דרוזופילה דיסקציה דמיונית של הזחל: שיטה להתבוננות בהתפתחות אפיתליה

- כדי להתחיל את הדיסקציה, השתמש בזוג מלקחיים אחד כדי לתפוס את גוף הזחל באמצע, ובזוג שני כדי לקרוע את הזחל לשניים. לאחר מכן צבטו את וו הפה בקצה הקדמי תוך החזקת הגוף בצד האחורי. לאחר מכן, לדחוף את המלקחיים מחזיק את הפה בתוך הגוף. השתמש במלקחיים האחוריים כדי לקפל את דופן הגוף מבפנים החוצה.

בהכנה זו, בלוטות הרוק והמעיים ניתן לזהות בקלות ולהסיר כדי לחשוף את המוח ואת הדיסקים הדמיוניים. ניתן לראות את דיסקיות האנטנה, העין, הרגל, הכנף וההלטר. לאחר התיקון, העבר את הכנת הזחל לשקופית עם אמצעי הרכבה שם ניתן לנתח את הדיסקים עוד יותר. בפרוטוקול לדוגמה, נראה כיצד לנתח דיסקים דמיוניים כנף באמצעות הכנה זו לזחל.

- כדי להתחיל, השתמשו במקל עץ או במלקחיים קהים כדי להעביר זחלי כוכב שלישי נודדים לתוך צלחת פטרי עם PBS. לאחר מכן גנוטיפ אותם תחת אור פלואורסצנטי כדי לזהות את הסמנים הפלואורסצנטיים המתאימים לזחלי פסיפס. לפני שתמשיך, לשטוף את הזחלים עם PBS. לאחר מכן, תחת מיקרוסקופ דיסקציה, השתמשו בשני זוגות מלקחיים כדי לצבוט את מרכז הזחל, ולקרוע את הגוף לשניים. לאחר מכן, צבטו את ווי הפה תוך כדי דחיפת הפה לכיוון הגוף כדי להפוך את הגוף מבפנים החוצה. לאחר מכן להסיר חומרים מיותרים, כגון בלוטות הרוק וגופי שומן. הזחלים מוכנים כעת לקיבוע והכתמת נוגדנים, המפורטים בפרוטוקול הטקסט.

מעבירים את תכשירי הרקמה המוכתמת לשקופית מיקרוסקופ באמצעות פיפטת העברת פלסטיק של שני מיליליטר. לאחר מכן באמצעות מלקחיים, להעביר זחל בודד לתוך טיפות של תווך הרכבה על שקופיות מיקרוסקופ. עכשיו באמצעות מלקחיים, לבודד את הדיסקים הדמיוניים. התחל עם החזקת קצה הרקמה המנותחת ומשיכת דיסקי אנטנות המוח והעין עם המלקחיים האחרים. שמור על המוח מוכן לשימוש.

כעת אתרו את הדיסקים הדמיוניים של הכנף. הדיסקים הדמיוניים של הכנף דבוקים לצד הצידי של הרקמה המנותחת. לאחר מכן, לאבטח את הרקמה עם מלקחיים אחד, בעדינות לגרד את דיסקיות הכנף. לאחר מכן מקמו את המוחות ליד דיסקיות הכנף כדי להגן עליהן מפני ריסוק על ידי הכיסוי. כעת כסו בעדינות את המבנים בחלקת כיסוי, ואטמו את הכיסוי בלק. אחסנו את השקופית בטמפרטורה של 4 מעלות צלזיוס.