ניקוד פשוט Composite הפנוטיפ מערכת להערכת מודלים של עכבר אטקסיה cerebellar

פיתחנו מערכת ניקוד פנוטיפ מורכבת להערכת חומרת המחלה והתקדמותה. במודלים של עכברים של אטקסיה מוחית, אנו מבצעים ארבע בדיקות שונות, מבחן המדף, הגפה האחורית, אחיזה, הליכה וקיפוזיס, תוך שימוש בסולם של אפס עד שלוש עבור כל בדיקה לציון משולב של אפס עד 12. עבור כל ארבעת המדדים, מבחן המדף בוצע למדידה ישירה של קואורדינציה.

אחיזת גפיים אחוריות היא סמן להתקדמות המחלה במספר מודלים של ניוון עצבי בעכברים. הליכה היא מדד לקואורדינציה ולתפקוד השרירים. קיפוזיס היא עקמומיות של עמוד השדרה באזור בית החזה הצווארי, הנפוצה במודלים של עכברים של מערכת מוטורית וניוון מוחי בעמוד השדרה המבצעים כל בדיקה ורושמים את הציון.

הסכום הממוצע של ארבעת הציונים או ציון הפנוטיפ המרוכב הממוצע מחושב עבור כל קבוצת עכברים ומשורטט. כאשר מיישמים פרוטוקול זה על מודלים שונים של עכברים, חשוב לנתח תחילה את ציוני המבחנים הבודדים כדי לקבוע את השילוב האידיאלי של ארבעת המדדים המתוארים. פרוטוקול ספציפי זה תוכנן להבחין בין אנשים מושפעים ולא מושפעים, תוך כימות התקדמות פנוטיפ המחלה במודלים של עכברים של אטקסיה מוחית בעמוד השדרה.

סוג שבע. היי, אני סטפני פור מהמעבדה של ד"ר גוון גארדן במחלקה לנוירולוגיה באוניברסיטת וושינגטון. היום נראה לכם שיטה פשוטה ורגישה להערכת חומרת המחלה במודלים של עכברים של אטקסיה מוחית.

אנו משתמשים בהליך זה במעבדה שלנו כדי לכמת הבדלים פנוטיפיים במודלים של עכברים של אטקסיה מוחית בעמוד השדרה סוג 7 או SCA 7, וכדי לעקוב אחר התקדמות הפנוטיפ SCA 7 לאורך זמן. אז בואו נתחיל. מבחן המדף הוא מדד ישיר לקואורדינציה, אשר נפגע במוח הקטן, אטקסיה והפרעות ניווניות רבות אחרות.

זה מודד את ההשוואה הישירה ביותר לסימנים אנושיים של אטקסיה מוחית כדי למנוע הטיה. הנסיין שמבצע את ההערכות לא צריך להיות בעל ידע על הגנוטיפ של החיה. במהלך הערכות, מדדים בודדים מקבלים ניקוד בסולם של אפס עד שלוש, כאשר אפס מייצג את היעדר הפנוטיפ, ושלוש מייצג את הביטוי החמור ביותר שלו.

התחל בהרמת העכבר מהכלוב והנחתו על אדן הכלוב. התבונן בעכבר כשהוא הולך לאורך אדן הכלוב ומוריד את עצמו לתוך הכלוב שלו. עכבר מסוג פרא ילך לאורך המדף מבלי לאבד את שיווי המשקל שלו ויוריד את עצמו בחזרה לכלוב בחינניות באמצעות כפותיו.

אופן פעולה זה מקבל ציון אפס. אם העכבר מאבד את כף רגלו בזמן שהוא הולך לאורך המדף, אך נראה מתואם, הוא מקבל ציון של 1. אם הוא לא משתמש ביעילות ברגליים האחוריות או לא יכול להוריד את עצמו בחינניות לתוך הכלוב.

הוא מקבל ציון של 2 אם הוא נופל מהמדף או כמעט כך תוך כדי הליכה או ניסיון להנמיך את עצמו או רועד ומסרב לזוז בכלל. למרות העידוד, הוא מקבל ציון של שלוש. בצע את בדיקת המדף שלוש פעמים כדי להבטיח מדידה מדויקת ולרשום את ציון בדיקת המדף.

עכשיו בואו נראה איך להבקיע אחיזת גפיים אחוריות. אחיזת גפיים אחוריות היא סמן להתקדמות המחלה במספר מודלים של עכברים של ניוון עצבי, כולל אטקסיות מסוימות במוח. כדי להתחיל בהערכה, אחוז בזנב ליד בסיסו והרם את האובייקטים הברורים ביותר מסביב.

התבונן בתנוחת הגפה האחורית למשך כ-10 שניות. אם הגפיים האחוריות מפוזרות באופן עקבי החוצה מהבטן, מוקצה לה ציון אפס. אם גפה אחורית אחת נסוגה לכיוון הבטן במשך יותר מ-50% מהזמן המושהה, היא מקבלת ציון של 1.

אם שתי הגפיים האחוריות נסוגות חלקית לכיוון הבטן במשך יותר מ-50% מהזמן המושהה, הוא מקבל ציון של 2. אם הגפיים האחוריות נסוגות לחלוטין ונוגעות בבטן במשך יותר מ-50% מהזמן המושהה, הוא מקבל ציון של שלוש. ערכו את המבחן שלוש פעמים ורשמו את ציון אחיזת הגפיים האחוריות.

עכשיו בואו נראה כיצד להעריך את ההליכה. מבחן ההליכה הוא מדד לקואורדינציה ולתפקוד השרירים. כדי להתחיל בבדיקה, הוציאו את העכבר מהכלוב שלו והניחו אותו על משטח ישר כשראשו פונה הרחק מהחוקר.

התבונן בעכבר מאחור כשהוא הולך. אם העכבר נע כרגיל כשמשקל גופו נתמך על כל הגפיים כשבטנו אינה נוגעת בקרקע, וכאשר שתי הגפיים האחוריות משתתפות באופן שווה, הוא מקבל ציון אפס. אם הוא מראה רעד או נראה שהוא צולע בזמן הליכה, או שרגליו מופנות מעט הרחק מגופו, הוא מקבל ציון של 1.

אם הוא מראה רעד חמור, צליעה חמורה, אגן מונמך או כפות הרגליים מצביעות הרחק מהגוף בצורה חמורה יותר במהלך התנועה, הוא מוקצה. שניים. אם העכבר מתקשה לנוע קדימה וגורר את בטנו לאורך הקרקע, הוא מקבל שלוש. התבונן בעכבר GA שלוש פעמים ורשום ציון החלקה.

עכשיו בואו נראה. בדיקת קיפוזיס קיפוזיס היא עקמומיות גבית אופיינית של עמוד השדרה. זהו ביטוי שכיח של מחלות נוירודגנרטיביות המערבות מערכות מוטוריות, כולל אטקסיות מוח בעמוד השדרה במודלים של עכברים.

זה נגרם על ידי אובדן טונוס שרירים בשרירי עמוד השדרה משני לניוון עצבי. כדי להתחיל, הסר את העכבר מהכלוב שלו והנח אותו על משטח ישר. התבוננו בו כשהוא הולך.

אם העכבר מסוגל ליישר בקלות את עמוד השדרה שלו בזמן שהוא הולך ואין לו קיפוזיס מתמשך, הוא מקבל ציון של אפס. אם העכבר מפגין קיפוזיס קל אך מסוגל ליישר את עמוד השדרה שלו, הוא מקבל ציון של 1. אם הוא לא מסוגל להתיישר, הוא לגמרי ושומר על קיפוזיס מתמשך, אך קל, הוא מקבל ציון של 2.

אם העכבר שומר על קיפוזיס בולט בזמן שהוא הולך או בזמן שהוא יושב, מוקצה לו ציון של שלוש. שימו לב לציון הקיפוזיס של העכבר שלוש פעמים. החזירו את העכבר לכלוב שלו ורשמו את ציון הקיפוזיס שלו.

להלן גרף מייצג של הערכת פנוטיפ מורכבת של ספינו טרנסגני, אטקסיה מוחית מסוג שבע הידוע בשם Flocked SCA 7 92 Q.הציונים של ארבעת המדדים סוכמו עבור כל עכבר, והציון המרוכב הממוצע חושב עבור שני הגנוטיפים של כל גיל. כאן f Fluxed, עכברי SCA 7 92 Q מציגים פנוטיפ SCA 7 מתקדם השונה באופן משמעותי מחברי המלטה שאינם טרנסגניים. חשוב לציין, ציון הפנוטיפ העולה לאורך זמן עולה בקנה אחד עם האופי המתקדם של המחלה האנושית.

זה עתה הראינו לך כיצד להשתמש במערכת ניקוד פנוטיפ מורכבת כדי להעריך את חומרת המחלה והתקדמותה במודלים של עכברים של אטקסיה מוחית. כאשר מבצעים הליך זה, חשוב לזכור שהשמנת יתר היא גורם מבלבל בכל ארבעת המבחנים המתוארים. ניתן לנתח את התוצאות של בדיקות בודדות בנפרד כדי לקבוע תחילה את השילוב האידיאלי שלהן במערכת ניקוד פנוטיפ מורכבת, המתאימה ביותר למודל העכבר שלך.

אז זהו. תודה על הצפייה ובהצלחה בניסויים שלך.