אנציקלופדיית הניסויים של JoVE
ביולוגיה
0 צפיות • 2:57 דק׳ • April 30th, 2023
- במגלשת מיקרוסקופ טעונה חיובית, הדביקו שני פתקי כיסוי עם מרחק מספיק ביניהם כדי ליצור מקום להרכבת מוחות הדרוזופילה. מתחת למיקרוסקופ הסטריאופוני, מזרימים את המוחות בתווך ההרכבה לתוך החלל הזה. המטען השלילי של הרקמה יעזור למוח לדבוק במטען החיובי על פני השטח של המגלשה.
הסר את אמצעי ההרכבה העודפים כדי לאפשר מיקום מדויק של המוחות במגלשה בתבנית רשת כאשר אונות האנטנה פונות כלפי מעלה, ולאחר מכן גשר על שתי החלקות הכיסוי על ידי הדבקת כיסוי שלישי לרוחב כדי לכסות את המוח.
כדי למלא את החלל, הניחו את המדיום המרכיב טיפה אחר טיפה לתוך קצה החלל, ואפשרו לו להתפשט בתנועה נימית כך שלא יפריע למוח.
אטמו את החלל עם לק, ואחסנו בטמפרטורה שלילית של 20 מעלות צלזיוס בחושך כדי לשמר את הפלואורסצנטיות של רקמות מוכתמות.
בפרוטוקול לדוגמה, נרכיב מוחות דרוזופילה לצורך הדמיה קונפוקלית של נוירונים מוכתמים במערכת החיסון.
- כדי להרכיב את המוח, לבנות מגלשת גשר. מקם שני כיסויי בסיס במרחק של כסנטימטר אחד זה מזה במגלשה טעונה חיובית. ודא כי הצד הטעון חיובי הוא עם הפנים כלפי מעלה. לאחר מכן הדביקו את החלקות הכיסוי למגלשה עם לק לציפורניים, והניחו ללק להתייבש לחלוטין לפני שתמשיכו.
לאחר מכן, הניחו את המגלשה מתחת למיקרוסקופ סטריאו ומוחות פיפטה במדיום לתוך החלל שבין פתקי הכיסוי. הקפד להתאים את התאורה כדי לשפר את ההדמיה של המוח.
לאחר
צפו בתמליל המלא וקבלו גישה לאלפי סרטונים מדעיים