JoVE Encyclopedia of Experiments
ביולוגיה
0 צפיות • 2:33 דק' • April 30th, 2023
- ראשית, להשיג מספר מוגדר של דרוזופילה בוגרת. תא הבדיקה לבדיקת הטיפוס מורכב משני בקבוקונים המודבקים זה לזה. אחד בקבוקונים אלה צריך להיות מסומן עם קו.
ללא הרדמה של פחמן דו חמצני, שעלולה לפגוע בהתנהגות הטיפוס, העבירו מספר מוגדר של זבובים לתא הבדיקה. אפשרו לזבובים להתאושש לפרק זמן שנקבע מראש. כאשר הצד המסומן של התא כלפי מטה, הקש בחוזקה על התא על משטח עכבר המונח על משטח מוצק. זה יאלץ את הזבובים לתחתית החדר. מבחן הטיפוס מנצל את הנטייה הטבעית של דרוזופילה לטפס כלפי מעלה כנגד כוח הכבידה, התנהגות הנקראת גיאוטקסים שליליים.
במהלך הניסוי, הזבובים לא צריכים להיות חשופים לאור שמש ישיר מכיוון שהזבובים עשויים להציג התנהגות פוטוטקסית, או תנועה בתגובה לגירוי אור. רשום את מספר הזבובים שמגיעים לקו או עוברים אותו. לאחר מכן השג את שיעור המעבר באחוזים על ידי חלוקת מספר זה במספר הכולל של הזבובים שנבדקו. אפשר לזבובים להתאושש לפני שתחזור על הניסיון. בדוגמה, נראה בדיקת טיפוס זבובים המשמשת להערכת תפקוד מוטורי של דרוזופילה לאחר מוטגנזה כימית.
- בתור התחלה, אספו זבובים הומוזיגוטיים מקווים השייכים לאוסף המוטנטים של דרוזופילה הממופים לכרומוזום השני. הפכו את הזבובים בני 10 עד 12 ימים לתא בדיקה ללא הרדמה קו אחר קו ואפשרו להם להתאושש במשך חמש דקות.
כאשר הקו של חמישה סנטימטרים מסומן בצד כלפי מטה, הקש בכוח על התא שלוש פעמים על משטח עכבר המונח על משטח מוצק, כך שכל הזבובים יתחילו את הבדיקה בתחתית. צפו בתנועת הזבוב במשך 10 שניות. רשום את מספר הזבובים שמגיעים או עוברים את קו חמשת הסנטימטרים בזמן זה, כמו גם את המספר הכולל של הזבובים שנבדקו. המתן דקה אחת לפני תחילת תקופת ניסיון שנייה. חזור על לפחות שלושה עותקים משוכפלים של גירסת ניסיון בכל שורה.