מיון תאי לוקמיה מבוסס עמודות G-10: שיטה לטיהור תאי לוקמיה לימפובלסטית חריפה מתאי סטרומה של מח עצם

0 צפיות2:57 דק׳ • April 30th, 2023

- כדי להתחיל, להוסיף טריפסין לצלחת המכילה תאי לוקמיה בתרבית משותפת עם תאי סטרומה מח עצם עבור דיסוציאציה התא. צנטריפוגה והשעיה מחדש של הגלולה באמצעות מדיה מחוממת מראש כדי לשמור על כדאיות התא. עמוד G-10 מכיל חרוזי דקסטרן צולבים המתנפחים במים ויוצרים מטריצת ג'ל.

אזנו את עמודת G-10 עם מדיה מחוממת מראש כדי למלא את החלל בין החרוזים, ולהבטיח התחמקות איטית של המדיה מהעמודה. שמור על טמפרטורה מתאימה בעמוד כדי למנוע היווצרות בועות אוויר. טען את תערובת התאים באיטיות על חרוזי הג'ל בטור G-10. לדגור על התאים על עמודת G-10 בטמפרטורת החדר למשך הזמן הרצוי. בהתבסס על מאפייני פני התא וגודלו, חרוזי הג'ל מעדיפים להגביל את תאי סטרומה מח עצם גדולים יותר, המאפשר הפרדה של תאי לוקמיה.

הוסף מדיה מחוממת מראש לטור ולאסוף את התרחיף של תאי לוקמיה. צנטריפוגו את מתלה התא והשהו מחדש את הגלולה בחיץ מתאים. השתמש באוכלוסייה הטהורה של תאי לוקמיה לניתוח נוסף. בדוגמה הבאה, נפריד אוכלוסייה טהורה של תאי לוקמיה מתרבית סטרומה משותפת באמצעות טור G-10.

- כאשר הסטופקוק סגור לחלוטין עבור כל תת-אוכלוסייה, השתמש בפיפטה של 1000 מיקרוליטר כדי להוסיף את כל נפח ה-1 מיליליטר של התאים, טיפה חכמה, על החלק העליון של אחד מעמודי G-10 המוכנים, וודא שהתאים נשארים על גבי או בתוך גלולת G-10. תנו לתאים לדגור על גלולת G-10 במשך 20 דקות בטמפרטורת החדר. לאחר מכן, הוסיפו 1 עד 3 מיליליטר של מדיום טרי שחומם מראש לטור ופתחו את הסטופקוק כך שהמדיום יוצא באיטיות מהעמודים ויורד בצורה חכמה.

המשיכו להוסיף מדיום שחומם מראש לעמודים במרווחים של 1 עד 2 מיליליטר. כאשר נאספו בסך הכל 15 עד 20 מיליליטר של תאים לוקמיים, סגור את הסטופקוק וסגור את צינור האיסוף. לאחר מכן, סובב את התאים והשהה מחדש את הגלולה במאגר הניתוח המתאים במורד הזרם.