דיסקציה של קומפלקס עין-מוח מגלמי זבובים: שיטה לבידוד רקמת רשתית
אנציקלופדיית הניסויים של JoVE
ביולוגיה
0 צפיות • 2:52 דק׳ • April 30th, 2023
- כדי להתחיל, אבטחו גלמים של זבוב הפירות בגב, או בגב, כלפי מעלה. הסר את האופרקולום או את הקצה הקדמי של הגולם, כדי לחשוף את ראש החיה. ממשיכים לפתוח את הגלמים על ידי חיתוך וקילוף המעטפת. לאחר השחרור, כסו את הגלמים המנותחים עם PBS כדי למנוע התייבשות. בצע חתך נקי, חתך דרך בית החזה והסר את החלק האחורי של הפגר.
כדי לחשוף את קומפלקס העין-מוח, הכולל את שתי הרשתיות המחוברות לאונות הראייה, מתחילים לקרוע את האפיתל מהקצה הפתוח של בית החזה וממשיכים לפתוח את קפסולת הראש בהדרגה. לאחר מכן, לכוון בזהירות את קומפלקס העין-מוח הרחק משאריות קפסולת הראש.
בפרוטוקול לדוגמה, נראה הדגמה של דיסקציה של גולם עין-מוח המשמשת לבידוד רקמות עבור ניתוחים שונים במורד הזרם.
- לאחר הנחת גלמי הדרוזופילה על צלחת ניתוח שחורה, הניחו פיסת סרט דו-צדדית טרייה על צלחת הניתוח הרחק מהגלמים והשתמשו בזוג מלקחיים כדי להניח בזהירות את הצד הגבי של הגלמים על נייר הדבק.
הניחו את הצלחת מתחת למיקרוסקופ סטריאופוני והשתמשו במלקחיים כדי להסיר את האופרקולום של כל גולם. השתמשו במספריים מיקרודיסקציה כדי לחתוך כל מארז גולם, המאפשר לפתוח אותו כדי לחשוף את הראש, בית החזה ומקטע הבטן הקדמי, ולאבטח את הקצוות של מארז הגולם לסרט הדו-צדדי.
ניקבו את בטנו של כל גולם במלקחיים חדים והוציאו את הגולם. הניחו את הגלמים על צלחת הדיסקציה הרחק מסרט הדבק, וכסו את
צפו בתמליל המלא וקבלו גישה לאלפי סרטונים מדעיים