גידול חיידקי מגנטוספירילום והערכת התנהגותם המגנטוטקטית

מגנטוספירילום הם חיידקים נעים המשגשגים בחמצן נמוך.

הם מייצרים ננו-גבישים מגנטיים הפועלים כדיפולים מגנטיים, ועוזרים להם לנווט את השדה הגיאומגנטי לעבר ריכוז חמצן אופטימלי.

כדי לתרבית מגנטוספירילום, קח מדיה נוזלית נטולת חמצן. הזרקו נפח מבוקר של חמצן כדי ליצור תנאים מיקרואירוביים, להוסיף חיידקים ולדגור על האוויר.

עם הזמן העכירות עולה, מה שמעיד על צמיחת חיידקים.

להכנת תרבית מוצקה למחצה, השתמש במדיום המכיל מחוון חמצן ורוד שהופך לחסר צבע באזור דל החמצן, ומסמן את הממשק החמצוני-אנוקסי (OAI)

בריכוז חמצן

אופטימלי.

לחסן את החיידקים ב-OAI, לאטום את הצינור ולדגור.

החיידקים מתרבים ויוצרים רצועה הנודדת כלפי מעלה ככל שהחמצן נצרך.

כדי להעריך התנהגות מגנטוטקטית, הכינו טיפה תלויה של החיידקים המתורבתים והניחו מגנט לידה.

תחת מיקרוסקופ, התבונן בשחייה כיוונית לכיוון המגנט והיפוך התנועה כאשר המגנט מתהפך.

כדי לחסן את הזנים MSR-1, AMB-1 ו-MS-1 במדיום נוזלי, יש להבעיר את החלק העליון של בקבוקי החמצן והמדיום הטרי על ידי מריחת אתנול על הפקקים והעברתם דרך הלהבה של מבער בונסן .

בעזרת מזרק סטרילי ומחט, הוציאו מיליליטר אחד של חמצן מבקבוק החמצן והעבירו אותו לבקבוק הבינוני הטרי. אם משתמשים בחיסון מתרבית אחרת שגדלה בבקבוק זכוכית, הדליקו את שני הבקבוקים. לאחר מכן חסנו מיליליטר אחד של התרבות הישנה למדיום הטרי.

דגרו את התרבית בטמפרטורה של 32 מעלות צלזיוס, וחסנו אותה למדיום טרי לאחר ארבעה עד שבעה ימים. כדי לחסן MSR-1 בשיפוע חמצן, מדיום מוצק למחצה, ודא שהצינור של מדיום טרי מציג OAI מוגדר היטב, הממומש על ידי ממשק ורוד עד חסר צבע כסנטימטר עד שלושה סנטימטרים מתחת לפני השטח של המדיום. אם החיסון מגיע מתרבית חצי מוצקה של שיפוע ריכוז חמצן אחר, קצור את החיידקים על ידי שאיבת 50 מיקרוליטר מהתרבית עם קצה פיפטה סטרילי המונח על הרצועה שנוצרה על ידי החיידקים.

חסנו לאט את החיידקים הללו ב-OAI במדיום הטרי, הימנעו מהפרעה לממשק. אטמו את הצינור ותנו לחיידקים לגדול בין 25 מעלות צלזיוס ל-30 מעלות צלזיוס. כדי להבטיח שהחיידקים יהיו מגנטיים ומודאליים כאחד, הניחו טיפת תרבית על החלקת כיסוי המיקרוסקופ.

הפוך את פתק הכיסוי והתקן אותו על טבעת O המונחת על מגלשת זכוכית. ודא שהטיפה לא נוגעת בשקופית התחתונה. הניחו את הטיפה התלויה מתחת למיקרוסקופ והתמקדו בקצה הטיפה.

מקמו את הקוטב הדרומי של מגנט קרוב לקצה הזה, וצפו בחיידקים שוחים לכיוון הקצה. הפוך את המגנט כדי לגרום להם לשחות בכיוון ההפוך.