Name: עכבר עובריים תרבות ריאות, מערכת הערכת המנגנונים המולקולריים של מסעף (וידאו) | JoVE Journal
Uploaded: 2010-06-30T17:00:00.000+00:00
Duration: 7 min 32 s
Description: למד שיטה לבידוד וגידול ריאות עובריות בעכבר לחקר אינטראקציות אפיתל-מזנכימה. השיטה מאפשרת תצפית על שינויים בצמיחה ובהתפצלות בתגובה לטיפולים ספציפיים.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

עבודה זו נתמכה על ידי פרס המחקר סבן קדם דוקטורט במכון (PMDM), ועל ידי NIH RO1 HL75773 (DW).

תרבות איברים היא טכניקה שימושית מאוד תכליתי ללמוד גנים ביטוי חלבון. תרבות שיטות אלה לשעבר vivo יכול לשמש ראשוני או משלים במחקרים vivo. 1. ריאות עובריים בידוד <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> מתוזמן בהריון עכברים מוקרבים ביום postcoitum 11.5 או 12.5 (E11.5 12.5-) על ידי ה-CO 2 הרדמה על פי הנחיות NIH ו OLAW. חיה ממוקם בתא ו CO 2 100% הוא הציג. לאחר שהחיה היא מודעת זרימת CO 2 הוא גדל. מוות קליני של החיה יש להבטיח. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> כל השלבים הבאים צריך להסתיים בתנאים סטריליים במנדף זרימה למינרית. הרחם יוסר הנקבות בהריון. כדי להסיר את הרחם מן החיה, הנקבות בהריון ממוקמות על גבם רוססו עם אתנול 70%. מבצעים חתך באזור הבטן, העור הוסר על ידי משיכת העור כלפי מעלה תוך כדי החזקת הרגליים האחוריות של החיה. חלל הצפק נפתח הרחם יוסר החיה. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> דם היא שטפה ידי הנחת הרחם צינור חרוטי 50 מ"ל מלאים פתרון הנקס מלח קר מאוזן (HBSS), ואת הצינור הוא התנדנד בעדינות במשך 2 דקות. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> הרחם ממוקם מכן תחת מיקרוסקופ לנתח סטריאוסקופית בצלחת פטרי, ואת העוברים שוחרר מן הרחם על ידי חריטה לדופן הרחם באמצעות מספריים האביב. עוברים נקצרים בעזרת כף מחוררת, והניחו על קרח בצלחת פטרי חדשה המכילה HBSS. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> תחת המיקרוסקופ לנתח סטריאוסקופית, הריאות עובריים הם גזור אחד אחד בצלחת פטרי המכילות HBSS קר (איור 1). </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> ריאה עובריים מבודדים מושם על קרח בצלחת פטרי המכילות HBSS בעזרת פיפטה העברת סטרילית. </li></ol> 2. ריאות עובריים תרבות <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> 500 מיקרוליטר ל למיליליטר 1 לכל היטב D-MEM/F-12 בתוספת 50 יחידות / מ"ל ​​של סטרפטומיצין, פניצילין הוא הוסיף בצלחת פוליסטירן Nunclon. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> פוליקרבונט Nuclepore Track-Etch ממברנה ממוקם על גבי התקשורת. כאשר פוליקרבונט Nuclepore Track-Etch ממברנה ממוקם על גבי התקשורת, לוודא כי הצד המבריק הוא כלפי התקשורת, הצד המחוספס פונה מעלה. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> ריאות העובר גזור ממוקמת על גבי ממברנה פוליקרבונט מסלול Etch Nuclepore באמצעות פיפטה העברת סטרילית. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> עמדת ריאות העוברית מותאם באמצעות מלקחיים. ריאה עובריים שהונחו על המסנן צריך קנה הנשימה שלם להציב קנה הנשימה שלהם עם בעל עמדה ישר, ובכך מאפשר לריאות כל יש את הלחץ הפנימי זהה. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> המנה פוליסטירן Nunclon מועבר בפעם תרבות הרצוי חממה תא (איור 2). </li></ol> 3. חומרים 1. עובריים ריאות שלמות בידוד <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> מתוזמן בהריון (C57BL6 סוג בר או מהונדס) עכברים להיות הקריב ביום postcoitum 11.5-13.5 (E11.5-13.5). </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> הנקס "פתרון מאוזן מלח (HBSS) (1X), נוזלי, ללא כלור, סידן, מגנזיום כלוריד, או מגנזיום סולפט. (Invitrogen, בקרלסבד, קליפורניה) בתוספת 50 יחידות / מ"ל ​​של סטרפטומיצין, פניצילין (Invitrogen, בקרלסבד, קליפורניה). חנות HBSS בטמפרטורת החדר ב 4 ° C לאחר הפתיחה. Aliquot ולאחסן את הפניצילין, סטרפטומיצין ב -20 ° C. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> מיקרוסקופ לנתח סטריאוסקופית (לייקה, Wetzlar, גרמניה). </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> Dissection כלים כולל דומון מלקחיים, מספריים איריס פיין (ישר), נויס באביב מספריים מוריה ® כפית (מחורר) (כלי מדעי בסדר, פוסטר סיטי, קליפורניה). </li></ol> 2. עובריים ריאות שלמות תרבות <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> השתנה Dulbecco הנשר בינונית: מערבבים מזין F-12 (D-MEM/F-12) (1X), נוזל, 01:01 מכיל L-גלוטמין, אבל שום חיץ HEPES. (Invitrogen, בקרלסבד, קליפורניה) בתוספת 50 יחידות / מ"ל ​​של סטרפטומיצין, פניצילין (Invitrogen, בקרלסבד, קליפורניה). שמור את הבקבוק DMEM/F-12 מן האור (למשל על ידי מכוסה בנייר אלומיניום) ולאחסן ב 4 ° C. Aliquot ולאחסן את הפניצילין, סטרפטומיצין ב -20 ° C. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> Nuclepore פוליקרבונט Track-Etch ממברנה, 8.0-מ ', 13 מ"מ (Whatman Nuclepore Track-Etch קרום (Whatman, Florham Park, NJ). </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> Nunclon צלחת פוליסטירן עם מכסים, 4 בארות (רוצ'סטר, ניו יורק). </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> Pipettes העברת פנויה, סטרילי (פישר סיינטיפיק, פיטסבורג, פנסילבניה). </li></ol><img src="/files/ftp_upload/2035/2035fig1.jpg" alt="איור 1" data-altupdatedat="1787634011000" data-alt="איור 1"> באיור 1. Dissection של E12 הריאות עובריים. (א) E12.5 העובר כולו במבט מהצד הנכון. (ב) forelimb ימין הוסר העובר. (C) מלקחיים המוחזקות על ידי יד שמאל מחזיקה את העובר קבוע בצלחת. החצים מצביעים על תוכנית של דיסקציה (ד ') ריאות עובריים טמונה האחורי ללב (מוסר) ו הקדמי לעמוד השדרה. נתון זה מראה את הריאות לאחר הסרת העור לב. (ה) הסרת הלוע מאפשרת הפרדה של הריאה שלמים מן העובר. (ו) רקמת הלוע והוושט חיצוניים ואת כבר גזוז משם. גזור E12.5 ריאות העובר עם קנה הנשימה הגרון שלם מוצג. (CR) באונה גולגולתי, (מד) באונה המדיאלי, (CA) באונה הזנב, (ACC) באונה אביזרים, (לה) באונה השמאלית. <img src="/files/ftp_upload/2035/2035fig2.jpg" alt="איור 2" data-altupdatedat="1787634011000" data-alt="איור 2"> איור 2. FGF9 גורם להרחבת mesenchyme ועל התרחבות של האפיתל בריאה לגדל במבחנה. (AC) E12.5 ריאות הוא גדל במשך 48 שעות העדר FGF9. הערה העלייה הסתעפות. (DF) E12.5 הריאות גדל במשך 48 שעות הנוכחות של FGF9. הערה התרחבות של האפיתל וגם mesenchyme מוקדם ככל לאחר 24 שעות של תרבות (E). לאחר 48 שעות (F), ההשפעה על האפיתל הוא מודגש עוד יותר. סולם בר: AF 400 מיקרומטר 4. פרוטוקול טקסט מלא לגישה זו ניסיוני זמין <a href="http://springerprotocols.com/Abstract/doi/10.1007/978-1-59745-019-5_5">הפרוטוקולים שפרינגר</a> .

<ol><li>Alescio, T., Cassini, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Induction+in+vitro+of+tracheal+buds+by+pulmonary+mesenchyme+grafted+on+tracheal+epithelium%5BTitle%5D)+AND+%22J+Exp+Zool%22%5BJournal%5D)">Induction in vitro of tracheal buds by pulmonary mesenchyme grafted on tracheal epithelium.</a> J Exp Zool. 150, 83-94 (1962).</li>
<li>Warburton, D., Schwarz, M., Tefft, D., Flores-Delgado, G., Anderson, K. D., Cardoso, W. V. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+molecular+basis+of+lung+morphogenesis%5BTitle%5D)+AND+%22Mech+Dev%22%5BJournal%5D)">The molecular basis of lung morphogenesis.</a> Mech Dev. 92, 55-81 (2000).</li>
<li>Spooner, B. S., Hardman, P., Paulsen, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Gravity+in+mammalian+organ+development%3A+differentiation+of+cultured+lung+and+pancreas+rudiments+during+spaceflight%5BTitle%5D)+AND+%22J+Exp+Zool%22%5BJournal%5D)">Gravity in mammalian organ development: differentiation of cultured lung and pancreas rudiments during spaceflight.</a> J Exp Zool. 269, 212-222 (1994).</li>
<li>Moral, del, M, P., De Langhe, S. P., Sala, F. G., Veltmaat, J. M., Tefft, D., Wang, K., Warburton, D., Bellusci, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Differential+role+of+FGF9+on+epithelium+and+mesenchyme+in+mouse+embryonic+lung%5BTitle%5D)+AND+%22Dev+Biol%22%5BJournal%5D)">Differential role of FGF9 on epithelium and mesenchyme in mouse embryonic lung.</a> Dev Biol. 293, 77-89 (2006).</li>
<li>Moral, D. el, M, P., Sala, F. G., Tefft, D., Shi, W., Keshet, E., Bellusci, S., Warburton, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((VEGF-A+signaling+through+Flk-1+is+a+critical+facilitator+of+early+embryonic+lung+epithelial+to+endothelial+crosstalk+and+branching+morphogenesis%5BTitle%5D)+AND+%22Dev+Biol%22%5BJournal%5D)">VEGF-A signaling through Flk-1 is a critical facilitator of early embryonic lung epithelial to endothelial crosstalk and branching morphogenesis.</a> Dev Biol. 290, 177-188 (2006).</li>
<li>Jaskoll, T. F., Don-Wheeler, G., Johnson, R., Slavkin, H. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Embryonic+mouse+lung+morphogenesis+and+type+II+cytodifferentiation+in+serumless%2C+chemically+defined+medium+using+prolonged+in+vitro+cultures%5BTitle%5D)+AND+%22Cell+Differ%22%5BJournal%5D)">Embryonic mouse lung morphogenesis and type II cytodifferentiation in serumless, chemically defined medium using prolonged in vitro cultures.</a> Cell Differ. 24, 105-117 (1988).</li>
<li>Seth, R., Shum, L., Wu, F., Wuenschell, C., Hall, F. L., Slavkin, H. C., Warburton, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Role+of+epidermal+growth+factor+expression+in+early+mouse+embryo+lung+branching+morphogenesis+in+culture%3A+antisense+oligodeoxynucleotide+inhibitory+strategy%5BTitle%5D)+AND+%22Dev+Biol%22%5BJournal%5D)">Role of epidermal growth factor expression in early mouse embryo lung branching morphogenesis in culture: antisense oligodeoxynucleotide inhibitory strategy.</a> Dev Biol. 158, 555-559 (1993).</li>
</ol>

אין ניגודי אינטרסים הכריז.

עכבר עובריים תרבות ריאות, מערכת הערכת המנגנונים המולקולריים של מסעף

Mouse Embryonic Lung Culture, A System to Evaluate the Molecular Mechanisms of Branching

מפרט ריאות בראשיתי כמו גם המורפוגנזה הסתעפות ויצירת שושלות תאים שונים ריאתי דורש אינטראקציה ספציפית של האנדודרם הריאה עם mesenchyme המקיפים שלה mesothelium. ריאות mesenchyme הוכח להיות מקור של אותות אינדוקטיבי עבור המורפוגנזה ריאות הסתעפות. אפיתל-mesenchymal-mesothelial אינטראקציות גם קריטי המורפוגנזה ריאות העובר. איברים עובריים מוקדמים תרבות ריאות היא מערכת שימושית מאוד ללמוד אפיתל-mesenchymal אינטראקציות. המורפוגנזה ההכנסות הן אפיתל mesenchymal בתנאים מסוימים, כי ניתן להשפיע בקלות במערכת זו (בהיעדר השפעה אימהית זרימת הדם). וחשוב יותר טכניקה זו ניתן לעשות זאת בקלות, התקשורת serumless תרבות הגדרה כימית. רווח והפסד של פונקציה יכולה להיות מושגת באמצעות חלבונים לידי ביטוי, וקטורים ויראליים רקומביננטי ו / או ניתוח של זנים עכבר מהונדס, antisense RNA, כמו גם גנים RNA מציאה הפרעה.

איברים עובריים מוקדמים תרבות ריאות היא מערכת שימושית מאוד ללמוד אפיתל-mesenchymal אינטראקציות. המורפוגנזה ההכנסות הן אפיתל mesenchymal בתנאים מסוימים, כי ניתן להשפיע בקלות במערכת זו.

ההגדרה של ראשית הריאה (lung primordial specification), כמו גם מורפוגנזה של הסתעפות והיווצרותם של שושלות תאים ריאתיים שונות, דורשים אינטראקציה ספציפית של...

בסרטון זה מוצגת שיטה לדיסקציה ולתרבית של ריאות עובריות של עכבר. הפרוצדורה מתחילה באיסוף של עובריים בשלבים E 11.5 או E 12.5. לאחר מכן, העובריים נפתחים והריאות נשליפות.לאחר מכן, הריאות מושתלות בממשק אוויר-נוזל (liquid air interface) ומודגרות בעקבות התרבית. ניתן להבחין בשינויים בצמיחה ובפיצול של המזנכימה והאפיתל של ריאת העובר בתגובה לטיפולים ספציפיים באמצעות מיקרוסקופ סטריאו. שלום, אני דייוויד וור בארטון.אני מנהל את התוכנית לביולוגיה התפתחותית ורפואה רגנרטיבית במכון המחקר באן בבית החולים לילדים, לוס אנג'לס. ואני ג'אן קארו, פוסט-דוקטורנט בכיר במעבדתו של ד"ר וור בארטון. היום נדגים לכם טכניקה לבידוד ריאות עובריות של עכבר והצבתן בתרבית איברים.טכניקה זו התפתחה מהתיאור המקורי של Tina Jaco Halkin ו-Pablo bring us בבית הספר לרפואת שיניים של USC לפני כ-20 שנה. אנו משתמשים בהליך זה במעבדה שלנו כדי לחקור מורפולוגיה של הסתעפות lamb. אז בואו נתחיל.ביום 11.5 או 12.5 לאחר ההמהלה, הנח עכברה פגית שהוקרבה במועד קבוע באמצעות פחמן דו-חמצני על גבה תחת מנדף זרימה למינרית. רסס ב-70% ethanol. בצע חתך בבטן.לאחר מכן, תוך כדי החזקת רגליו האחוריות של בעל החיים, הסר את העור על ידי משיכה כלפי מעלה. פתח את חלל הפריטונאום והוצא את הרחם. העבר את הרחם לשפופרת קונית של 50 milliliter מלאה ב-hanks balanced salt solution קר או HBSS, ונער בעדינות במשך שתי דקות כדי לשטוף את הדם.בשלב הבא, העבירו את הרחם לצלוחית פטרי תחת מיקרוסקופ סטריאוסקופי לדיסקציה. בעזרת מספרי קפיץ, חתכו את דופן הרחם כדי לשחרר את העוברים. לאחר מכן, בעזרת כף מחוררת, אספו את העוברים והעבירו אותם לצלוחית פטרי המכילה HBSS והניחו על קרח.המשיכו לעבוד תחת מיקרוסקופ דיסקציה סטראוסקופי והתחילו בניתוח של ריאות עובריות. התחילו בהנחת העובר על צדו השמאלי. בעזרת פינצטה, הסירו את הגפה הקדמית הימנית כאשר הפינצטה מוחזקת ביד שמאל.חתכו את העובר החל מפתיחת הגפה והסירו את העור. שלב זה יאפשר לכם לראות את האיברים הפנימיים ולאתר את הלב והריאות עבור השלב הבא. הסירו את הלב.הריאות העובריות ממוקמות אחורית ללב וקדמית לעמוד השדרה. לאחר מכן, הפרד את הריאה השלמה מהעובר. לאחר מכן, הסר רקמות עודפות ואת הוושט.לאחר הוצאת הריאות, השתמש בפיפטת העברה סטרילית כדי להעביר אותן לצלחית פטרי המכילה HBSS קר על קרח. לכל באער של צלחית פוליסטירן ללא שכבת ציפוי (no clone delta) הוסף 0.5 עד 1 ml של D-M-E-M-F 12 מועשר ב-50 units/ml של penicillin streptomycin. לאחר מכן, הנח ממברנת פוליקרבונט עם נקבים (track etch) מעל המצע, כאשר הצד המבריק פונה כלפי מטה והצד המחוספס פונה כלפי מעלה.השתמשו בפיפטת העברה סטרילית כדי להניח ריאה עוברית מנותחת על גבי ממברנת Nucleo polycarbonate track etch. בעזרת מיקרוסקופ סטריאו, כווננו את מיקום הריאה העוברית. הריאה העוברית צריכה להיות בעלת קנה נשימה שלם המוצב במצב ישר, כפי שמוצג כאן.כדי להבטיח כי בכל הריאות שורר אותו לחץ פנימי, העבירו את הצלחת לאינקובטור תאים וטפחו למשך הזמן הרצוי. במקרה זה, ריאות של עוברים ביום E 12.5 גודלו בנוכחות או בהיעדר FGF9. FGF9 הוא חבר במשפחת גורמי הגדילה של הפיברובלסטים, המעודד התרחבות של המזנכימה ודילטציה של האפיתל בריאות הגדלות in vitro לאחר 48 שעות.בהיעדר FGF nine, נצפית עלייה בפיצול הענפים. תמונות אלו הן צילומים של ריאה עוברית שצולמו תחת מיקרוסקופ סטריאו. לעומת זאת, ריאות שגודלו במשך 48 שעות בנוכחות FGF nine מראות אפיתל מורחב ומבנה רשתי.לאחר 24 שעות של תרבית. לאחר 48 שעות, ההשפעה על האפיתל בולטת אף יותר. כך הדגמנו בפניכם כיצד להכין תרביות איברים מריאה של עכבר עוברי.בעת ביצוע פרוצדורה זו, חשוב לזכור להוציא את הריאה מהעובר מהר ככל האפשר כדי להפחית את התדרדרות הרקמה. תודה שצפיתם. אנו מקווים שתמצאו טכניקה זו מועילה.בהצלחה בניסויים שלכם.

mouse-embryonic-lung-culture-system-to-evaluate-molecular-mechanisms

Research

JoVE Journal

Biology

ביולוגיה

כאן אנו מתארים פרוטוקול לבידוד והתרבות של Murine לתאי אנדותל ריאתי. שיטה זו כוללת מכונאי דיסוציאציה האנזימטית רקמת הריאות, כמו גם תהליך צעד 2-טיהור באמצעות אנטי PECAM-1 ואנטי ICAM-2 נוגדנים מצומדות כדי חרוזים מגנטיים, אשר מייצר אוכלוסיה טהור תא האנדותל של כלי הדם בעיקר מקור.

בידוד תרבות לתאי אנדותל ריאתי מעכברים ילודים

כוחות מכניים לשחק תפקיד מפתח בהתפתחות הריאות ופגיעה ריאות. כאן אנו מתארים שיטה לבודד העובר מכרסמים ריאה מסוג תאים השנייה אפיתל fibroblasts ולחשוף אותם באמצעות גירוי...

מערכת ניסיונית ללמוד Mechanotransduction ב לתאי ריאה עוברית

אנו מציגים מערכת במבחנה עכבר עוברית erythroblast כבד תרבות שמנתחת את השלבים המוקדמים ומאוחרים של erythropoiesis מסוף השלבים. מערכת זו מאפשרת ניתוח פונקציונלי של גנים מסוימים בשלבי התפתחות שונים.

עכבר עוברי כבד מערכת התרבות לנתח פונקציות היעד ג&#39;ין בשלבים המוקדמים ומאוחרים של המסוף erythropoiesis

שימוש עכברי כתב מצמידים את ההר שלם וסעיף מכתים, מיקרוסקופיה מבחני vivo מקל על הניתוח של המנגנונים העומדים בבסיס הדפוסים הנורמלים של דרך הנשימה. כאן אנו מתארים כיצד טכניקות אלה תרמו ניתוח איתות Wnt במהלך התפתחות קנה נשימה.

לימוד Wnt איתות במהלך דפוסים של איירווייס ניצוח

פרוטוקול זה מפנה ביעילות עכבר גזע עוברי תא נגזרות האנדודרם סופי להבשיל דרכי נשימה תא אפיתל. טכניקת בידול זה משתמשת 3 ממדי פיגומי ריאות decellularized לכוון מפרט שושלת ריאות, באווירת התרבות מוגדרת, סרום ללא.

דור של אפיתל דרכי נשימת עכבר נגזרות ESC תאי שימוש decellularized פיגומי ריאות

המאמר מתאר הבחנה מכוונת צעד של תאי גזע פלוריפוטנטים המושרים לאורגנואידים תלת ממדיים שלמים של ריאות המכילים תאי ריאה אפיתל פרוקסימליים ודיסטליים יחד עם מזנכיים.

ייצור אורגנוידים של ריאות שלמות תלת-ממדיות מתאי גזע פלוריפוטנטיים מושרים למידול ביולוגיה התפתחותית של ריאות ומחלות

הפרוטוקול מתאר ביוריאקטור התומך בהדמיה המאפשר הסרה סלקטיבית של האפיתל האנדוגני מקנה הנשימה של החולדה והתפלגות הומוגנית של תאים אקסוגניים על פני השטח של לומן, ולאחר מכן תרבית חוץ גופית ארוכת טווח של מבנה רקמת התא.

ביוריאקטור מונחה הדמיה ליצירת רקמת נתיב אוויר מהונדסת ביולוגית

הפרוטוקול מציג שיטה להפקת אורגנואידים של ריאה אנושית מרקמות ריאה ראשוניות, הרחבת האורגנואידים של הריאה וגרימת התמיינות פרוקסימלית ליצירת אורגנואידים תלת-ממדיים ודו-ממדיים של דרכי הנשימה, המנצלים בנאמנות את אפיתל דרכי הנשימה האנושיות.

ביסוס אורגנואידים של ריאות אנושיות והתמיינות פרוקסימלית ליצירת אורגנואידים בוגרים של דרכי הנשימה

כאן, אנו מתארים פרוטוקול פשוט וחסכוני לביצוע כימות בלתי משוחד של צפיפות כלי הדם הריאתיים עבור רקמת ריאה של עכברים שלמים באמצעות צביעה יחידה של איזולקטין B4.

כימות צפיפות כלי הדם הריאתיים בעכברים על פני אונות

בדו"ח זה אנו מתארים שיטה לבידוד והתרבות של נישה הקדמון התא הכליות עכבר עובריים שניתן להשתמש בהם כדי ללמוד מסלולי איתות ויסות גזע / ובתאים של הכליה המתפתחת. אלו תאים בתרבית נגישים מאוד מולקולה קטנה וטיפול חלבון רקומביננטי, והוא חשוב גם התמרה ויראלית, המאפשרת מניפולציה יעילה של המסלולים מועמד.

בידוד והתרבות של תאים מאזור nephrogenic של הכליה עכבר עובריים

למד שיטה לבידוד וגידול ריאות עובריות בעכבר לחקר אינטראקציות אפיתל-מזנכימה. השיטה מאפשרת תצפית על שינויים בצמיחה ובהתפצלות בתגובה לטיפולים ספציפיים.

עכבר עובריים תרבות ריאות, מערכת הערכת המנגנונים המולקולריים של מסעף

גלה סרטונים נוספים