אנציקלופדיית הניסויים של JoVE
מחקר סרטן
0 צפיות • 3:40 דק׳ • April 30th, 2023
- בחולי לוקמיה לימפוציטית כרונית, או CLL, הלימפוציטים של תאי B גדלים באופן משמעותי במח העצם ובדם. כדי לבודד תאי CLL אלה מדגימת דם, ראשית, טפלו בדגימה בקוקטייל העשרה אנושי של תאי B המפריד בין תאי B באמצעות ברירה שלילית. הנוגדנים בקוקטייל מזהים באופן ספציפי ומצליבים את האנטיגנים המבוטאים על ידי תאים שאינם B ואריתרוציטים, ויוצרים קומפלקסים צפופים.
לאחר מכן, שכב את הדגימה על מדיום שיפוע צפיפות בעל צפיפות אופטימלית לבידוד לימפוציטים. עם הצנטריפוגה שלאחר מכן, מרכיבי הדם השונים נפרדים בהתבסס על שינויים בצפיפותם ביחס לתווך השיפוע. קומפלקסים RBC-non-B תאים עם צפיפות גבוהה יותר להתיישב דרך המדיום, וליצור גלולה. החלק הכי פחות צפוף בפלזמה יוצר את השכבה העליונה. תאי ה-CLL הצפופים פחות יוצרים שכבה לבנה בממשק הבינוני בצפיפות הפלזמה.
מעבירים בזהירות את השכבה הלבנה לצינור טרי. צנטריפוגה שוב כדי לקבל גלולה המכילה תאי CLL מטוהרים. בפרוטוקול הבא, אנו מראים את הבידוד של תאי לוקמיה לימפוציטית כרונית, מדגימות דם של מטופלים.
- קבלת דגימות דם היקפיות מחולי לוקמיה לימפוציטית כרונית שהוסכם עליהם בעבר בצינורות איסוף דם EDTA בליווי ספירת התאים הלבנים.
- יש להתייחס לדגימות דם אנושיות כמסוכנות, מכיוון שהן עלולות להכיל וירוסים המועברים בדם. ודא שדגימות אלה מטופלות בארון בטיחות ביולוגית Class II ושהמשתמש לובש חלוק
צפו בתמליל המלא וקבלו גישה לאלפי סרטונים מדעיים