דיסקציה של צינורית מלפיגית מזבוב בוגר: בידוד איבר אוסמווסתי ומפריש

- התחילו עם זבוב בוגר מורדם בכלי ניתוח. החזיקו את הזבוב ליד בית החזה בעזרת מלקחיים ופתחו את הקצה האחורי של הבטן באמצעות זוג מלקחיים שני. מאחר שלזבובים בוגרים יש שני זוגות של צינוריות מלפיגיות או MTs שמתכנסות למעיים דרך שופכנים משותפים, משכו את המעי האחורי החוצה מהזבוב כדי לשחרר את ה-MTs. זוג ה-MTs האחוריים ישוחררו ראשונים כשהם מקיפים מאחורי המעיים. המשיכו למשוך את המעיים כדי לשחרר את ה-MTs הקדמיים ואז צבטו אותם בשופכן כדי להפריד אותם מהזבוב.

כדי להרכיב את הצינוריות, החליקו מוט זכוכית מתחת לשופכן והעבירו את ה-MTs למגלשה מצופה פולי-L-ליזין. הצמידו את האיברים המנותחים על ידי לחיצה על השופכן כלפי מטה ולאחר מכן טאטאו בזהירות את המוט מעל ה-MTs. פולי-L-ליזין בשקופית יקדם התקשרות על ידי הגדלת מספר האתרים הטעונים חיובית הזמינים עבור התאים הטעונים שלילית של הצינוריות להיקשר. בפרוטוקול הבא, אנו ננתח MTs מנקבה בוגרת של זבוב ונרכיב אותם להדמיה חיה ex vivo במערכת זילוח.

- כדי להתחיל בהליך זה, מקמו שני סטים של הלחמה מסייעת לידיים מהדקים על שלב מיקרוסקופ ההדמיה עם מהדק אחד בכל צד. לאחר מכן, הכנס את נימי הזכוכית המכופפים המתאימים בקו הזרימה ואת קו הזרימה המחובר לוואקום. ואז הרכיבו אותם בידיים המסייעות. לאחר מכן יישרו אותם עם שלב ההדמיה של המיקרוסקופ.

מורחים שומן ואקום על סרט התקרה ולוחצים על מחיצת