JoVE Encyclopedia of Experiments
מיקרוביולוגיה
0 צפיות • 2:08 דק' • September 26th, 2025
קח צלחת נחיל שיפוע עם אגר דו שכבתי. השכבה התחתונה, המכילה מעכב, נוצקה ליצירת שיפוע של המעכב.
הלוח מכיל בארות במרווחים איזומטריים כדי לספק מרחב מתאים לנחיל חיידקים או לנדידה קולקטיבית, ולמנוע חפיפות נחילים.
חסנו את הבארות בתרבית חיידקים ודגרו על הצלחת.
תחת ריכוזי מעכבים נמוכים, חיידקים מתאמים את תנועת הדגל שלהם, ומתחילים נדידה קולקטיבית או נחילים.
תחת ריכוזי מעכבים גבוהים, המעכב מדכא את הביטוי של גנים הקשורים לדגלים.
התוצאה היא תנועה מוגבלת של שוטים, מה שמוביל לתנועתיות מוגבלת של נחילים.
צלם את הצלחת תחת אור לבן במרווחי זמן קבועים כדי ללכוד את דפוס הנחיל.
במהלך ההדמיה, התאם את זמן החשיפה כדי לשפר את בהירות הנחילים.
שנה את הגדרות הסף כדי למזער הפרעות לאור הרקע ולהגביר את הניגודיות.
שמור את התמונה לניתוח עוקב של השפעת ריכוז המעכבים על נחיל חיידקים.
הוסף 80 מיקרוליטר מתרבית הגידול הלילה לכל באר. הוציאו את צלחות הנחיל מהחממה אחת בכל פעם כל 12 שעות והניחו אותן במערכת הדמיית הג'ל.
בחר מצב הדמיית ג'ל, חשוף את צלחת הנחיל לאור לבן והתאם את אורך המוקד כדי לקבל תצוגה ברורה של נחילים. שפר את בהירות הנחילים לתצפית מדויקת על ידי התאמת זמן החשיפה ל-300 אלפיות השנייה. כוונן את הסף כדי למזער הפרעות מתאורת הרקע.
שמור את קובץ התמונה להמשך ניתוח.