אנציקלופדיית הניסויים של JoVE
ביולוגיה
0 צפיות • 3:45 דק׳ • April 30th, 2023
- כדי לבצע את בדיקת העדפת הטעם, השתמש בחדר, למשל, צלחת פטרי מחולק לחלקים שווים. אם אתם מודדים בחירה בין שני פתרונות בעלי טעמים שונים, יש לתייג אחד באדום ואת השני בכחול באמצעות חומרי צבע מאכל חסרי טעם. לאחר מכן הניחו טיפות במרווחים שווים של כל תמיסה לאורך קצה המנה על פני חלקים מתחלפים.
כעת מוסיפים זבובים מורדמים ומורעבים בעבר למרכז החדר ומכסים את המנה. בצע את הניסוי בחושך כדי למנוע הטיית צבע פוטנציאלית, ודגר ב 25 מעלות צלזיוס על פני פרק זמן מוגדר. כאשר ניתנת להם בחירה בין שני פתרונות, יותר נבדקים מעדיפים לצרוך פתרונות שטעמם אטרקטיבי יותר, למשל מתוק, תוך הימנעות מאפשרויות מרתיעות כמו תמיסות מרירות. עצרו את הניסוי על ידי העברת התא למקפיא.
כדי למדוד התנהגות האכלה והעדפת טעם, השוו את מספר הזבובים עם בטן בצבעים שונים. בפרוטוקול לדוגמה, נראה הדגמה של מבחן העדפת הטעם המודד את הבחירה בין תמיסות סוכרוז שונות.
- כדי להתחיל את הניסוי, יש להרוות כדור צמר גפן במים בתחתית בקבוקון זבוב סטנדרטי. לאחר מכן, לאסוף זבובים בקבוצות של 100 בעלי חיים על כרית CO2, ולאחר מכן להוסיף את הזבובים בקבוקון מוכן. השתמש בצמר גפן כדי לאבטח את הבקבוקונים סגורים. לאחר מכן, הניחו את הבקבוקונים על צידם באינקובטור מבוקר סביבתי. הכינו את טעם הבקרה של סוכרוז 1 מילימולרי על ידי שילוב של 10 מיקרוליטר של תמיסת סוכרוז 100 מילימולרי, 13 מיקרוליטר צבעי מאכל אדומים ו-977 מיקרוליטר מים.
לאחר מכן, להכין את הטעם ניסיוני של 5 מילימולר סוכרוז. לאחר מכן, צור את תאי הבדיקה על ידי קבלת צלחת פטרי פלסטיק 100 מ"מ על 15 מ"מ והנחת שלוש טיפות 10 מיקרוליטר של טעם בקרה קרוב ככל האפשר לקצה הצלחת במצב השעה 12. בשעה 3, מניחים שלוש טיפות של 10 מיקרוליטר של טעם ניסיוני קרוב ככל האפשר לקצה הצלחת. הניחו עוד שלוש טיפות של טעימת הבקרה במצב השעה 6. לאחר מכן הניחו עוד שלוש טיפות של הטעם הניסיוני במיקום השעה 9.
לאחר מכן, רוקנו בקבוקון אחד מתוך 100 זבובים מורעבים על כרית CO2 מספיק זמן כדי להרדים את כל בעלי החיים. מברישים את החיות למרכז תא בדיקה מוכן ומכסים אותו במכסה הכלים. הכניסו את תא הבדיקה לקופסת קרטון אטומה. לאחר מכן תייגו את החלק החיצוני של הקופסה עם המצב והגנוטיפ הנבדקים. העבר את כל המערך לחממה. לאחר שעתיים, הכניסו את תאי הבדיקה, שעדיין נמצאים בתוך קופסאות קרטון, ישירות למקפיא שלילי של 20 מעלות צלזיוס עד שיהיו מוכנים לכימות.