אנציקלופדיית הניסויים של JoVE
מדעי המוח
0 צפיות • 1:17 דק׳ • March 4th, 2025
הפראן סולפט, גליקוזאמינוגליקן, נמצא ברבדים העמילואידיים הקשורים למחלת אלצהיימר.
כדי לדמיין הפראן סולפט, התחל עם קטע רקמת היפוקמפוס אנושית חולה המכיל פלאקים עמילואיד.
תקן את קטע הרקמה באמצעות קיבוע כדי לשמר מבנים תאיים.
לאחר מכן, לטפל ברקמה עם סוכן חוסם כדי למנוע קשירת נוגדנים לא ספציפיים.
הוסיפו חומר ניקוי לא יוני כדי לחדור את קרומי התאים.
לדגור על הרקמה עם נוגדנים ראשוניים המכוונים באופן ספציפי הפראן סולפט בתוך פלאקים עמילואיד.
יש לשטוף נוגדנים ראשוניים לא קשורים.
לאחר מכן, הוסף נוגדנים משניים מצומדים פלואורופור, אשר נקשרים לנוגדנים הראשוניים הקשורים להפראן סולפט.
הסר נוגדנים לא מאוגדים.
מכתימים את הגרעינים באמצעות צבע פלואורסצנטי.
לבסוף, השתמש במיקרוסקופ פלואורסצנטי כדי לדמיין את הפראן סולפט המסומן באופן פלואורסצנטי בתוך רבדי העמילואיד והגרעינים בצבע כחול באזור הרקמה החולה.