דרוזופילה בדיקת העדפת הטלת ביצים: שיטה לבדיקת קבלת החלטות בזבובים

- כדי לבחון את העדפתה של נקבת זבוב להטלת ביצים, או אתרי ביצה, ספקו לנקבת זבוב בודדת בחירה בין שני מצעים שונים שעליהם תטיל את ביציה בתוך תא בדיקה. הזבוב ישווה בין האפשרויות הקיימות ויבחר את האתרים המועדפים עליו, בדרך כלל את המצע המתאים ביותר לצאצאיו.

ודא שהזבוב מוכן להטיל ביצים רבות, כך שיהיו מספרי ביצים חזקים בכל ניסוי. בסוף הניסוי, הסירו את הזבוב, וספרו את הביצים על כל מצע כדי לקבוע את העדפת האוביפוזיציה של הזבוב.

בפרוטוקול לדוגמה, נשתמש בבדיקת תפוקה גבוהה כדי לבדוק העדפת הטלת ביצים למצעי אגרוז רגילים או המכילים סוכרוז.

- המשך בניסוי על ידי השגת תאי הטלת ביצים אקריליים שנבנו בעבר. הכנס יריעות פלסטיק לתוך החלק העליון, טוען חתיכה של החדר לשמש את המשטח התחתון.

לאחר מכן, הרדימו את הנקבות על כרית פחמן דו חמצני, והעמיסו אותן בנפרד לכל זירת הטלת ביצים. אפשרו לזבובים 30 דקות להתאושש מהפחמן הדו-חמצני ולהסתגל לסביבה החדשה. בזמן שהזבובים מתכווננים, ממלאים צינור באגרוז עד לסימן 10 מיליליטר. לאחר מכן, להכין מצע סוכרוז 150 מילימולרי על ידי הצבת 750 מיקרוליטר של 2 תמיסת סוכרוז מולארי לתוך הצינור. שמור בקבוק של agarose מומס 1% באמבט מים.

מכינים את המצע הרגיל באותו אופן, אך מחליפים את תמיסת הסוכרוז במים מזוקקים. לאחר מכן, להשיג את פיסת המצע של החדר פיפטה 1,000 מיקרוליטר של מצע agarose לתוך כל שוקת. מניחים את האגרוז בצד כדי להתמצק במשך 30 דקות.

לאחר שמצעי האגרוז והזבובים מוכנים, הרכיבו את כל שלושת חלקי תא הטלת הביצים ולאחר מכן הוציאו את יריעות הפלסטיק. הניחו את התאים באינקובטורים למשך הלילה.

מרדימים נקבות על ידי הזרקת פחמן דו חמצני לתוך החדר. לפרק את החדר ולהשליך את הזבובים המורדמים. לבסוף, צלמו את הביצים לשמירת רשומות.