אנציקלופדיית הניסויים של JoVE
ביולוגיה
0 צפיות • 4:18 דק׳ • April 30th, 2023
- כדי להתכונן למזין הנימים, או מבחן CAFE, הכניסו נימי זכוכית מדורגים או מסומנים מלאים במזון נוזלי צבעוני, בקצה התחתון תחילה, דרך קצות פיפטה על גבי בקבוקון ניסוי שהורכב מראש. ודא שהנימים ממוקמים היטב באותו גובה ואינם באים במגע עם המנגנון.
סמן את רמת ההתחלה של המניסקוס בכל נימים. לאחר מכן אחסנו את הבקבוקונים בסביבה מבוקרת טמפרטורה, לחות ואור למשך הניסוי תוך החלפת נימים לפי הצורך. במהלך בדיקת CAFE, זבובים ניידים אינם מרוסנים ויש להם גישה חופשית לקצה הפתוח התחתון של המיקרופיפטה. זבובים ניזונים מרצון כאשר הם מאריכים את חוטמיהם וצורכים את הנוזל, מה שמקטין את המדיום בתוך הנימים.
כדי לעקוב אחר צריכת המזון והעדפתו לפרק זמן מוגדר, רשמו את ירידת המניסקוס מסימן ההתחלה לרמה בסוף אותה תקופה מנימי הזכאות. בפרוטוקול לדוגמה, נראה את בדיקת CAFE עם ההרכבה שונה כדי להשיג אידוי מופחת מהנימים המלאים בנוזל.
- מוציאים בזהירות את קצה הפיפטה שסוגר את אחד הפתחים החיצוניים, ומכניסים תחילה נימי זכוכית מלאים, בקצה התחתון. אבטחו את הנימים על ידי הנחת קצה הפיפטה בחזרה ליד הנימים. חזור על שלב זה עבור כל פתרונות המזון שנבדקו.
לאחר מכן, מניחים את קצוות הנימים בתוך כל הבקבוקונים באותה רמה, 3 עד 4 ס"מ מהמכסה. השאירו מרחק בין נייר הסינון כדי למנוע דליפה של הנימים. השתמש בעט סמן כדי לסמן את הקצה העליון של הנוזל הצבעוני.
צפו בתמליל המלא וקבלו גישה לאלפי סרטונים מדעיים