בדיקה מבוססת נוזל Multiwell לסינון C. elegans Knockdowns

0 views • 2:35 min • September 26th, 2025

Loading...
$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

קח צלחת מרובת בארות המכילה מדיה אגר שזוהתה מראש עם חיידקי RNAi, עם או בלי תוספת ספציפית לגן המכוונת לגן C. elegans .

הזרעים סינכרנו תולעים בשלב L1 לתוך הבארות ודגרו עליהן כדי לאפשר הזנה מחיידקי ה-RNAi.

התוספת מייצרת RNA מפריע המכוון לגנים ספציפיים של תולעים, ויוצר פנוטיפ נוקדאון ספציפי לגן.

הוסף חיץ לבארות והשהה בעדינות את התולעים.

העבירו את המתלה לצלחת באר עמוקה ואפשרו לתולעים להתיישב על ידי כוח הכבידה.

הסר את הסופרנטנט, תוך שמירה על חיץ מסוים.

שטפו את התולעים עם חוצץ, ואז השליכו את הסופרנטנט והשאירו כמות קטנה של חוצץ.

לאחר מכן, קח צלחת בדיקה מרובת בארות המכילה חיידקים פתוגניים.

הוצא מספר מוגדר של תולעי בקרה ונוקדאון לבארות שלהן כדי לאפשר אינטראקציות מארח-פתוגן. החיידקים הפתוגניים מפרישים תרכובות הגורמות לתמותת תולעים.

השווה את תמותת התולעים כדי להעריך את ההשפעה של הפלה ספציפית לגן על הישרדות התולעים.

הוסף מיליליטר אחד של S בזל לכל באר של צלחת של 24 בארות המכילה 300 תולעים לבאר. מערבבים בעדינות את התולעים על ידי ניעור הצלחת, ואז מעבירים תולעים לצלחת באר ריקה וסטרילית בעומק 24.

אפשר לתולעים להתיישב בכוח הכבידה, כחמש דקות. שאפו את הסופרנטנט, השאירו כמיליליטר אחד לבאר, ואז הוסיפו 7 מיליליטר של S בזאלי לכל באר. חזור על הכביסה פעמיים נוספות, ולאחר מכן לאחר הכביסה הסופית שאפו את כל הנוזלים מלבד כ -400 מיקרוליטר של סופרנטנט.

לאחר פיזור החיידקים ל-384 צלחות באר כדי למנוע רעב, תוך שימוש בפונקציית הדגימה מחדש של סדרן התולעים, מיין 22 תולעים לכל באר של צלחת באר 384. לבסוף, לאחר המיון, הוסף מולקולות קטנות או חומרים ספציפיים אחרים לניסוי.

11:31

הקמת הגדרת תפוקה גבוהה להקרנה מולקולות קטנות לווסת ג-di-GMP איתות Pseudomonas aeruginosa

Related Videos

0 Views

11:58

נמטודות. Caenorhabditis Elegans - מודל רב תכליתי In Vivo ללמוד אינטראקציות מארח-חיידק

Related Videos

0 Views

11:40

הקרנה בתפוקה גבוהה של מבודדים מיקרוביאליים עם השפעה על בריאות Caenorhabditis elegans

Related Videos

0 Views

14:53

תפוקה גבוהה הקרנת ו biosensing עם פלורסנט ג elegans מתחים

Related Videos

0 Views

09:40

RNAi הקרנת לזהות פנוטיפים Postembryonic ב ג elegans

Related Videos

0 Views

10:58

כמותיים אוטומטי תפוקה גבוהה הגנום כולו RNAi המסכים ג elegans

Related Videos

0 Views

03:15

הזנת RNAi בתרבית נוזלית: שיטה בעלת תפוקה גבוהה להשמטת ביטוי גנים ב- C. elegans

Related Videos

0 Views

06:28

Assay Chemotaxis סי אלגנס

Related Videos

0 Views

18:38

מציאה גן בקנה מידה גדולה ב ג elegans שימוש בספריות האכלת dsRNA ליצור פנוטיפים הפסד של הפונקציה חזקות

Related Videos

0 Views

11:43

Screenable In vivo Assay עבור מיטוכונדריאלי מאפנני שימוש הטרנסגניים Bioluminescent Elegans Caenorhabditis

Related Videos

0 Views

Last updated: 18 July 2026