JoVE Encyclopedia of Experiments
מדעי המוח
0 צפיות • 1:29 דק' • March 4th, 2025
התחל עם תרבית משותפת של אסטרוציטים והתמיינות צברים של תאי גזע עצביים באמצעי התמיינות (differentiation).
אסטרוציטים מפרישים מולקולות איתות המשפרות את ההבשלה וההתמיינות של תאי גזע לנוירונים ואסטרוציטים.
לאחר מכן, להוסיף קיבוע כדי לשמר את מבנה התא, ואחריו שטיפה.
הוסף תמיסת דטרגנט כדי לחדור את קרום התא, ולאחר מכן לשטוף.
הציגו מגיב חוסם כדי לחסום אתרי קשירה לא ספציפיים.
הוסיפו נוגדנים ראשוניים שנקשרים באופן ספציפי לסמנים חלבוניים של נוירונים בוגרים ואסטרוציטים. יש לשטוף כדי להסיר נוגדנים לא קשורים.
לאחר מכן, הוסיפו נוגדנים משניים בעלי תווית פלואורסצנטית ירוקה ואדומה ודגרו. נוגדנים אלה נקשרים לנוגדנים הראשוניים המתאימים, ומספקים פלואורסצנטיות מובהקת לתאים.
הכניסו צבע גרעיני כדי להכתים את הגרעינים בכחול.
לבסוף, התבוננו בתאים באמצעות מיקרוסקופ קונפוקלי.
בתוך האגרגטים, תאים פלואורסצנטיים ירוקים מצביעים על נוירונים בוגרים, בעוד תאים פלואורסצנטיים אדומים מייצגים אסטרוציטים. זה מאשר אינטראקציות תא-תא להקל על התבגרות עצבית.