אנציקלופדיית הניסויים של JoVE
מיקרוביולוגיה
0 צפיות • 2:36 דק׳ • September 26th, 2025
התחל עם בקבוק המכיל קפיץ ומלא במדיום עשיר בחומרים מזינים התומך במחזור החיים המלא של חיידקי Streptomyces venezuelae .
לחסן את נבגי החיידקים לתוך המדיום ולדגור בניעור כדי להבטיח אוורור תקין ופיזור חומרים מזינים.
הקפיץ משפר את הערבוב, תומך בצמיחה אחידה ועקבית.
הנבגים סופגים חומרים מזינים ונובטים, ומייצרים צינורות נבט המשתרעים בקצותיהם, מסתעפים לקורות ומתפתחים למבנה תפטיר.
כאשר חומרי המזון הופכים מוגבלים, האורגניזם מייצר קורים ספורוגניים מיוחדים המתחלקים ומייצרים נבגים, תאי רבייה רדומים.
התבונן תחת מיקרוסקופ ניגוד פאזה כדי לאשר את נוכחותם של שברי תפטיר ונבגים.
צנטריפוגה בתרבית כדי לגלול את פסולת התפטיר הכבדה יותר, ולהשאיר נבגים קלים יותר בסופרנטנט.
העבירו את הסופרנטנט למיקרו-צינור והניחו אותו על קרח כדי למנוע נביטה מוקדמת.
מדללים את תרחיף הנבגים במדיום טרי ומאחסנים אותו בתנאים קרים עד לשימוש נוסף.
יש לחסן 30 מיליליטר של מדיום גידול נוסף עם 10 מיקרוליטר של נבגים מזן S.venezuela להדמיה. לצמיחה עקבית ונבגים של התאים, השתמש בבקבוק מבולבל או בבקבוק המכיל קפיץ כדי לאפשר אוורור מספיק.
תרבית התאים במשך 35 עד 40 שעות בטמפרטורה של 30 מעלות צלזיוס ו -250 סל"ד. כשתהיה מוכן, אתה אמור להיות מסוגל לראות את שברי התפטיר והנבגים באמצעות מיקרוסקופ ניגודיות פאזה המותקן בנוזל. צנטריפוגה של מיליליטר אחד של התרבית בצנטריפוגה שולחנית ב-400 פעמים G למשך דקה אחת כדי לגלול את התפטיר ואת שברי התאים הגדולים יותר.
לאחר מכן העבירו כ-300 מיקרוליטר של הסופרנטנט המכיל תרחיף של נבגים, לצינור חדש של 1.5 מילימטר והניחו את הצינור על קרח.