חקירת תגובת החיידקים לאתילן באמצעות תרכובת משחררת אתילן

התחל עם צלחת מרובת בארות המכילה מצעי גידול מחוסנים מראש בחיידקים המייצרים תאית.

בבאר המטופלת, המדיה מתווספת עם חומצה 2-כלורו-אתילפוספונית (CEPA).

אטום את הצלחת כדי למנוע חילופי גזים ודגירה.

במהלך הדגירה, CEPA מבצע הידרוליזה ומשחרר אתילן, מולקולה גזית.

אתילן מפעיל סינתאז תאית חיידקית, המשתמש בגלוקוז UDP ציטוזולי לסינתזה של תאית.

עם הזמן, החיידקים מוציאים תאית דרך הממברנה שלהם.

זה מקדם הרכבה עצמית של חיידקים בממשק האוויר-נוזל, ויוצר ביופילם צף מבוסס תאית, או פליקל.

לאחר הדגירה, העבירו את הפליקלים לצלחת מרובת בארות טרייה. הוסף תמיסה אלקליין ודגירה בטמפרטורה גבוהה יותר כדי ליז את התאים.

הסר את התמיסה האלקליין. שטפו שוב ושוב בתסיסה כדי להסיר פסולת סלולרית תוך שמירה על התאית.

יבש ושקול את הפליקלים. משקל יבש גבוה יותר בדגימות שטופלו ב-CEPA בהשוואה לביקורת מצביע על ייצור תאית חיידקי מוגבר בתגובה לאתילן.

בדיקת הפליקל היא כלי ניתוח סטנדרטי לייצור תאית חיידקית. PH וניתוח מורפולוגי מפורטים בפרוטוקול טקסט. בהכנה, קוצרים תאים מתרביות התחלה בשלוש עותקים ומכמתים את התאים באמצעות תא ספירה של פטרוף-האוזר.

לאחר מכן, הכינו ארבע תערובות מאסטר בינוניות עם ריכוזי CEPA שונים. עבור כל תערובת מאסטר, יש להקצות 60 מיליליטר של pH 7 SH בינוני ולהוסיף 120 מיקרוליטר של תמיסת מלאי CEPA של 0, 5, 50 או 500 מילי-מולר כדי לקבל ר