אנציקלופדיית הניסויים של JoVE
ביולוגיה
0 צפיות • 5:20 דק׳ • April 30th, 2023
- מוניטור פעילות דרוזופילה, או DAM, מחזיק צינורות פעילות ממורכזים המצוידים במזון זבובים בקצה אחד וחדיר אוויר קרוב יותר בקצה השני. מערך זה מתאים לזבובים בודדים במהלך ניסויים הנמשכים מספר ימים או אפילו שבועות.
מקם את ה- DAM בסביבה מבוקרת כמו אינקובטור עם טמפרטורה, לחות ומחזור אור מוגדרים. ערכו את הניסוי בחדר חשוך ובמידת הצורך השתמשו במקור אור אינפרא אדום לטיפול במכשיר, שבניגוד לאור בהיר, אינו משפיע על המערכת הצירקדית של הזבוב.
כדי להקליט את פעילות התנועה, חבר את המנגנון למערכת מחשב המאחסנת את הקריאות מגלאי הסכר. האלקטרוניקה של הסכר מזהה ברציפות את תקינות קרן אינפרא אדום הנפלטת דרך נקודת האמצע של כל צינור ומעלה מעת לעת נתונים למערכת המחשב.
כאשר הזבוב הולך הלוך ושוב בתוך הצינור, הוא חוצה את קרן האינפרא אדום. הפרעות אלה נספרות על ידי ה-DAM לאורך זמן עבור כל צינור ומשמשות כמדד לפעילות הזבוב.
בפרוטוקול הבא, נשתמש במערכת DAM כדי לחקור מקצבים צירקדיים אצל זכרים בוגרים של דרוזופילה.
- לפני העמסת זבובים לצינורות פעילות, יש להפעיל את האינקובטורים שישמשו לאחסון צגי הפעילות. יש לכוונן את הטמפרטורה באמצעות פקדי האינקובטור ולהגדיר את משטר האור/חושך באמצעות בקר האור של מערכת DAM או מערכת בקרת האור של האינקובטור עצמו, בהתאם לתכנון הניסוי הרצוי.
לאחר מכן, להרדים את הזבובים עם פחמן דו חמצני. לאחר מכן,
צפו בתמליל המלא וקבלו גישה לאלפי סרטונים מדעיים