אנציקלופדיית הניסויים של JoVE
מחקר סרטן
0 צפיות • 3:44 דק׳ • April 30th, 2023
- כאשר תאים לוקמיים מתורבתים יחד עם תאי סטרומה מזנכימליים, הם מתקשרים עם תאי סטרומה ויוצרים שלוש תת-אוכלוסיות. תאים מרחפים צפים בחופשיות, תאים בהירי פאזה הנצמדים לפני השטח של החד-שכבה המזנכימלית, ותאים עמומים בפאזה מתחת לחד-שכבה המזנכימלית. כדי להפריד כל תת-אוכלוסייה, קח צלחת תרבית רקמה עם חד-שכבה של תאי סטרומה מזנכימליים.
זרעים של תאים לוקמיים הנמצאים בתרבית ספציפית לגידול על גבי החד-שכבתי, ודוגרים על הצלחת למשך הזמן הרצוי. לאחר מכן, לאסוף תאים סרטניים בתרחיף על ידי pipeting התאים צפים בחופשיות לתוך צינור נפרד. כעת, הוסיפו את המדיה הטרייה לצלחת ולפיפטה במרץ כדי לעקור את תאי הגידול הבהירים ממשטח החד-שכבתי המזנכימלי.
לאסוף תאים אלה על ידי pipeting אותם בצינור נפרד. מוסיפים טריפסין לצלחת להסרת התאים המזנכימליים הדבקים. הוסף נסיוב בקר עוברי, או FBS, כדי לעצור את פעולת הטריפסין ולפרק את צברי התאים. כעת, אספו את התאים העמומים בצינור. צנטריפוגה את כל שלושת הצינורות המכילים תת-אוכלוסיות תאים שונות בנפרד והשהתה מחדש את הגלולה במדיה טרייה לניתוח נוסף. בפרוטוקול הבא, נבודד תאים לוקמיים מתרחיפים, בהירי פאזה ודלי פאזה מתרבית משותפת דו-ממדית.
- כדי לקצור את תת-אוכלוסיית הגידול המרחף, שאפו את התווך מצלחת התרבית המשותפת של התא הלוקמי והשתמשו באותו מדיום כדי לשטוף בעדינות את הצלחת פעם אחת. לאחר מכ
צפו בתמליל המלא וקבלו גישה לאלפי סרטונים מדעיים