Name: ב כימות באתרו של המיסה הלבלב בטא תא עכברים (וידאו) | JoVE Journal
Uploaded: 2010-06-07T17:00:00.000+00:00
Duration: 9 min 50 s
Description: למד כיצד לבצע כימות באתרו של תאי בטא בלבלב עכברים באמצעות מיקרוסקופיה פלואורסצנטית. פרוטוקול זה מאפשר ניתוח מבנה האיילטים ותפקודם במחקר סוכרת.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

playerTrialDesktop

המחקר נתמך על ידי ארצות הברית השירות לבריאות הציבור של גרנט DK-081527, 072473 ו DK-DK-20595 של אוניברסיטת שיקגו סוכרת מחקר מרכז הדרכה (Core מודלים בבעלי חיים), ואת מתנת קרן משפחת קובלר.

חלק 1: הכנת דוגמאות <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> המקום עכבר תחת מיקרוסקופ לנתיחה, להסיר את הלבלב כולו יחד עם התריסריון והטחול עדיין מחוברת, והמקום איברים בשקופית זכוכית טרום שקל. הסר את התריסריון על ידי חיתוך הרקמה החיבורית שלה בצד שבו הוא חייב הלבלב. גזור להסיר את הטחול ואת עודף שומן על הלבלב עד הלבלב הוא מבודד לחלוטין בשקופית. (שומן הלבלב הוא להבחין לפי הצבע הלבן שלה, להבדיל מהצבע מעט כהה לשיזוף של רקמת לבלב). </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> מניחים coverslip (זכוכית לכסות גדול 50x75mm; תקן זכוכית לכסות 25x75mm) על הלבלב, כך שהוא מכוסה לחלוטין. השתמש במשקל (למשל ספר כבד) לשטח את הלבלב בין שקופיות ואת העטיפה. בהתאם למשקל, משטחת את הלבלב לוקח בערך חמש דקות. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> תוריד את המשקל. אם הלבלב היטב שטוח מול המגלשה, למקם אותו paraformaldehyde 4% (PFA) ב 4 ° C למשך הלילה. בבוקר, להסיר את coverslips היטב לחשוף את הלבלב כולו PFA במהלך היום (6-8 שעות). אם הלבלב אינו היטב קבוע, לאפשר לו להישאר PFA יותר, ואולי גם לילה. העברת שקופיות המיכל עם 1% Triton x-100 ב פוספט בופר סליין (PBS) לילה. למחרת, העברת שקופיות מכולה של סוכרוז רווי במשך 1-2 ימים. ואז להעביר את השקופיות למיכל של גליצרול 100% עד הרקמה אינה מסומנת, אשר מאפשר לפתרון אופטימלי של אותות ניאון, ניקוי הרקמה לוקח כ 1-3 ימים. (אותות ניאון עלולה להימשך שבועות ואף חודשים, אך הדמיה יש לבצע מיד לאחר הרקמה מנוקה לפתרון האופטימלי.) </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> אחסן את הלבלב באזור חשוך וקריר על מנת לשמר את האיבר ואת אותות ניאון שלה. </li></ol> חלק 2: הדמיה לכימות באזור תא בטא בלבלב שלם <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> באמצעות מלקחיים או כפות ידיים בכפפות, לקחת את השקופית מתוך המיכל עם גליצרול 100%. הכן את השקופית הדמיה על ידי מנגב את עודפי גליצרול בלעדי ניקוי האחורי של מכסה זכוכית עם אתנול. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> פתח את תוכנת StereoInvestigator (MicroBrightField, Williston, VT) ובחר את העדשה אובייקטיבי 2x לעכברים הדמיה pancreata מעל גיל 3 שבועות בשקופיות זכוכית גדול, או את העדשה אובייקטיבי 10x עבור עכברים הדמיה pancreata צעיר מכפי 3 שבועות לחוץ בין שני 25mm coverslips. דמיינו את התמונה על ידי קביעת זה לחיות תמונה (Image → תמונה חיה). בחר זמן חשיפה כי מראה בבירור את ה-GFP-tagged בטא תאים. (Underexposing את התמונה כולל איים קטנים בטא תאים, בעוד overexposing את התמונה יוצרת אותות שווא נוספות.) </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> לחץ בכל מקום על המסך כדי להקים נקודת התייחסות ולהמשיך לצייר קו מתאר סביב הלבלב כולו. ליזום את תהליך Slice וירטואלית (תמונה → רוכשת Slice וירטואלי). קבע ובחר את הטובים ביותר, כלומר משטח הפוקוס, את המטוס עם המספר הגבוה ביותר של איים גלוי ממוקד בטא תאים על ציר ה-Z על ידי גלילה את כפתור המיקוד. נבחר פעם אחת, StereoInvestigator באופן אוטומטי לוכדת את התמונה המוצגת על המסך. עם הבמה ממונע, התכונה Slice וירטואלי ברצף לוכדת כל פאנל אופטי כתמונת נפרדים בתוך קונטור סגורים (איור 1A) ולאחר מכן משלבת את כולם כמו תמונה אחת הממוזגת (איור 1B). הדמיה Slice Virtual משתמש תצורה epifluorescent כלומר, widefield מסננים אשר מאפשרת המצלמה כדי ללכוד את כל אותות נוכח עומק מסוים, כולל אלה לא לגמרי בפוקוס, כך פורסים וירטואלי הסופית היא תמונה משולבת דו מימדי שאינו מקסימלית הקרנת שחזור תלת ממדי של הלבלב כולו. סריקה ממוצע וירטואלי זמן Slice הוא 30 דקות לפי המדגם, אך יכול לקחת עד שעה עבור הלבלב גדול. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> לאחר שמירת התמונה, להתחיל את הניתוח שלה על ידי פתיחת התמונה עם ImageJ. כאשר התמונה מסיים טעינה מופיע על המסך, לפתוח ולהפעיל את Slice וירטואלי ניתוח מאקרו ( <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/1970/Supplementary_material%201.pdf">חומר משלים 1</a> ). </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> עקוב אחר צעד אחר צעד ההוראות שסופקו על ידי המאקרו. סלקו חפצים לא רצויים שנוצרו על ידי פיזור אור עם "שרביט קסמים" ו "בחר שטח" כלים. בדוק ולחסר רקע מיותרים מהתמונה. קבע את הרדיוס של איון הגדול עם הכלי "הקו", כך תכונה שלאחר מכן כדור הרולינג יכול למעשה להסיר אור autofluorescence והתפזרו. מבחן ולבחור את המתאימים ביותר "סף נמוך" כדי ללכוד את אותות ניאון של איונים קטנים ואשכולות של תאים בטא (&lt;3x10 4 מיקרומטר 2). מבחן ולבחור את המתאימים ביותר "סף גבוה" כדי ללכוד את אותות ניאון של איים. הפעל את כימות פורסים את הוירטואלי, אשר ימדודלייצר רשימה של אזור עוטף איון, מעגליות, ואת קוטר של Feret. </li></ol><img src="/files/ftp_upload/1970/1970Fig1A.jpg" alt="איור 1א" data-altupdatedat="1787634011000" data-alt="דמות 1a"> איור 1 א תמונה וירטואלית Slice ניתוח של חלוקת כל בטא תאים בלבלב מבוגר ללא פגע תמונות של לוחות אופטי יחיד של הלבלב עכבר זכר ב 10-wk נלקח תחת מטרה 2x. התמונות כוללות את כל הפצה של איים, אפילו אשכולות קטנים של תאים בטא (&lt;10 תאים). <img src="/files/ftp_upload/1970/1970Fig1B.jpg" alt="איור 1ב" data-altupdatedat="1787634011000" data-alt="דמות 1b"> איור 1B תמונה וירטואלית Slice ניתוח של חלוקת כל בטא תאים בלבלב מבוגר ללא פגע פרוסת וירטואלית מאוחד עם הלבלב הגבי מימין הלבלב הגחון בצד שמאל. בר סולם הוא 5 מ"מ. נציג תוצאות הכנה מיומן של הלבלב הדמיה Slice וירטואלי תאפשר כימות יעיל של כל ה-GFP-tagged בתאי בטא בלבלב שלם כתמונת Slice וירטואלי עם איים ברורה וייחודית. פורסים מוצלח הדמיה וירטואלית של הלבלב שלם באתרו מספק את האמצעים לבחון ולכמת את בטא תאים, לא רק בתחום הפרט איון מוחלט, אלא גם גודל ההפצה איון, ניתוח אזורית, דפוסי צמיחה גם כן. בעוד ImageJ שומרת את היכולת לזהות את כל בטא תאים בו זמנית בניתוח תמונות Slice וירטואלי, הוא יכול גם לשלוט בטא תאים לכמת ידי הגבלת ניתוח בגדלים מסוימים איון (לפי אזור או קוטר), או לפי מיקום. ניתוח סטנדרטי כולל חפצים כגון פסולת קטן יותר מאשר תא אחד בודד בטא (&lt;170 מיקרומטר 2) ורשומות האזור, היקף (המרחק סביב שטח), המעגליות (מידה של עגלגלות, שבה 1.0 מייצגת עיגול מושלם), ו בקוטר של Feret (המרחק הארוך ביותר בתוך שטח) עבור איון כל זוהה. ניתוח Slice וירטואלי הוא מסוגל לשפר את התמונות פרוסה וירטואלית על ידי העסקת פילוח פרשת המים, אשר מבדיל ומפריד איים חופפים לתוך איים בודדים על פי צורתם. ניתוח נוסף מייצרת סדרה של תמונות מפורטות, זה כולל מסכות של התמונות הן תחת עוצמת נמוך וגבוה (איור 1C), קווי המתאר של כל האיונים חזקה, אשר כל מנה בנפרד בטבלה של מידע המתאים (איור . 1D), וכן את התמונה המקורית Slice וירטואליים (איור 1B). שים לב, הטיה טכני פוטנציאל בבחירת ערכי הסף יכול להטות כימות של איים על ידי כולל אור מיותר סביב מבנים גדולים, או על ידי הקטנת המספר הכולל של איים, אותות חלש במיוחד של חלקיקים קטנים. <img src="/files/ftp_upload/1970/1970Fig1C.jpg" alt="איור 1c" data-altupdatedat="1787634011000" data-alt="דמות 1c"> איור 1C תמונה וירטואלית Slice ניתוח של חלוקת כל בטא תאים בלבלב מבוגר שלם מסכה של חלקיקים ניאון פרוסה הווירטואלי. קודי צבע: [1] כחול: הקרינה בעצימות נמוכה, [2] ירוק: עוצמת הקרינה ביניים, ו [3] אדום: הקרינה בעוצמה גבוהה. <img src="/files/ftp_upload/1970/1970Fig1D.jpg" alt="איור 1D" data-altupdatedat="1787634011000" data-alt="דמות 1d"> איור תמונה 1D וירטואלי Slice ניתוח של חלוקת כל בטא תאים בלבלב מבוגר ללא פגע כימות איים בודדים / אשכולות של בטא תאים. שים לב שכל איון (כולל קבוצות קטנות של תאים בטא) ממוספר, עם מידע מפורט שלה בתרשים המקביל. ארבעה פרמטרים נלקחו כל מבנה: (1) אזור, (2) המערכת; (3) המעגליות: מידה של עגלגלות שבו מספר 1.0 מייצגת עיגול מושלם; ו (4) בקוטר של Feret: המרחק הארוך ביותר בתחום. שימו לב # 706 מציג את הרזולוציה מנתח עם שטח של רק בטא תאים בודדים. פילוח פרשת המים מזהה קבוצות של איים סמוכים, כמו זה המוצג, הולם מבדיל אותם איים נפרדים (איים 1554, 1555 ו 1556). <img src="/files/ftp_upload/1970/1970Fig1E.jpg" alt="איור 1e" data-altupdatedat="1787634011000" data-alt="דמות 1e"> איור 1E תמונה וירטואלית Slice ניתוח של חלוקת כל בטא תאים בלבלב מבוגר ללא פגע 3 מימדי המגרש של הניתוח פרוסה וירטואלית, עם צירים של האזור, היקף בקוטר של Feret. כל נקודה מייצגת איון.

<ol><li>Miller, K., Kim, A., Kilimnik, G., Moka, U., Jo, J., Periwal, V., Hara, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Islet+formation+during+the+neonatal+development+in+mice%5BTitle%5D)+AND+%22PloS+One%22%5BJournal%5D)">Islet formation during the neonatal development in mice.</a> PloS One. 4, E7739-E7739 (2009).</li>
<li>Kilimnik, G., Kim, A., Jo, J., Miller, K., Hara, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Quantification+of+pancreatic+islet+distribution+in+situ+in+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Am+J+Physiol+Endocrinol+Metab%22%5BJournal%5D)">Quantification of pancreatic islet distribution in situ in mice.</a> Am J Physiol Endocrinol Metab. 297, E1331-E1338 (2009).</li>
<li>Hara, M., Wang, X., Kawamura, T., Bindokas, V. P., Dizon, R. F., Alcoser, S. Y., Magnuson, M. A., Bell, G. I. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Transgenic+mice+with+green+fluorescent+protein-labeled+pancreatic+beta+-cells%5BTitle%5D)+AND+%22Am+J+Physiol+Endocrinol+Metab%22%5BJournal%5D)">Transgenic mice with green fluorescent protein-labeled pancreatic beta -cells.</a> Am J Physiol Endocrinol Metab. 284, E177-E183 (2003).</li>
<li>Hara, M., Dizon, R. F., Glick, B. S., Lee, C. S., Kaestner, K. H., Piston, D. W., Bindokas, V. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Imaging+pancreatic+beta-cells+in+the+intact+pancreas%5BTitle%5D)+AND+%22Am+J+Physiol+Endocrinol+Metab%22%5BJournal%5D)">Imaging pancreatic beta-cells in the intact pancreas.</a> Am J Physiol Endocrinol Metab. 290, E1041-E1047 (2006).</li>
</ol>

אין ניגודי אינטרסים הכריז.

ניתוח של תמונות Slice וירטואלי של איים וביתא תאים בלבלב אשכולות שלמים מספק תצוגה רחב היקף של חלוקת כל האיונים. התפתחויות ושינויים בחלוקת איון מוחלט לאורך זמן ולכן יכול להיות למד בהשוואה. כזה למשל הוא הפגינו הניתוח שלנו של היווצרות הלבלב איון (1). ניתוח מקיף של pancreata עכברים בילוד בנקודות זמן שונות (P1-p21) הוכיחה כי איים נוצרות על ידי ביקוע. בעוד בטא התפשטות תאים מתאים פונקציה צפיפות ההסתברות lognormal בעכברים מ P1-P10, הפצה איון ואילך P12 סוטה שמאלה מן הדפוס lognormal, דבר המצ...

<table><tbody><tr><td>פינצטה</td><td>Miltex Inc.</td><td></td><td></td></tr><tr><td>מספריים</td><td>F.S.T.</td><td>14001-13</td><td>01n2</td></tr><tr><td>מספריים</td><td>F.S.T.</td><td>14072-10</td><td>02s5</td></tr><tr><td>זכוכית כיסוי גדולה</td><td>Electron Microscopy Sciences</td><td>71862-01</td><td>75x51x1.2mm</td></tr><tr><td>זכוכית כיסוי גדולה</td><td>Ted Pella, Inc.</td><td>260462</td><td>50x75mm</td></tr><tr><td>זכוכית כיסוי</td><td>Fisher Scientific</td><td>12-550-15</td><td>25x75x1.0mm</td></tr><tr><td>זכוכית כיסוי</td><td>Fisher Scientific</td><td>12-458-5M</td><td>75x25mm</td></tr><tr><td>זכוכית כיסוי</td><td>Erie Scientific</td><td></td><td>25mm circle</td></tr><tr><td>מיקרוסקופ פלואורסצנטי</td><td>Olympus Corporation</td><td></td><td></td></tr><tr><td>מיקרוסקופ לנתיחה</td><td>Olympus Corporation</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Stereo Investigator</td><td>MBF Bioscience</td><td></td><td></td></tr><tr><td>עכברי MIP-GFP</td><td>Jackson Laboratory</td><td></td><td></td></tr></tbody></table>

ב כימות באתרו של המיסה הלבלב בטא תא עכברים

In situ Quantification of Pancreatic Beta-cell Mass in Mice

האיתור שינויים של אוכלוסיות תאים ספציפיים בבריאות ובחולי היא מטרה חשובה של מחקר ביו. תהליך שגשוג התא בטא בלבלב ניטור צמיחה איון הוא מאתגר במיוחד. פיתחנו שיטה כדי ללכוד את חלוקת בטא בלבלב תאים שלמים של העכברים הטרנסגניים עם הקרינה-tagged בטא תאים עם מאקרו נכתב עבור ImageJ (rsb.info.nih.gov / ij /). בעקבות לנתיחה הלבלב וניקוי רקמות הלבלב, כולו נתפס כמו פרוסת וירטואלי, שלאחריו GFP-tagged בטא התאים נבדקות. הניתוח כולל את כימות המספר הכולל תא בטא, איון אזור והפצה גודל תוך התייחסות לפרמטרים מיקומים ספציפיים עבור כל איון עבור אשכולות קטנים של תאים בטא. הפצה כולו של איונים ניתן להתוות בשלושה ממדים, וגם את המידע על התפלגות גודל וצורה של איון כל מאפשר השוואה כמותית ואיכותית של שינויים באזור בטא תא הכוללת במבט אחד.

פרוטוקול הבא מתאר את התהליך של דיסקציה הלבלב הדמיה פרוסה וירטואלית, ועל כימות הבאים של כל ה-GFP-tagged בתאי בטא בלבלב כולו.

מעקב אחר שינויים באוכלוסיות תאים ספציפיות במצב בריאות ומחלה הוא יעד חשוב של מחקר ביו-רפואי. תהליך הניטור של הלבלב...

הבנת השגשוג של תאי בטא בלבלב וצמיחת האיליות (eyelets) היא היבט חשוב במחקר על סוכרת. במאמר וידאו זה, מוצגים דימות ואנליזה של לבלב עכבר שלם באמצעות עכברים עם תאי בטא המבטאים GFP; הלבלב מוסר מעכבר שהורדם ומושטח על שקף זכוכית. רקמת הלבלב מותקשת על ידי טיפול רצופי של פאראפורמאלדהיד, Triton X, סוכרוז וגליצרין תוך שימוש במיקרוסקופיה פלואורסצנטית.נדגשת תמונה או פרוסה וירטואלית של הלבלב. לאחר מכן, התמונה מנותחת כדי לקבוע את מספרם, גודלם והתפלגותם של האיים בלבלב. שלום, אני German Kilimnik מהמעבדה של Dr.RA במחלקה לרפואה באוניברסיטת שיקגו.אני אברהם קים, גם אני ממעבדת HAR. היום נדגים לכם הליך לצילום וכמותיות של כל תאי הבטא בלבלב של עכבר. אנו משתמשים בהליך זה במעבדה שלנו כדי לחקור את מבנה, התפתחות והיווצרות האי-לבלב של העכבר.אם כן, נתחיל. התחילו את הפרוצדורה על ידי מריחת 95% ethanol על עורו של העכבר כדי למנוע זיהום מפרווה. לאחר מכן, הרימו את עור העכבר בצדו הבטני ובצעו חתך ליד הבטן התחתונה.בצעו חתך משני צידי הגוף בצורת U. כדי לחשוף את האיברים, הניחו את העכבר שהורדם ובעל תאי בטא המסומנים ב-GFP תחת מיקרוסקופ דיסקציה. בעזרת פינצטה, הוציאו את הלבלב כולו יחד עם התריסריון והטחול המחוברים אליו, והניחו את האיברים על זכוכית מיקרוסקופ. לאחר מכן, הסירו את התריסריון על ידי חיתוך הרקמה המחברת לאורך הצד שבו הו

in-situ-quantification-of-pancreatic-beta-cell-mass-in-mice

Research

JoVE Journal

Biology

ביולוגיה

מנסה לאמוד בתפקוד β-תאי מבחנה באמצעות עכבר איים מבודדים לנגרהנס הוא מרכיב חשוב במחקר של הפתופיזיולוגיה סוכרת ותרופות. בעוד רבים יישומים במורד הזרם זמינים, פרוטוקול זה מתאר במפורש המדידה של monophosphate אדנוזין המחזורי תאיים (cAMP) כפרמטר חיוני קביעת פונקצית β-תאים.

שיטה לבידוד עכבר הלבלב איילט וקביעת תאית cAMP

מטרת פרוטוקול זה היא ליישם הדמיית תהודה מגנטית משופרת בניגודיות דינמית (DCE-MRI) עבור השתלות גידול לבלב אורתוטופי בעכברים. DCE-MRI היא שיטה לא פולשנית לניתוח מיקרו-כלי דם ברקמת מטרה, ושימושית להערכת תגובת כלי הדם בגידול לאחר טיפול חדשני.

הדמיית תהודה מגנטית משופרת ניגודיות דינמית של דגם orthotopic סרטן לבלב עכבר

כאן, אנו מציגים מתודולוגיה ליצירה וניהול של מיקרוספירות פולי (חומצה לקטית-קו-גליקולית) (PLGA) טעונות עניין לאיי עכבר שלמים בתרבית עם ניתוח אימונופלואורסצנטי לאחר מכן של התפשטות β תאים. שיטה זו מתאימה לקביעת היעילות של מיטוגנים β תאים מועמדים.

מנהל מתמשך של mitogens β-cell כדי איי עכבר Intact<em&gt; Ex Vivo</em&gt; שימוש פוליפוני מתכלה (לקטית-שיתוף גליקולית וחומצה) מיקרוסכמות

אנו מתארים פרוטוקול עבור אולטרסאונד השרשה המודרכת של הלבלב הנגזר מוראן של דוטל לבלב שורות תאים ישירות לתוך אתר הגידול הטבעי. גישה זו הביא לגידולים בלבלב לגילוי על ידי סריקת אולטרסאונד בתוך 2-4 שבועות של הזרקה, והקטינה באופן משמעותי את הגידול בפרופורציה של תאים בקיר הצפק לעומת השרשה כירורגית אורתודפית.

אולטרה סאונד-הדרכה אורתודפית של הלבלב מורלין אדנוקרצינומה

פרוטוקול זה מתאר את הדור כירורגי של גידולים הלבלב אורתודפית ואת העיכול המהיר של גידולים מבודדים מבודד מורטין הלבלב. לאחר העיכול, אוכלוסיות קיימא תאים החיסונית יכול לשמש ניתוח נוסף במורד הזרם, כולל לשעבר גירוי vivo של תאים T לאיתור ציטוקינים תאיים ידי הזרימה cy, try.

הדור של הלבלב אורתוטואט גידולים ואפיון Vivo Ex של תאים הסתננות של הגידול תא T

מחקר זה מציג את היישום של פרוסות רקמת לבלב חי לחקר פיזיולוגיה של איון ואינטראקציות תא חיסוני איון.

התבוננות בתפקוד אי ואינטראקציות תא חיסוני איון בפרוסות רקמת הלבלב חי

פרוטוקול זה מתאר שתי שיטות לניתוח כמותי של מיטופגיה בתאי β של הלבלב: הראשונה, שילוב של צבעים ספציפיים למיטוכונדריה החדירים, ושנית, כתב מיטופגיה מקודד גנטית. שתי טכניקות אלה משלימות זו את זו וניתנות לפריסה על בסיס צרכים ספציפיים, ומאפשרות גמישות ודיוק בטיפול כמותי בבקרת איכות מיטוכונדריאלית.

גישות משלימות לחקירת שטף מיטופגיה בתאי β הלבלב

מתן תרופות תוך צפקיות הוא גישה לא פולשנית בטוחה ויעילה לגרימת פגיעה בלבלב. מחקר זה השווה חמישה פרוטוקולים שונים של הזרקה תוך צפקית בעכברים כדי לגרום לדרגות שונות של פגיעה בלבלב וקבע מודל של פגיעה חמורה בלבלב כדי לחקור את השינויים הפתולוגיים ואת אסטרטגיות הטיפול בדלקת לבלב חריפה חמורה (SAP).

הכנת מודל עכברים של דלקת לבלב חריפה חמורה באמצעות שילוב של Caerulein ו Lipopolysaccharide הזרקה intraperitoneal

אנו מתארים שיטה לניצול לימפוציטים חודרים לגידול (TILs) מעכברים באמצעות ציטומטריית זרימה להעברת תאים מאמצים. פרוטוקול זה נועד לאמת את הציטוטוקסיות הספציפית של TIL כנגד גידולים במודל עכברי סרטן הלבלב סינגני, ולספק תובנות לגבי התפתחות טיפולים תאיים מאמצים לסרטן הלבלב.

בידוד מבוסס זרימה ציטומטריה והערכה טיפולית של לימפוציטים חודרים לגידול במודל עכבר של סרטן הלבלב

מחקר זה משתמש בסמנים מבוססי פלואורסצנטיות מרובי כתמים של מוות תאים ואפופטוזיס בשילוב עם מיקרוסקופיה קונפוקלית כדי להעריך אפופטוזיס המושרה על ידי ציטוקינים ומוות ספציפי לתאי β באיי הלבלב. הוא חושף שינויים מרחביים וזמניים במוות תאים ואפופטוזיס בתגובה לגירויים חוץ-תאיים.

טיפול באי לבלב מבודד ומדידת אפופטוזיס

אנו מספקים פרוטוקול זעיר-פולשני להשתלה תוך-שרירית של איי תאי גזע לבלב שמקורם בתאי גזע אנושיים לעכברים חסרי חיסון, לצורך השתלה ב-in vivo וניתוח בהמשך הזרם.

השתלה תוך-שרירית של תאי גזע פלוריפוטנטיים במקור תאי גזע בלבלב בעכברים

למד כיצד לבצע כימות באתרו של תאי בטא בלבלב עכברים באמצעות מיקרוסקופיה פלואורסצנטית. פרוטוקול זה מאפשר ניתוח מבנה האיילטים ותפקודם במחקר סוכרת.

ב כימות באתרו של המיסה הלבלב בטא תא עכברים

גלה סרטונים נוספים