אינדוקציה של התמיינות של Vibrio parahaemolyticus לתאי נחיל
אנציקלופדיית הניסויים של JoVE
מיקרוביולוגיה
0 צפיות • 3:55 דק׳ • September 26th, 2025
התחל עם מדיום אגר מותך התומך בצמיחת חיידקים.
הוסף כלאטור ברזל כדי לרוקן ברזל חופשי, והשלם את המדיום בסידן.
שופכים את המדיום לתבשיל, מניחים לו להתמצק ואז מייבשים אותו כדי למנוע לחות שיורית.
קחו תרבית מרק של Vibrio parahaemolyticus, חיידק מולקה.
במדיה נוזלית, החיידקים קיימים בצורת שחיין קצר בצורת מוט עם שוט.
זהה את התרבית על הצלחת ואפשר לה להתייבש כדי לקדם מגע חיידקי עם פני השטח.
אוטמים את המנה ודוגרים, ומאפשרים לתוצרי לוואי מטבוליים נדיפים מהחיידקים להצטבר.
מגע עם פני השטח, הגבלת ברזל, זמינות סידן ותוצרי לוואי מצטברים גורמים לביטוי גנים, מה שמפעיל את ההתמיינות לתאי נחיל מוארכים המכילים דגלים לרוחב, המאפשרים תנועה על פני משטחים מוצקים.
תאי הנחיל מתרחבים החוצה ויוצרים התפרצויות נחיל המורכבות מתאים ממוינים לחלוטין, מה שמעיד על התמיינות מוצלחת.
כדי להכין את תמיסת האגר להכנת צלחות נחילים, יש להשעות ארבעה גרם עירוי לב, או אבקת אגר H. I. ו-100 מיליליטר מים מזוקקים כפולים.
מרתיחים בזהירות את תמיסת ה- H. I. agar במיקרוגל, מנערים את הבקבוק מדי פעם עד להמסת האבקה. חיטוי תמיסת האגר בחום של 121 מעלות צלזיוס למשך 20 דקות, מצננים את תמיסת האגר ל 60 עד 65 מעלות צלזיוס תוך ערבוב מתמיד. השלב הבא כולל טיפול ב-2, 2'-Bipyridyl, שהוא רעיל מאוד, ולכן יש ללבוש כפפות ומשקפי מגן.
הוסף 2, 2'-Bipyridyl לריכוז סופי של 50
צפו בתמליל המלא וקבלו גישה לאלפי סרטונים מדעיים