מיקרוסקופ ניגוד פאזה להערכת מוטציות התפתחותיות בסטרפטומיצס

התחל עם לוחות אגר המכילים מושבות של זנים פראיים ומוטנטיים של Streptomyces coelicolor, חיידק אדמה נימי.

הנח כיסוי סטרילי על אזור של צמיחת מושבה צפופה שבו חוטי אוויר, שהם חוטים המשתרעים מעל פני המושבה, נראים בבירור.

לחץ בעדינות על החלקת הכיסוי כדי להעביר את חוטי האוויר והנבגים הנלווים אל משטח הכיסוי.

לאחר מכן, קח שקופית מיקרוסקופ עם אמצעי הרכבה והתקן את תא הכיסוי עם הצד כלפי מטה כדי לשמר את מבני החיידקים.

הנח את השקופית על במת מיקרוסקופ, הוסף טיפת שמן טבילה על הכיסוי ויישר את המטרה.

באמצעות מיקרוסקופ ניגודיות פאזה, רכשו תמונות של חוטי האוויר מזנים פראיים ומוטנטיים כאחד.

חוטים מסוג בר מציגים נבגים בגודל אחיד ומרווחים באופן קבוע.

לעומת זאת, זנים מוטנטיים מציגים פגמים, כגון חוטים בולטים, נבגים לא סדירים או נבגים ליזים, החושפים הבדלים פנוטיפיים התפתחותיים בין הסוג הפראי למוטאנטים.

כדי להכין הרמת כיסוי של גידול חיידקים, השתמש בפינצטה סטרילית כדי להרים כיסוי סטרילי ולהניח את הכיסוי על צלחת אגר MS שבה צמיחת החיידקים צפופה. בעזרת פינצטה, לחץ בעדינות על גב הכיסוי כדי להבטיח העברה מספקת של נבגי חיידקים ותפטיר אווירי. הרם את הכיסוי מהצלחת והנח אותו בזווית של 45 מעלות כשחומר התא פונה אל פני השטח של שקופית מיקרוסקופ המכילה טיפה של 15 מיקרוליטר של 50% גליצרול.

אפשר לכיסוי ליפול על הגליצרול, מה שיפחית את בו