בדיקת שיטפון שתילים לבדיקת עמידות חיידקים בעגבניות

כדי לבדוק עמידות חיידקים בזני עגבניות שונים, התחל עם שתילי עגבניות בני 10 ימים הגדלים בתנאים סטריליים.

שתילים אלה מציגים עלים אמיתיים מתעוררים ושורשים מבוססים.

הציפו את שני הזנים בחיידקים פתוגניים מעורבבים עם חומר פעילי שטח כדי להקל על התפשטות אחידה של החיסון על פני הצמח. הטה וסובב את הצלחת כדי למקסם את מגע השתיל עם החיסון.

הסר את עודפי החיסון, אטום מחדש את הצלחות ודגר אותן בתא גידול.

החיידקים נכנסים דרך הפיוניות ומתיישבים באפופלסט, החלל החוץ-תאי בין תאי העלים.

החיידקים מזריקים חלבוני אפקטור לתאי הצמח כדי לדכא את התגובות החיסוניות של הצמח.

הזנים הרגישים אינם מצליחים לזהות את האפקטורים הללו, מה שמאפשר התפשטות חיידקים ונזק לרקמת הצמח הנגרמת על ידי רעלן חיידקים.

הזנים העמידים מזהים את האפקטורים ומייצרים מיני חמצן תגובתיים כדי להרוג את החיידקים.

לאחר הדגירה, זנים עמידים מראים צמיחה מתמשכת, בעוד שזנים רגישים מציגים התפתחות עצורה.

העבירו את הצלחות עם השתילים בני עשרה ימים מתא הגידול לארון הבטיחות הביולוגית והוציאו את סרט הניתוח. לאחר מכן העבירו שישה מיליליטר חיסון לכל צלחת.

דחפו בעדינות את השתילים לחיסון בעזרת קצה פיפטה והפעל טיימר למשך שלוש דקות. החזיקו צלחת אחת בכל יד והטו את החלק הקדמי של הצלחת כלפי מטה כדי להטביע את הקוטילונים והעלים של השתילים. העבירו את החיסון מצד לצד חמש עד שבע פעמים, ולאחר מכן הטו את הצלחות לאחור כדי לכסות את השורשים בחיסון.

הטה שוב את הצלחות כלפי מטה וחזור על המחזור למשך שלוש דקות בסך הכל. יוצקים את החיסון מהצלחות, מניחים אותם על משטח ישר ושופכים את כל החיסון שנותר בפעם השנייה. עטפו מחדש את הצלחות והניחו אותן בחזרה בתא הגידול.