אנציקלופדיית הניסויים של JoVE
ביולוגיה
0 צפיות • 2:45 דק׳ • April 30th, 2023
- השתמשו בזירה מקורה - לדוגמה, צלחת פטרי מלאה בסיליקון שקוף - כדי להבטיח שזבובים יוכלו ללכת בחופשיות, אך לא יוכלו לעוף בתוך הזירה כשהיא מכוסה. הניחו את המנה על משטח לבן מואר ומקמו מצלמה ישירות מעל.
כשהמכסה פתוח, העבירו זבובים מורדמים לצלחת, כסו אותה ואפשרו לנבדקים להתאושש. זבובים ינועו בחופשיות ברחבי הזירה במהלך המשפט. כדי להעריך תנועה, עקבו אחר המיקום של כל זבוב לאורך זמן וחשבו פרמטרים המאפיינים תנועה, כגון המרחק שעבר כל זבוב. בפרוטוקול דוגמה זה, נראה הדגמה של הגדרת הבדיקה וניתוחה באמצעות תוכנת מעקב וידאו.
- כדי לעקוב אחר תנועות הזבובים בצלחת פטרי, ראשית, מלאו צלחת של 6 ס"מ באלסטומר סיליקון שקוף כדי ליצור את זירת המעקב. השאירו רווח של 3 מ"מ בין הסיליקון למכסה, כך שזבובים יוכלו ללכת בחופשיות ברווח, אך לא להמריא. מתחת לזירת המעקב, יש רקע לבן.
לאחר מכן, מרדימים ארבעה זבובים מאותה קבוצת טיפול ומניחים אותם בזירה. תנו לזבובים להתאקלם במשך שעה לזירה, שאמורה להיות מוארת במלואה ובערך 22 מעלות צלזיוס, לא חם יותר מטמפרטורת החדר. לאחר שעה, השתמש במצלמת מכשיר מצמיד טעינה הממוקם מעל הזירה כדי להקליט את פעילות הזבוב במשך 5 דקות.
לאחר ההקלטה בת 5 הדקות, מרדימים את הזבובים בזירה ומחזירים אותם לבקבוקון ביתי חדש. לאחר מכן, השליכו את הזירה. מאוחר יותר, נתח את ההקלטות באמצעות תוכנת Ctrax הזמינה באופן חופשי. תוכנה זו מייצרת נתוני מעקב, שניתן לייצא בפורמט תואם שפה ניתנת לתכנות, כגון פורמט MATLAB.
מתוך הנתונים, לחשב את המרחק שעבר לכל מסגרת, את מרחק ההליכה הממוצע עבור כל זבוב, ואת המרחק הממוצע שעבר לכל זבוב. לקבלת מובהקות סטטיסטית, צפו לבדוק כ-100 זבובים לכל קבוצת טיפול.