נטרול חיידקים באמצעות פלבין מונונוקלאוטיד המופעל באור

התחל בחיסון חיידק פתוגני לתוך צינור המכיל מדיום נוזלי.

דגירה כדי לקדם התפשטות חיידקים, ואז להעביר את התרבית לצינורות טריים.

סובבו את התאים לכדורים והשליכו את הסופרנטנט.

השעו מחדש את כדורי החיידקים בתמיסות חיץ המכילות ריכוזים הולכים וגדלים של פלבין מונונוקלאוטיד (FMN), רגיש לאור ותמיסת חיץ ללא FMN שישמש כבקרה.

מערבבים היטב את תכולת הצינור ומעבירים את המתלים לצינורות זכוכית.

חשוף את הצינורות לאור נראה כדי להפעיל את FMN, המגיב עם חמצן מולקולרי ליצירת מיני חמצן תגובתיים (ROS).

ה-ROS פוגע ברכיבים תאיים חיידקיים, ובכך מפחית את כדאיות החיידקים.

העבירו את כמות הדגימה למצע מוצק, פזרו אותם באופן שווה ודגרו כדי לאפשר לחיידקים ברי קיימא ששרדו לצמוח למושבות.

לאחר הדגירה, כמת את המושבות וחשב את אחוז ההפחתה בכדאיות החיידקים בהשוואה לבקרה כדי להעריך את ההשפעה תלוית המינון של FMN.

חסנו מושבה של סטפילוקוקוס זהוב לתוך 10 מיליליטר של מרק ליזוגני במבחנה עם מכסה בורג של 15 מיליליטר. מגדלים את התרבות בחום של 37 מעלות צלזיוס למשך 16 שעות בשייקר. העבירו 0.5 מיליליטר מהתרבות לצינור צנטריפוגה של 1.5 מיליליטר.

לדלל את התרבית לצפיפות אופטית של 0.5 ב-600 ננומטר על ידי הוספת מים מעוקרים. לאחר מכן, העבירו 0.5 מיליליטר מהתרבות לצינור צנטריפוגה של 1.5 מיליליטר. צנטריפוגה ב -14,000 גרם למשך 10 דקות ושפכו את הסופרנטנט.

הוסף מיל