דפוס מיקרופלואידית ומעקב מבוסס פלואורסצנטי של צמיחת חיידקים חד-תאיים

התחל עם תרבית חיידקים מתויגת פלואורסצנטית שנוספה למאגר נטול פחמן.

צנטריפוגה כדי לגלול את החיידקים ולהשליך את הסופרנטנט.

השעו מחדש את הגלולה במאגר טרי נטול פחמן המכיל חומר ניקוי עדין.

היעדר מקור פחמן עוצר את הצמיחה, בעוד שחומר הניקוי מונע היווצרות גושים ושומר על תאים תלויים.

טען את התרחיף החיידקי למזרק וחבר אותו למשאבה.

הזרקו את המתלה לכניסה של שבב מיקרופלואידי, המכיל תעלה עם מלכודות משובצות ברצפה.

משוך לאט את הנוזל משקע התעלה.

כאשר הנוזל נסוג, כוחות נימיים מנחים את החיידקים לעבר היציאה.

בתהליך זה, תאי חיידקים בודדים מתיישבים במלכודות, וכתוצאה מכך דפוס חיידקים.

שוטפים את התעלה במרק שחומם מראש ועשיר בחומרים מזינים ברציפות.

החיידקים ממשיכים לגדול ויוצרים מיקרו-מושבות בתוך המלכודות.

השתמש במיקרוסקופ פלואורסצנטי כדי ללכוד תמונות דולג זמן ולנתח צמיחת חיידקים בסביבה מבוקרת.

הכניסו מיליליטר אחד של מדיום MOPS לבקבוקון צנטריפוגה והוסיפו 10 מיקרוליטר של 0.132 אשלגן פוספט מולרי.

Aliquot 100 מיקרוליטר של תרבית הלילה לבקבוקון הצנטריפוגה וצנטריפוגה את התרבית ב -2,300 פעמים גרם למשך שתי דקות. השליכו בעדינות את הסופרנטנט כדי להשעות את הגלולה במיליליטר אחד של מדיום MOPS טרי עם 0.015% מ-Tween 20 ו-0.01% של אשלגן פוספט והעמיסו את תרחיף החיידקים במזרק של מיליליטר אחד. כדי לאבטח את המזרק ואת חיבור הצינור, הכנס ישירו