התנהגות נחילים של Pseudomonas aeruginosa תחת עקה אנטיביוטית

הנח צלחת אגר על תבנית מודפסת כדי ליישר את המרכז ושש נקודות לוויין במרווחים שווים.

זהו תרבית Pseudomonas aeruginosa בריאה במרכז הצלחת.

הניחו תערובת של אותה תרבית עם אנטיביוטיקה על כתמי הלוויין.

מכסים את הצלחת במכסה שחור כדי להפחית את השתקפויות האור.

הנח אותו על סורק בתוך חממה עם טמפרטורה ולחות קבועים כדי לשמור על צמיחת חיידקים.

חיידקים בריאים במרכז גדלים ומתפשטים החוצה בדפוסי נחילים דמויי קנוקנות המקרינים על פני השטח של האגר.

חיידקים מעורבבים עם האנטיביוטיקה עוברים לחץ ומשחררים אותות כימיים המתפזרים דרך האגר.

כאשר הנחיל מגיע לאזורים אלה, הוא חש את אותות הלחץ.

זה מעורר תגובת הימנעות, ומפנה את צמיחת החיידקים הרחק מהאזורים החשופים לאנטיביוטיקה.

הדמיית זמן-lapse מראה צמיחת חיידקים ושינויים בהתרחבות הנחיל תחת לחץ אנטיביוטי.

לציפוי אגר נחילים, החזק קצה פיפטה P20 עמוס בחמישה מיקרוליטר מתרבית P. aeruginosa לילה בזווית של 10-45 מעלות 2-1/2 סנטימטרים מעל מרכז צלחת נחיל אחת ולחץ על הבוכנה עד לעצירה הראשונה תוך נגיעה באגר עם טיפת הנוזל בלבד. השתמש בתבנית כדי למקם את הנקודה באופן עקבי על פני צלחות האגר השונות.

כדי לבצע טיפולים אנטיביוטיים, ערבבו 30 מיקרוליטר של P. aeruginosa בתרבית לילה עם הריכוז והנפח המתאימים של האנטיביוטיקה המעניינת והוסיפו מיד שישה מיקרוליטרים של החיידקים שטופלו באנטיביוטיקה בשישה מיקו