אנציקלופדיית הניסויים של JoVE
מיקרוביולוגיה
0 צפיות • 3:16 דק׳ • September 26th, 2025
התחל עם דגימת מים המכילה חיידקים הנישאים במים, וסנן אותה כדי להסיר פסולת.
העבירו את התסנין המדולל לצלחות אגר דלות בחומרים מזינים, כל אחת בתוספת אנטיביוטיקה ספציפית. מורחים את הסינון ודוגרים.
חיידקים הנושאים גן ספציפי לעמידות לאנטיביוטיקה גדלים על לוחות האנטיביוטיקה המתאימים ויוצרים מושבות.
ספרו את המושבות כדי לקבוע את היחידות היוצרות מושבה (CFUs), המייצגות את מספר החיידקים העמידים לאנטיביוטיקה.
בחר מושבה אחת מכל צלחת ותלה אותה במים מזוקקים סטריליים.
מחממים את התרחיף כדי לשחרר את התאים ולשחרר תוכן תוך-תאי, כולל DNA חיידקי המכיל את הגן העמיד לאנטיביוטיקה.
צנטריפוגה של הצינורות כדי להפריד את הפסולת ולאסוף את הסופרנטנט שמכיל דנ"א.
הוסף ריאגנטים להגברה ל- DNA שחולץ.
הנח את הצינורות במחזור תרמי והפעל את התוכנית כדי להגביר אזור ספציפי של DNA חיידקי.
ה-DNA המוגבר מוכן לניתוח רצף כדי לזהות את גן העמידות לאנטיביוטיקה.
עבד את דגימת המים באופן אספטי על ידי סינון דרך מטלית מוסלין סטרילית כדי להסיר כל חומר חלקיקי. לאחר מכן, יש לדלל באופן סדרתי את דגימת המים המסוננים להמשך ניתוח. כדי לקבוע את ספירת החיידקים העמידים לאנטיביוטיקה, הוסף את האנטיביוטיקה בנפרד לצינורות המכילים 20 מיליליטר אגר R2A מותך סטרילי ששונה בערך ב-40 מעלות צלזיוס.
מערבבים לערבב באופן אחיד ויוצקים על צלחות פטרי סטריליות לפני שהאגר מתמצק. מ
צפו בתמליל המלא וקבלו גישה לאלפי סרטונים מדעיים