.ג. ממוקמות בתצורה השנייה להוביל. להוביל עם נדן לבן / שקוף הוא שלילי, ממוקם בבטן הימנית העליונה. ראשית, ליצור 0.5 ס"מ העור חתך בחזה הימני העליון של העכבר.בשלב הבא, להשתמש במספריים בוטה כדי ליצור מנהרה חזרה החתך בבטן. משוך את ההובלה במנהרה ולהשתמש תפר 6-0 Prolene לעגן את להוביל שריר החזה. ודא תפר הוא על גבי החלק החשוף של עופרת, ויוצר קשר טוב בין שריר להוביל הבסיסית. השתמש תפר second בקרבה אחד הנ"ל, כדי לשתק את להוביל השריר. סגירת החתך בעור באמצעות תפר 6-0 Prolene. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> להוביל חיובי (נדן אדום) ממוקם בבטן הימנית מתחת לסרעפת שמאל מתחת ללב. להוביל מעוגן לרקמת הצפק הבסיסית על ידי תפר 6-0 ו Prolene צריך קשר טוב עם רקמת הצפק. חתך נוסף אין צורך בשלב זה כי באתר של ההשתלה להוביל קרוב החתך קו האמצע האנכי, וכך ניתן לגשת בקלות עם שדה הניתוח הקיים. ראוי לציין, כי רקמת הצפק יש הרים, כדי למנוע ניקוב של המעי הבסיסית. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> סגור את fascia עור הבטן ברצף עם Prolene 6-0 שכבות. </li></ol> 4. לאחר הניתוח טיפול <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> תן 0.1 מ"ל של עכבר [1 מ"ג / מ"ל] עצירות עבור כאבים מיד לאחר הניתוח. אפשר בעכבר כדי להתאושש מניתוח על משטח לוהט. אם העכבר עבר ניתוח ממושך&gt; 30 דקות, או אם העכבר נראה יבש, ניתן להזריק 0.2-0.3 מ"ל סליין סטרילי אל תוך הצפק עבור להחזרת נוזלים. עבור כאבים שלאחר הניתוח המשיך מקובל לספק עכברים עם עצירות פעמיים ביום למשך שלושה ימים, ולאחר מכן לפי הצורך כל שמונה שעות. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> נקו את בבטאדין עם ספוגית אלכוהול, כדי למנוע גירוי לאחר ניתוח. זכור לרשום את משקל לאחר ניתוח לקביעת הבאות של בריאות לאחר ניתוח. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> 8-24 שעות לאחר הניתוח, לתת את העכבר כאבים עם עצירות נוספות בעת הצורך, כמו זה יהיה להפחית את הכאב ולהפחית להוביל לכישלון ההשמה של העכבר לופתת את האתר לאחר ניתוח. </li></ol> 5. נציג תוצאות כאשר מבוצע כהלכה, העכבר צריך להיות סגור חתכים בבטן עם תת עורי מוביל מתחת לעור. בדרך כלל, העכבר לוקח 10-30 דקות כדי להתאושש מן ההרדמה. זה לוקח בערך 7-10 ימים לפני העכברים התאוששו לחלוטין מהניתוח, כפי שמעידים ההתאוששות של אובדן שלאחר הניתוח במשקל הנורמליזציה של הניידות. הסיבוך השכיח ביותר של הניתוח הוא מוביל לשחיקה של איבר דרך העור ב 10 הימים הראשונים לאחר הניתוח. סיבוך זה שכיח ניתן להימנע על ידי הקפדה בתוקף תת עורי מוביל רקמות תת עורית או הצפק. טכניקה זו מונעת מוביל הרפיון, אשר ליצור לחץ וחיכוך על העור כאשר העכבר ambulates. אמנם פחות שכיח, זיהום אלח דם עלולה להתרחש טעויות בטכניקה סטרילית, או ניקוי שלם של telemeters בשימוש. פלט א.ק. ג עשוי להיות מוקלט על ידי מטריקס מקלט יחד עם רכישת התוכנה נתונים, כגון נתונים למדעים הבינלאומי (DSI). תוצאות Waveform לכלול גל מוגדרים P, המציין שלילת קוטביות פרוזדורים, וגם גל QRS המסמל שלילת קוטביות חדרית, כפי שמוצג באיור 3 להלן. איכות טובה א.ק.ג. עקבות צריך גל מוגדרים P שלפני ברורים גל QRS ביחס של 1:1. לא צריך להיות אות רקע נמוך מרווחי RR צריך להיות קבוע wild-type עכברים. איכות עניים א.ק.ג. עקבות ייתכן P ברור או גלי QRS, או אות הרקע, אשר עשוי להפוך את המחשב בעקבות ניתוח קשה. א.ק.ג. עני זכר יכול להיות קבוע על ידי מחדש השתלת מוביל מד מרחק, בדרך כלל אחד בכל פעם. כדי לחדש את השתל להוביל מד מרחק, במקום את העכבר תחת הרדמה, באמצעות טכניקה כירורגית, לעשות חתך בעור ישירות המכסה את ההובלה השאלה. כאשר להוביל הגישה, לחתוך את תפר עיגון להוביל, ולהמשיך להוביל למיקום הרצוי לפני עיגון להוביל שוב. לבסוף, לסגור את האתר כירורגית עם Prolene 6-0. <img src="/files/ftp_upload/1739/1739fig1.jpg" alt="איור 1"> איור 1: דוגמה מד מרחק חיה קטנה עם מוביל חיוביים ושליליים. באופן כללי, להוביל אדום הוא להוביל חיובית, את ההובלה לבן הוא להוביל שלילי. להוביל כל אחד צריך בידוד, נדן 5-7 מ"מ של חוט חשוף, ועל קצה כתרים מפלסטיק, אשר מונע שחיקת להוביל את דרך העור. <img src="/files/ftp_upload/1739/1739fig2.jpg" alt="איור 2"> איור 2: קריקטורה המראה הנכון ההשתלה מד מרחק אתרים על עכבר. להוביל לבן (שלילי) הוא מושתל בחזה העליון הימני של העכבר, את ההובלה (חיובי) אדום ממוקם בבטן הימנית, כך החושים מד מרחק "שתי להוביל" תצורה. &lt;בכיתה p = "jove_content"&gt; <img src="/files/ftp_upload/1739/1739fig3.jpg" alt="איור 3"> איור 3: waveform נציג עכבר קצב סינוס נורמלי. גל P מייצג שלילת קוטביות פרוזדורים QRS קומפלקס מייצג שלילת קוטביות חדרית. Waveform באיכות גבוהה צריך גל P ברור שלפני כל מורכבות QRS ביחס 01:01.

<ol><li>Cerrone, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Bidirectional+ventricular+tachycardia+and+fibrillation+elicited+in+a+knock-in+mouse+model+carrier+of+a+mutation+in+the+cardiac+ryanodine+receptor%5BTitle%5D)+AND+%22Circ+Res%22%5BJournal%5D)">Bidirectional ventricular tachycardia and fibrillation elicited in a knock-in mouse model carrier of a mutation in the cardiac ryanodine receptor.</a> Circ Res. 96 (10), e77-e77 (2005).</li>
<li>Chelu, M. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Calmodulin+kinase+II-mediated+sarcoplasmic+reticulum+Ca2%2B+leak+promotes+atrial+fibrillation+in+mice%5BTitle%5D)+AND+%22J+Clin+Invest%22%5BJournal%5D)">Calmodulin kinase II-mediated sarcoplasmic reticulum Ca2+ leak promotes atrial fibrillation in mice.</a> J Clin Invest. 119 (7), 1940-1940 (1940).</li>
<li>Sood, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Intracellular+calcium+leak+due+to+FKBP12.6+deficiency+in+mice+facilitates+the+inducibility+of+atrial+fibrillation%5BTitle%5D)+AND+%22Heart+Rhythm%22%5BJournal%5D)">Intracellular calcium leak due to FKBP12.6 deficiency in mice facilitates the inducibility of atrial fibrillation.</a> Heart Rhythm. 5 (7), 1047-1047 (2008).</li>
<li>Swoap, S. J., Gutilla, M. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Cardiovascular+changes+during+daily+torpor+in+the+laboratory+mouse%5BTitle%5D)+AND+%22Am+J+Physiol+Regul+Integr+Comp+Physiol%22%5BJournal%5D)">Cardiovascular changes during daily torpor in the laboratory mouse.</a> Am J Physiol Regul Integr Comp Physiol. 297 (3), R769-R769 (2009).</li>
<li>Costa-Goncalves, da, C, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Role+of+the+multidomain+protein+spinophilin+in+blood+pressure+and+cardiac+function+regulation%5BTitle%5D)+AND+%22Hypertension%22%5BJournal%5D)">Role of the multidomain protein spinophilin in blood pressure and cardiac function regulation.</a> Hypertension. 52 (4), 702-702 (2008).</li>
<li>Wehrens, X. H., Kirchhoff, S., Doevendans, P. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Mouse+electrocardiography%3A+an+interval+of+thirty+years%5BTitle%5D)+AND+%22Cardiovasc+Res%22%5BJournal%5D)">Mouse electrocardiography: an interval of thirty years.</a> Cardiovasc Res. 45 (1), 231-231 (2000).</li>
</ol>

השלבים הקריטיים של הליך זה מנקים הכנה נכונה של העכבר לפני הניתוח הישרדות. כאשר מד מרחק ואת אתר פעיל עכבר מנקים כמו שצריך, יש הרבה יותר טוב לאחר ניתוח התוצאות. בנוסף, תשומת לב להוביל מיקום מפחית לאחר ניתוח שחיקת העור. שינויים אפשריים לטכניקה כוללים תצורות חלופיות להערכת תפקוד LV לרוחב הקיר (אני להוביל תצורה), או את השימוש של מד מרחק לא רק לניתוח waveform א.ק.ג., אלא גם הטמפרטורה וגם הלחץ בדיקות דם [מעבר להיקף של מאמר זה] . מיקום חלופי הקלטה טלמטריה א.ק.ג. הוא מיקום תת עורית להוביל ...

<table><tbody><tr><td>מכשיר סטריליזציה של חרוצים Steri 250</td><td>Inotech</td><td>IS-250</td><td></td></tr><tr><td>מספריים בעלי קצה קהה</td><td>Roboz Surgical Instruments Co.</td><td>RS-5980</td><td></td></tr><tr><td>פינצטה בעלת קצה קהה (x2)</td><td>Roboz Surgical Instruments Co.</td><td>RS-5138</td><td></td></tr><tr><td>מאייד הרדמה וטרינרי</td><td>Surgivet</td><td>Isotec 4</td><td></td></tr><tr><td>משאבת T/Pump</td><td>Gaymar Industries</td><td>P/N11184-000</td><td></td></tr><tr><td>חוט תפירה מונופילמנט מפרופילן כחול</td><td>Ethicon Inc.</td><td>8718</td><td></td></tr><tr><td>פובידון יוד, 10%</td><td>Equate</td><td>N/A</td><td></td></tr><tr><td>סמרטוטים עם אלכוהול</td><td>PDI</td><td>B339</td><td></td></tr><tr><td>Tergazyme</td><td>Alconox, Inc.</td><td>21837-118</td><td></td></tr><tr><td>Wavidicde-01</td><td>Medical Chemical Corporation</td><td>Wavicide-01</td><td></td></tr><tr><td>טלמטר ECG</td><td>DataSciences International</td><td>EA-F20</td><td></td></tr></tbody></table>

רישום א.ק.ג. אמבולטורי ב עכברים

Ambulatory ECG Recording in Mice

Telemetric הקלטה א.ק.ג. בעכברים חיוני להבנת המנגנונים מאחורי הפרעות קצב, הפרעות הולכה, ועל למוות קרדיאלי פתאומי. למרות השטח א.ק.ג. ישמש לטווח קצר מדידות של מרווחי waveform, אין זה מעשי מחקרים ארוכי טווח של השתנות קצב הלב, או ללכוד פרקים נדירים של הפרעות קצב. מושתלת telemeters א.ק.ג. מציעים את היתרונות של השתלה כירורגית פשוטה, ארוכת טווח הקלטה של ​​electrograms בעכברים אמבולטורי, ויכולת הרחבה עם הקלטות סימולטני של מספר רב של בעלי חיים. כאן, אנו מציגים מדריך צעד אחר צעד עד ההשתלה של telemeters הקלטה א.ק.ג. אמבולטורי בעכברים. היצמדות קפדנית על טכניקה aseptic נדרש תוצאות ההישרדות נוחים עם אפשרות של השתלת הקלטה של ​​שבועות עד חודשים. לפיכך, מושתלת טלמטריה אק&quot;ג הוא כלי רב ערך לגילוי של מידע קריטי על electrophysiology לב במודלים של בעלי חיים אמבולטוריים כגון העכבר.

Telemetric א.ק.ג. התפתחה ככלי חיוני להערכת במודלים של בעלי חיים על הפרעות בקצב הלב או מוות קרדיאלי פתאומי. כאן, אנו מציגים מדריך בשלבים להקלטות telemetric א.ק.ג. עבור היישום לניטור ארוך טווח א.ק.ג. אמבולטורי בעכברים.

הקלטת ECG טלומטרית בעכברים חיונית להבנת המנגנונים העומדים מאחורי הפרעות קצב, הפרעות הולכה ומות לב פתאומי. אף על פי ש...

ניתוח להשתלת Beacon מתבצע על ידי גילוח העכבר, הרדמתו וסטריליזציה של הבטן והחזה באתר הניתוח המתוכנן. בצעו חתך אנכי בקו האמצע של הבטן באמצעות סכין מנתחים (scalpel) כדי לחשוף את הצהרה (peritoneum). בצעו חתך אנכי נוסף בקו האמצע של הצהרה לצורך הכנסת הטלמטר. הכניסו את ה-TER לצד ימין של הבטן מתחת לצהרה, כך שרק המוליכים יישארו חשופים.סגרו את הפריתונאום והשתילו מתחת לעור את מובילי ה-TER כך שהמוביל השלילי או הלבן מושתל בחלק העליון הימני של בית החזה והמוביל החיובי או האדום מושתל מעל החלק העליון השמאלי של הבטן. לסיום, סגרו את העור באמצעות תפרים. שלום, אני מארק מקאולי מהמעבדה של זנדר וורן במחלקה לרפואה ב-Baylor College of Medicine.היום אדגים לכם טכניקה להשתלת TERs של ECG בעכברים. אנו משתמשים בטכניקה זו כדי לחקור שינויים בקצב הלב ובמקצב הלב בעכברים. אז בואו נתחיל.לפני השתלת TER של ECG בעכבר, חשוב לוודא שה-TER סטרילי ותקין מבחינה תפעולית. זוהי דוגמה למשדר טלמטריה לבעלי חיים קטנים מבית Data Sciences International עם מוליך חיובי אדום ומוליך שלילי לבן. לכל מוליך יש מעטפת בידוד, שני מילימטרים של חוט חשוף וקצה עם כיסוי פלסטיק, המונע שחיקה של המוליך דרך העור.מכשירי טלמטריה חדשים מסופקים בדרך כלל במצב סטרילי על ידי היצרן, אך ניתן להשתמש ב-TERs שוב, בתנאי שהם נהיו נקיים באוויר באמצעות תמיסת zyme בריכוז 1% למשך למעלה מארבע שעות. בנוסף, השתמשו בחומר החיטוי WA OFI O למשך לילה כדי לעקר את ה-ECG Telemeter. הקפידו לשטוף את חומר החיטוי במים סטריליים לפני ההשתלה בעכברים.בדקו את תקינות מובילי הטלמטר, הן לגבי החוטים המוליכים והן לגבי מעטפת הבידוד. הפעילו את משדר הטלמטריה באמצעות מגנט ובדקו את האות באמצעות רדיו בתדר AM 530. האות צריך להיות חזק וברור, ועליו להשתנות בעוצמתו ובגובהו בהתאם למניפולציה של החוטים.רשמו את מספר הדגם, את המספר הסידורי של ה-TER ואת ערך כיול ה-ECG. במידה ורלוונטי, יצרנים ממליצים לעיתים קרובות שה-TER יהיה דלוק במשך 24 שעות לפני ההשתלה. עיינו במדריך ההוראות עבור ה-ter הספציפי שלכם.להכנת מוליכי ה-TER, חתכו את המוליך השלילי או הלבן לאורך של כ-3.5 סנטימטרים ואת המוליך החיובי או האדום לאורך של 2.5 סנטימטרים. אלו הם האורכים האופטימליים עבור השתלת המוליך השלילי בחזה ימין והמוליך החיובי בבטן שמאל. לאחר מכן, הסירו את מעטפת הבידוד כדי לחשוף שבעה מילימטרים של תיל.מרחו דבק מהיר (super glue) על קצות המוליכים המתכתיים ולאחר מכן הצמידו כיסויי עופרת לקצוות המתכת. כיסויים אלו ימנעו שחיקה של העור כתוצאה מהצבת העופרת. כיוון שנדרש חישוף חשמלי של קצב הלב הטבעי, יש להשאיר כ-2 עד 3 מילימטרים של תיל המתכת חשופים.השימוש בטכניקות סטריליות הוא קריטי במהלך הניתוח. להשתלה של הטלמטר, תזדקקו לכפפות סטריליות, סדין סטרילי ושש תפרים מסוג O proline. יש לעקר את כל המכשירים הכירורגיים במכשיר עיקור בחרוזיות זכוכית המחומם ל-250 degrees Celsius.אלו כוללים שני זוגות פינצטות, זוג מספריים בעלי קצוות קהים, סכין מנתחים ומחזיק מחטים. ודאו שאתם מעקרים ושוטפים את ה-TER כפי שתואר בעבר. השתמשו בהם כדי להכין את העכבר לניתוח.ראשית, הרדמו את בעל החיים בתוך תיבת השראה. לאחר וידוא שהעכבר נמצא תחת סדציה הולמה באמצעות צביטה של בהו (toe pinch), גלחו לחלוטין את הבטן ואת החזה של העכבר בעזרת מכונת גילוח חשמלית. הרדמו שוב את העכבר באמצעות isof fluorine ולאחר מכן העבירו אותו לצינור הרדמה בעל זרימה קבועה.הנח את העכבר במצב שכיבה על הגב (supine), כאשר ראשו פונה הרחקה ממך וזנבו פונה אליך. הדבק את כפותיו של העכבר לשולחן הניתוח המחומם. השתמש במחמם כדי לשמור על טמפרטורת גופו של בעל החיים המורדם בטווח צר של 37 פלוס או מינוס מעלה אחת של צלזיוס (°C).ניתן להשתמש בגשושית רקטלית לניטור הטמפרטורה; נגב את בטנו של העכבר עם סמרטוט אלכוהול כדי להסיר שיער גזור ולנקות את שטח הניתוח. מרח Betadine באמצעות סמרטוטים שלוש פעמים כדי לחטא את הבטן והחזה. הנח סדין סטרילי על בטנו של העכבר לצורך השתלת משדר תוך-peritoniאלי.התחילו בביצוע חתך אנכי בחלק המרכזי של העור מעל הבטן, באורך של כ-2.5 סנטימטרים, באמצעות סכין מנתחים ומספריים קהים. הפרדו בזהירות את העור מרקמות החיבור שמתחתיו. לאחר מכן, בצעו חתך אנכי בחלק המרכזי של הלינאה (linea alba), מעל הפריטוניאום, באורך של כ-1.5 סנטימטרים.בנוסף, צרו חור קטן בפריטונאום, ממש קראניאלית לחתך הפריטונאלי, שישמש כמוצא עבור מוליכים תת-עוריים. במהלך הניתוח, שמרו על אזור הניתוח לחות על ידי טפטוף מזדמן של סליין סטרילי על אתר הפעולה. הכניסו את ה-TER לחלל הפריטונאום הימני.הכנס את הפינצטה לחור, מעל ה-TER, ומשוך את שני המוליכים כלפי מעלה דרך חור המוליכים כך שיבלטו מהפריטונאום. השתמש בתפרי proline 6-0 רציפים כדי לסגור את החתך האנכי בקו האמצע של הפריטונאום באורך 1.5 סנטימטר. הנח את מוליכי ה-ECG בתצורת lead two.את האלקטרודה השלילית בעלת המעטפת השקופה הלבנה ימקמו באזור בית החזה הימני. ראשית, בצעו חתך עורי של 0.5 סנטימטר בחלקו העליון הימני של בית החזה של העכבר. לאחר מכן, השתמשו במספריים קהים כדי ליצור תעלה חזרה אל החתך הבטני.משכו את המוליך השלילי דרך התעלה והשתמשו בתפר prolene 6-0 כדי לעגן את המוליך לשריר החזיה. ודאו שהתפר נמצא מעל החלק החשוף של המוליך ויוצר מגע טוב בין תיל המתכת החשוף לשריר שמתחתיו. השתמשו בתפר שני, פרוקסימלית לתפר הקודם, כדי לקבע את המוליך לשריר.סגרו את החתך בעור באמצעות שתי תפרים מסוג proline. את האלקטרודה החיובית ממקמים בבטן השמאלית, מתחת לסרעפת השמאלית ומתחת ללב. חתך נוסף אינו נחוץ כאן כיוון שאתר השתלת האלקטרודה קרוב לחתך האנכי בקו האמצע.השתמשו בתפר פרולין 6-0 כדי לעגן את המוליך לשריר הבטן שמתחתיו, תוך וידוא מגע טוב עם הרקמה. לבסוף, סגרו את שריר הבטן ואת העור באופן רצופי באמצעות תפרי פרולין 6-0 בשכבות. סיפקו לעכבר את הטיפול הפוסט-אופרטיבי המתאים כפי שמתואר בטקסט הפרוטוקול שלנו.כעת נציג מספר תוצאות מייצגות של גל ECG תקין. ה-ECG התקין מעכבר מסוג wild type מראה בבירור גל P, המייצג דפולריזציה של העליות, ואחריו גל QRS, המייצג דפולריזציה של החדרים. שימו לב שגלי ה-P וה-QRS נבדלים מרעש הרקע הקטן, וכי כל גל P מקדימה כל גל QRS ביחס של אחד ለአחד.שימו לב גם לכך שהמרחק בין כל גל R, המכונה מרווח R ל-R, ובין כל גל P, המכונה אורך מחזור הסינוס, הוא סדיר, דבר המעיד על כך שהעכבר נמצא בקצב סינוס תקין. כך הצגנו בפניכם כיצד להשתיל ECG TER בעכבר להקלטת ECG ניידת. בעת ביצוע הליך זה, חשוב לנקות את ה-TER כראוי לפני ההחדרה, למקם את העליים במיקומים המתאימים, לסגור את הבטן לחלוטין, ולבסוף להעניק לעכבר אלגזיה מתאימה לאחר הפרוצדורה.זהו זה. תודה שצפיתם ובהצלחה בניסוייכם.

Research

JoVE Journal

Biology

ביולוגיה

אקו Transthoracic מציעה שיטה לא פולשנית להערכת תפקוד הלב בעכברים. שילוב של אולטראסאונד דופלר שיטות הדמיה ניתן להשתמש כדי להשיג מדידות ממדי של הלב ואת זרימת הדם intracardiac, אשר יחדיו מספקים הערכה של הסיסטולי והדיאסטולי לב וביצועים.

אקו Transthoracic ב עכברים

טכניקה כירורגית להשתלה של משדרי טלמטריה זמינים מסחרית המשמש למדידה רציפה של biopotential (חד להוביל ECG), קצב הלב, טמפרטורת הגוף הליבה בפעילות של תנועה בעכברים נע בחופשיות מוצג. המלצות פרוטוקולים לטיפול שלאחר הניתוח לבין הקלה על כאב, שיפור התאוששות, הרווחה שיעור ההישרדות מוצגים גם.

השרשה של משדרי Radiotelemetry מניבים נתוני אק&quot;ג, קצב הלב, טמפרטורת הגוף Core ו פעילות חינם נעים עכברי מעבדה

במהלך ניתוח איסכמיה/רפרפוזיה של שריר הלב בעכברים, מיקום נכון של הקשירה החוסמת מאושר בדרך כלל על ידי תצפית גלויה של חיוורון שריר הלב. כאן, שיטה לאישור אלקטרוקרדיוגרפי של איסכמיה ורפרפוזיה, להשלמת חיוורון שריר הלב שנצפה, מודגמת בעכברי C57Bl/6 זכרים.

אישור של שריר לב איסכמיה ופציעת reperfusion בעכברים באמצעות אלקטרוקרדיוגרפיה Pad Surface

הפרוטוקול הבא מתאר את המתודולוגיה לרכישה וניתוח תמונות אקו על מנת לקבל את נפח פרוזדורי שמאל (LAV), אב עורקי קוטר (Ao), ואת עורק ריאה (PA) בקוטר בעכברים. טכניקה זו היא הליך פולשני, שאינו מסוף המאפשר הערכה של תפקוד לב-ריאה.

אקו Murine של השמאל אטריום, אבי העורקים, ו עורק הריאה

מאמר זה מציג שיטה מדידות חוזרות של אוורור ופעילות שרירי הנשימה בתוך טרשת לרוחב amyotrophic מתנהג בחופשיות במודל של עכברים (ALS) לאורך התקדמות המחלה עם plethysmography הגוף כולו ואת electromyography באמצעות מכשיר טלמטריה מושתל.

מדידה חוזרת של פעילות שרירי הנשימה ואת אוורור בעכברי מודל של המחלה שרירית

כאן, אנו מציגים את פרוטוקול כדי להקליט את המוח ואת הלב אותות ביו בעכברים באמצעות וידאו בו זמנית, אלקטרואנצפלוגרם (EEG) ולאחר אלקטרוקרדיוגרם (א). אנו מתארים גם שיטות כדי לנתח את הקלטות EEG-א וכתוצאה מכך התקפים, כוח ספקטרלי EEG, תפקוד הלב של השתנות קצב הלב.

סימולטני וידאו-EEG-אק ג ניטור כדי לזהות Neurocardiac בתפקוד במודלים של העכבר של אפילפסיה

כאן, אנו מציגים פרוטוקול אלקטרוקרדיוגרפיה (ECG) פולשנית, הממוטב לעכברים לאחר הלידה המוקדמת, שאינו דורש שימוש בהרדמה.

אלקטרוקרדיוגרפיה לא פולשנית בעכבר פרילינטל

אנו מציגים פרוטוקול א-א קל, זול, מהיר ובמחיר סביר בעכברים קטנים, וניתן לבצעו ברגישות מוגברת. אנו מציעים שיטה זו כגישה הקרנה עבור לימוד סוכני תרופתי, שינויים גנטיים, מודלים מחלות בעכברים.

הקלטות אלקטרוג בעכברים מונערים באמצעות הפניה II

הברופלקס הוא מנגנון ויסות קצב הלב על ידי מערכת העצבים האוטונומית בתגובה לשינויים בלחץ הדם. אנו מתארים טכניקה כירורגית להשתלת משדרי טלמטריה למדידה רציפה וסימולטנית של אלקטרוקרדיוגרמה ולחץ דם בעכברים. זה יכול לקבוע רגישות ספונטנית baroreflex, סמן פרוגנוסטי חשוב למחלות לב וכלי דם.

השתלת משדרי אק"ג ולחץ דם טלמטריים משולבים לקביעת רגישות ספונטנית לברפלקס בעכברים מודעים

כאן אנו מציגים פרוטוקול שלב אחר שלב לגישה חצי אוטומטית לניתוח נתוני אלקטרוקרדיוגרפיה ארוכת טווח (ECG) עבור פרמטרים בסיסיים של א.ק.ג. והפרעות קצב נפוצות. הנתונים מתקבלים על ידי משדרי טלמטריה מושתלים בעכברים חיים וערים ומנותחים באמצעות פונמה ומודולי הניתוח שלה.

ניתוח הקלטות אלקטרוקרדיוגרפיה ארוכות טווח לאיתור הפרעות קצב בעכברים

אלקטרוקרדיוגרמה (ECG) היא משתנה המפתח להבנת אלקטרופיזיולוגיה של הלב. לפעילות גופנית יש השפעות מועילות, אך היא עלולה גם להזיק בהקשר של מחלות לב וכלי דם. כתב יד זה מספק שיטה לרישום אק"ג בזמן אמת במהלך פעילות גופנית, אשר יכול לשמש לחקר השפעותיו על אלקטרופיזיולוגיה של הלב בעכברים.

ניטור אק"ג בזמן אמת במהלך אימון הליכון בעכברים

למדו כיצד לבצע רישום א.ק.ג. טלמטרי ארוך טווח בעכברים לחקר הפרעות קצב לב ומוות לב פתאומי. השיטה כוללת השתלת טלמטר בבטן ומיקום אלקטרודות בחזה ובבטן.

רישום א.ק.ג. אמבולטורי ב עכברים

גלה סרטונים נוספים