אנציקלופדיית הניסויים של JoVE
ביולוגיה
0 צפיות • 3:08 דק׳ • April 30th, 2023
- כדי לשתק זבובים להטמעת פרפין, דחפו בזהירות דרוזופילה מורדמת דרך הרווח של צווארון הזבוב כך שראשיהם ימוקמו באופן אחיד על גבי המכשיר בעודם מחוברים לשאר הגוף. לקיבוע רקמות, הניחו את הצווארונים בתמיסה של קרנוי. Carnoy's הוא חומר קיבוע דנטורינג המורכב מאתנול, כלורופורם וחומצה אצטית.
כדי להכין את הדגימה לחדירת פרפין, לייבש את הרקמה על ידי העברת הקולר דרך ריכוזים מדורגים של אתנול. לאחר מכן, העבירו את הקולר למתיל בנזואט, ממס אורגני. לאחר מכן, הניחו אותו בתמיסת מתיל בנוזואט ופרפין מומס בזמן חימום כדי להבטיח שהפרפין יישאר מותך. המשיכו לסדרה מורכבת של שלבי שטיפה עם פרפין שחומם מראש בלבד כדי להסיר את המתיל בנזואט.
לאחר מכן, מניחים במהירות את הצווארון בתבנית ויוצקים פרפין מומס כדי לכסות אותו לחלוטין. לאחר שהפרפין התקשה, הסירו את הבלוק מהתבנית והשתמשו בסכין גילוח כדי לקצץ עודפי פרפין. נתקו את הצווארון והותירו את שורת הראשים המשובצים בבלוק הפרפין. בפרוטוקול לדוגמה, נראה את ההליך שהודגם לניתוח פנוטיפים נוירודגנרטיביים.
- כדי להתחיל, ראשית, להשתמש במלקחיים כדי להשחיל את זבובי הנושא על ידי הצוואר לתוך הצווארונים. יישרו את כל הראשים באותו כיוון וודאו שלא נגרם נזק לראש או לעיניים. כלול זבובי סינוס אוקוליס, חסרי עיניים, במיקומים אקראיים ידועים, כך שניתן יהיה לזהות בקלות את סדר הזבובים במקטעים. בנוסף,
צפו בתמליל המלא וקבלו גישה לאלפי סרטונים מדעיים