לוקמיה

סרטון זה מתאר את הטכניקה של צביעת תאי מח עצם באמצעות צביעת May- Grünwald Giemsa. בפרוטוקול נצביע את תאי הלוקמיה המיאלואידית, תאי C149, כדי לנתח את המורפולוגיה ואת הספירה הדיפרנציאלית.

סרטון זה מתאר העשרת תאי T מטחול העכבר על ידי ברירה שלילית באמצעות מפריד מגנטי. הטכניקה כוללת מיקוד התאים האחרים בדגימה לדלדול באמצעות נוגדנים או ליגנדים המכוונים נגד אנטיגנים ספציפיים של פני התא.

סרטון זה מתאר את הטכניקה של בידוד תאים חיוביים של c-kit ממח העצם של עכבר. בפרוטוקול, נבודד תאים חיוביים של c-kit מעכבר מהונדס כדי לאמת c-Fos ו- Dusp1 לבד או יחד כמטרות תרופתיות בלוקמיה.

סרטון וידאו זה מתאר את הפרוטוקול לצביעת BrdU immunofluorescence. הטכניקה מאפשרת זיהוי תאים בשלבים שונים של מחזור התא. תוספת של צבעי DNA ותיוג נוגדנים מאפשרת ניתוח מפורט של גורל תאי שלב S בזמנים מאוחרים יותר.

סרטון זה מתאר את הטכניקה של בידוד תאי לוקמיה לימפוציטית כרונית (CLL) מדם היקפי. באמצעות פרוטוקול זה, נבודד תאי CLL מדגימת דם של מטופלים אנושיים לצורך יצירה יעילה לאחר מכן של שברים גרעיניים וציטופלזמיים.

הסרטון מסביר דרך לטהר תאי B על ידי מיקוד אימונומגנטי והפרדה מהשעיית תאי דם חד-גרעיניים היקפיים. השיטה כוללת סימון סוגי תאים לא רצויים עם נוגדנים או ליגנדים ספציפיים (הקשורים לחלקיקים מגנטיים) המכוונים לחלבונים ספציפיים על פני התא, כדי להתרוקן מתרחיף התא ההטרוגני על ידי הפרדה מגנטית.

סרטון זה מתאר שיטה להפרדה מרחבית של שלוש תת-אוכלוסיות של תאים לוקמיים: תאי לוקמיה מרחפים המרחפים בחופשיות במדיה, תאי לוקמיה בהירי פאזה שנצמדו לפני השטח של חד-שכבה של תאי סטרומה מזנכימליים, ותאי לוקמיה עמומים בפאזה שנדדו מתחת לחד-שכבה של תאי סטרומה מזנכימליים מתרבית דו-ממדית.

סרטון זה מתאר פרוטוקול מפורט לבידוד מח עצם שלם טרי מגפיו האחוריות של העכבר כדי לחקור פגמים שלמים ב- BM עבור חולים עם הפרעות דם כגון לוקמיה.

סרטון זה מתאר את ההפרדה של תאי לוקמיה לימפובלסטית חריפה מתאי סטרומה של מח עצם באמצעות עשר עמודות דקסטרן G-10 צולבות מסוג ג'ל. שיטה זו מסייעת לשחזר את אוכלוסיית תאי הגידול שנדדו מתחת לתאי סטרומה של מח העצם הדבק ויצרו אוכלוסיית תאי גידול "עמומה פאזה".

הסרטון מתאר שיטת דגימה לאיסוף דם היקפי מסינוס רטרו-אורביטלי של עכבר ובידוד נוסף של תאים חד-גרעיניים מדם באמצעות צנטריפוגה הדרגתית של צפיפות.

סרטון זה מתאר את הטכניקה של שאיפת מח עצם מעמוד השדרה האיליאק והכנה לביופסיה. בדוגמה, אנו מבצעים שאיבת מח עצם מחולה לוקמיה מיאלואידית חריפה (AML) ובודקים את התאים כדי לבדוק אם יש מחלה שיורית מדידה (MRD), סמן ביולוגי פרוגנוסטי חשוב.

סרטון זה מתאר פרוטוקול ליצירת תאים דנדריטיים - תאים מציגי אנטיגן מרכזיים המפעילים תאי T - ממח העצם של עכבר בוגר.

סרטון וידאו זה מתאר את הפרוטוקול לבידוד HSPCs ממח העצם ומייונם באמצעות טכניקת מיון תאים מופעלים פלואורסצנטיים, שהיא שיטה להשגת HSPCs ממוינים יחידים. אנו מגדלים תאים ממוינים אלה כדי להשיג שיבוטים של HSPC.

פרוטוקול זה מתאר את הטכניקה של בידוד תאי גידול בעלי תווית פלואורסצנטית של לוקמיה לימפובלסטית חריפה של תאי T (T-ALL) מדגי זברה בוגרים וכימות שלהם באמצעות צבע כחול טריפאן.

הפרוטוקול הבא מתאר שיטה לבידוד אוכלוסיית הצד של תאי T Acute Lymphoblastic Leukemia (T-ALL), המורכבת מתאי גזע, מדגי זברה בוגרים. אוכלוסיית הצד חסרה סמני תאים בולטים ולכן אנו משתמשים בבדיקת צבע אפלוקס Hoechst 33342 כדי לבודד אותם.

סרטון זה מתאר את הפרוטוקול לגזירת כרומטין באמצעות עיכול אנזימטי מיקרוקוקלי נוקלאז. גזירת כרומטין היא שלב חיוני בתהליך העבודה של Chromatin immunoprecipitation או ChIp, אשר מסייע לחקור אינטראקציה חלבון-DNA בתאי לוקמיה מיאלואידית כרונית אנושית. בפרוטוקול התכונה חיתוך כרומטין מבוצע באמצעות סוניקציה.

סרטון זה מתאר את הנזק הסלקטיבי של תאי לוקמיה אנושיים באמצעות אולטרסאונד בתדר נמוך. יישום זה של אולטרסאונד בתדר נמוך במצב פרה-קליני במבחנה מדגים כי ניתן להשיג הרס תאים על מנת לבחון ולהשוות את ההשפעות של סוניקציה על לוקמיה ותאים נורמליים.

מאמר זה מתאר את הפרוטוקול עבור בדיקת XTT שהוא בדיקה קולורימטרית להערכת כדאיות התא ופעילות המיטוכונדריה.

הסרטון מתאר את בדיקת סימון הדופק המדורגת של תאי יונקים עם ברומודוקסיורידין (BrdU) למדידת התפשטות תאים. ספיגת BrdU מאפשרת מעקב זמני אחר תאים שהיו בשלב הסינתזה בנקודת זמן מסוימת, ללא צורך בסנכרון התאים.

סרטון זה מתאר את הטכניקה לתרבית משותפת דו-ממדית ארוכת טווח של תאי לוקמיה עם תאי סטרומה של מח עצם כדי לחקור את האינטראקציה שלהם עם מיקרו-סביבה של מח העצם. מודל ההתרבות הדו-ממדית משתמש בתאי לוקמיה לימפובלסטית חריפה ובסטרומה או אוסטאובלסטים של מח העצם המשפיעים על פנוטיפ תאי הגידול. מחקר זה יתמוך בחקירת המנגנונים העומדים בבסיס הישרדות תאי לוקמיה הנתמכים על ידי מח עצם במהלך חשיפה לכימותרפיה.

סרטון זה מתאר את הכנת השברים התת-תאיים מתאים לוקמיים, שהיא שיטה ליצירת שברים תאיים וגרעיניים מתאים לוקמיים. ניתן להשתמש בשברים הגרעיניים והציטופלזמיים לניתוח נוסף במורד הזרם.

פרוטוקול זה מספק גישה ביוכימית למדידת קצב החמצה חוץ-תאי (ECAR) וקצב צריכת חמצן (OCR) של תאים לוקמיים ראשוניים עם בדיקת שטף חוץ-תאי. הערכת הפרופיל המטבולי של תאים אלה מסייעת לאפיין את דרישותיהם, מה שמוביל לטיפול מותאם אישית.

סרטון זה מתאר פרוטוקול לבדיקת משקעים חיסוניים של כרומטין (ChIP), שהיא טכניקה קלאסית להדגמת אינטראקציות חלבון-דנ"א. טכניקה זו משמשת לזיהוי גני מטרה בתאי לוקמיה לימפוציטית כרונית בבני אדם.

סרטון זה מתאר את הפרוטוקול לאימות גנטי על ידי העברת גני מטרה באמצעות רטרו-וירוסים בשורות תאי לוקמיה מיאלואידית כרונית. הרטרו-וירוסים פועלים כמתווך להעברת חומר גנטי לתא הלוקמיה בתהליך הנקרא טרנסדוקציה, המאפשר ביטוי ארוך טווח של גן המטרה. שיטה זו יכולה להיות מיושמת על כל תאי המטרה לצורך אימות גנטי ופיתוח טיפולי.

סרטון זה מתאר את הפרוטוקול של יחידת היווצרות מושבה מבוססת מתיל צלולוז או בדיקת CFU, המסייעת לזהות ולספור את מספר המושבות שנוצרו על ידי תאים לוקמיים בתגובה לטיפול בתרכובות אנטי-סרטניות.

סרטון זה מסביר שיטת כרומטוגרפיה נוזלית כמותית הפוכה בעלת ביצועים גבוהים (RP-HPLC) למדידת חילוף החומרים של אדנוזין ופורינים הקשורים הנוצרים על ידי צריכת AMP בסביבה חוץ-תאית של תאי סרטן לוקמיים. הפרוטוקול מתאר בדיקת RP-HPLC רגישה, ספציפית, אמינה וניתנת לשחזור, שפותחה ואומתה לכימות נוקלאוטידים ונוקלאוזידים פורין חוץ-תאיים המיוצרים על ידי תאי לוקמיה לימפוציטית כרונית מטוהרים (CLL) בתנאי תרבית שונים.