JoVE Encyclopedia of Experiments
מיקרוביולוגיה
0 צפיות • 2:46 דק' • September 26th, 2025
התחל בתרבית נוזלית של Sporosarcina pasteurii במדיום עשיר בחומרים מזינים.
קח תמיסת מלאי העשרה המכילה אוריאה, סידן כלורי, אמוניום כלוריד ונתרן ביקרבונט.
הוסף חלק ממדיום ההעשרה לצינור תרבית החיידקים.
מערבולת את הצינורות כדי לערבב את תאי החיידקים והחומרים המזינים באופן אחיד.
דגרו על התרבויות המועשרות בחממה שאינה רועדת.
Sporosarcina pasteurii, חיידק אדמה גרם חיובי, מייצר את האנזים אוראז בנוכחות אוריאה.
אוראז מפרק אוריאה ליוני אמוניום וקרבונט.
אמוניום כלוריד ונתרן ביקרבונט מסייעים בשמירה על pH בסיסי התומך במשקעים מינרליים.
יוני קרבונט מגיבים עם יוני סידן מסידן כלורי ליצירת סידן פחמתי בלתי מסיס.
משקעים אלה מתחילים להיווצר סביב תאי החיידקים ומתגבשים לקלציט, צורת גביש יציבה.
גבישים אלה מתיישבים כמשקעים לבנים בתחתית הצינור, ומדגימים משקעי קלציט המושרים מיקרוביולוגית, או MICP.
העבירו תשעה מיליליטר מהתרבית הנוזלית המוכנה למספר צינורות צנטריפוגה מעוקרים של עשרה מיליליטר. הכן 100 מיליליטר מתמיסת מלאי ההעשרה החיצונית באמצעות איזון אנליטי כדי למדוד בזהירות שני גרם לליטר אוריאה, גרם אחד לליטר אמוניום כלוריד, 212 מיליגרם לליטר נתרן ביקרבונט ו -280 מיליגרם לליטר סידן כלורי.
לכוס עם מדיום טרי, מערבבים את כל המרכיבים למעט האוריאה, והחיטוי. לאחר החיטוי, מערבבים את האוריאה עם מיליליטר אחד של מדיום טרי ומעבירים את התמיסה דרך מזרק המצויד במסנן של 0.2 מיקרומטר לפני הוספה למדיום ההעשרה. הוסף מיליליטר אחד ממדיום ההעשרה עם תוספים לצינורות הצנטריפוגה המעוקרים המכילים תשעה מיליליטר מהתרבות המוכנה.
מערבלים כל צינור ודוגרים באינקובטור שאינו רועד ב-30 מעלות צלזיוס. עקוב אחר כל היחידות באופן קבוע להתחלת משקעים.