JoVE Encyclopedia of Experiments
מיקרוביולוגיה
0 צפיות • 2:02 דק' • September 26th, 2025
התחל עם צינור המכיל תרבית חיידקים מהונדסת גנטית כדי לשמש כחיישן ביולוגי.
החיידקים מכילים מערכת פלסמיד עם חלבון פלואורסצנטי אדום או גן RFP בשליטת מקדם. המקדם מדוכא על ידי חלבון הרגיש לנוכחות של אנליט ספציפי, כמו עופרת.
השתמש במגבון על בסיס אתנול כדי לנגב היטב משטח בדיקה, ולאסוף את האנליט הקיים על פני השטח.
חותכים קטע קטן ממרכז המגבון וטובלים אותו לחלוטין בתרבית החיידקים.
דגירה כדי להקל על דיפוזיה של האנליט מהמגבון לתרבית החיידקים.
האנליט נכנס לחיידקים ונקשר לחלבון המדכא, משנה את הקונפורמציה שלו ומפעיל את המקדם.
המקדם המופעל יוזם שעתוק גנים, מה שמוביל לביטוי ה-RFP.
מדוד את הקרינה החיידקית כדי להבטיח את נוכחות האנליט על משטח הבדיקה.
השתמש במגבון על בסיס אתנול המיועד להסרת עופרת כדי לנגב את כל משטחי הידיים, כולל בין האצבעות. אחסן את המגבונים בשקית אטומה עם תווית מתאימה עד לניתוח. השתמש במגבון על בסיס אלכוהול כדי לנגב את כל המשטחים הגדולים לבדיקה.
השתמש בתחליף כותנה רטוב באתנול כדי לנגב את כל המשטחים הקטנים לבדיקה. לבישת כפפות נקיות ושימוש במספריים שנוקו באלכוהול, חותכים קטע שנמצא כסנטימטר מרובע ממרכז המגבון. לאחר מכן, הניחו את חתיכת המגבון החתוכה, או צמר גפן, ישירות לתוך צינור תרבית המכיל שני מיליליטר של חיידקי החיישן, וודאו שהיא שקועה לחלוטין במרק.