הסרה מכנית של קרום כוריון וויטלין: שיטה להכנת ביציות דרוזופילה להשגחה ישירה

- להתחיל עם ביציות בשלות משחלות קבועות בתמיסת מלח. ביציות בוגרות נושאות קליפות ביצים המורכבות מכוריון חיצוני וקרום ויטלין פנימי.

כדי להסיר באופן מכני את קרום הכוריון והויטלין, הניחו את הביציות בין החלקים החלביים של שתי שקופיות שטופלו מראש. הזיזו את השקופית העליונה בתנועות ישרות קדימה ואחורה כדי ליצור חיכוך שמגלגל את הביציות.

כעת, הזיזו את המגלשה העליונה בזווית קלה כדי לגלגל את הביציות לכיוון אחר. הימנעות מתנועה מעגלית, הגדל זווית זו בדרגות קצרות עד שהשקופית העליונה תזוז בניצב לשקופית התחתונה. תנועה זו מסירה באופן מכני את הכוריון ואת קרומי הוויטליין, ומאפשרת גישה לבדיקות או כתמים לתוך הביצית.

ביציות ללא כוריון ייראו ארוכות ודקות, ואלו ללא קרומי ויטלין יהיו בעלי קצוות מחודדים. כדי להפריד את הביציות שפונקו מהפסולת שמסביב, העבירו את תערובת הדגימות לצינור, ואפשרו לביציות לשקוע לתחתית בזמן שהפסולת צפה בחלק העליון וניתן להסיר אותה.

בפרוטוקול זה נסיר קרומי כוריון וויטלין מביציות דרוזופילה בוגרות.

- כדי להפריד את הביציות בשלב מאוחר, ראשית, יש להוסיף מיליליטר אחד של PBSBTx לצלחת ניתוח רדודה. לאחר מכן, השתמשו ב-P200 עם קצה מצופה BSA כדי להעביר שחלות קבועות לתוך הכלים הרדודים. פיפטה השחלות מעלה ומטה עם קצה פיפטה מצופה BSA כדי לעקור את הביציות הבשלות מהביציות הפחות בשלות.

כאשר הביציות בשלב מאוח