אנציקלופדיית הניסויים של JoVE
מדעי המוח
0 צפיות • 1:30 דק׳ • March 4th, 2025
קחו לדוגמה חולדה שזרימת הדם בה מוגבלת להמיספרה הימנית של המוח, מה שגורם לנזק ל-BBB.
להזריק תוך ורידי אלבומין מתויג פלואורופור, אשר חוצה את BBB פגום, להגיע למוח.
להשיג קטעי מוח קבועים כימית.
הוסף מאגר חוסם כדי למנוע קשירת נוגדנים לא ספציפיים.
יש למרוח נוגדנים מצומדים לפרוקסידז המכוונים לאלבומין המתויג כפלואורופור.
הוסף מצע כרומוגני, אשר peroxidase ממיר למשקע צפוף אלקטרונים.
הציגו אוסמיום טטרוקסיד כדי לתקן שומנים בקרום ולשפר את הניגודיות.
יש לייבש את המדורים עם עלייה בריכוזי האלכוהול.
הוסף אורניל אצטט, אשר נקשר חומצות גרעין וחלבונים כדי להגדיל את הניגוד.
יש להתייבש שוב עם עלייה בריכוז האלכוהול, ולסיים עם פרופילן אוקסיד להטמעת שרף. הטמע את המקטעים בשרף.
לזהות מיקרוסקופית ולהסיר את האזורים מוכתמים כרומוגן.
הטמיעו מחדש חלקים אלה בשרף והכינו פרוסות דקות במיוחד.
הרכיבו את הפרוסות על רשתות מיקרוסקופ אלקטרונים (EM).
יש להכתים עם עופרת ציטראט כדי לשפר את ניגודיות המטריקס החוץ תאית.
המשך עם EM כדי לבחון את שלמות BBB.