בדיקת חיישן ביולוגי חיידקי לזיהוי כספית זמינה ביולוגית בתנאים אנאירוביים

התחל עם מערך בדיקה המכיל בקבוקונים המונחים בתוך תא אנאירובי.

כל בקבוקון מכיל מדיה בתוספת נתרן חנקתי, יוני כספית וריכוזים משתנים של מגנזיום גופרתי.

סובב את ההתקנה כדי לערבב את הרכיבים, ולאחר מכן דגירה.

במהלך הדגירה, מגנזיום גופרתי מקדם היווצרות של קומפלקסים של כספית שאינם זמינים ביולוגית, ומפחית יוני כספית חופשיים וזמינים ביולוגית באופן תלוי ריכוז.

לאחר מכן, הוסף חיישנים ביולוגיים מושרים, חיידקים מהונדסים גנטית הנושאים פלסמיד, וערבב.

הפלסמיד מכיל ווסת שעתוק מגיב לכספית ומקדם המקושר לגן מדווח פלואורסצנטי.

בתנאים אנאירוביים, החיידקים משתמשים בניטראט לנשימה.

יוני כספית חופשיים נכנסים לתאים, קושרים את ווסת השעתוק ומפעילים את הגן הפלואורסצנטי, ומייצרים חלבונים פלואורסצנטיים.

העבירו את הכמות מכל בקבוקון לצלחת מרובת בארות.

בעזרת קורא צלחות, מדוד את עוצמת הקרינה.

ירידה בקרינה עם עלייה בריכוזי המגנזיום סולפט מאשרת את יכולתו של החיישן הביולוגי לזהות שינויים בכספית זמינה ביולוגית.

לפני תחילת הניסוי בדוק את המוניטור האנאירובי כדי לוודא שאין חמצן בתא האנאירובי. עצב את פריסת הצלחת על פי תבנית של 96 בארות. כדי להריץ ניסויים בשכפולים טכניים של שלושה, זה יאפשר 32 טיפולים שונים, המיוצגים בצורה הטובה ביותר עם רשת ארבע על שמונה להגדרת הבקבוקונים.

הגדר את הרשת ארבע על שמונה בהתאם לפריסת לוחית הבדיקה. לאחר מכן, הניח