אנציקלופדיית הניסויים של JoVE
ביולוגיה
0 צפיות • 5:51 דק׳ • April 30th, 2023
- אספו עוברי דרוזופילה חיים והסירו את הכוריון הלא שקוף שלהם. לאחר מכן, על מכסה זכוכית, להחיל שורה של דבק heptane, שהוא דבק סרט מומס heptane נוזלי. כדי להיות מסוגלים לטפל בעוברים שעברו דה-כוריוניזציה, יישרו בזהירות את הדגימות בשורה על הדבק.
העבירו את הכיסוי לתא התייבשות כדי לייבש חלקית את העוברים. זה ימנע דליפה ציטופלזמית במהלך או אחרי זריקות. לאחר מכן, הסירו את הכיסוי וכסו את העוברים בשמן הלוקרבון כדי למנוע התייבשות נוספת ועדיין לאפשר לחמצן להתפזר לתוך העוברים.
כדי לבצע את המיקרו-הזרקה, השתמש במערכת מיקרו-הזרקה במיקרוסקופ תואם. על ידי התבוננות דרך חתיכות העיניים, זהה הן את העוברים והן את המחט הטעונה מראש בתמיסת הזרקה. שברו את המחט וודאו שהיא מייצרת טיפות נוזל עקביות ובגודל מתאים. לאחר מכן, הביאו את המחט לתוך העובר והזריקו את הנפח המתאים. מוציאים את המחט, וממשיכים למחט, חוזרים על הזריקה לעוברים הנותרים.
בפרוטוקול לדוגמה, נראה הדגמה של מיקרו-הזרקה של עובר דרוזופילה למחקרי הדמיה חיים של חלוקת תאים.
- לפני הגדרת הכיסוי, הכינו דבק הפטן על ידי פתיחת סרט דביק כפול, והכנסתו לבקבוק של 100 מיליליטר. מוסיפים כ-50 מיליליטר הפטאן, אוטמים את הבקבוק ומנדנדים אותו למספר ימים.
לפני הכנת העוברים, יש להכין תא התייבשות שהעוברים יוכנסו אליו לפני ההזרקה. כדי לעשות זאת, לשים חלק אחד של צלחת 35 מ"מ בתוך צ
צפו בתמליל המלא וקבלו גישה לאלפי סרטונים מדעיים