הכנת תרבית סלמונלה טיפימוריום
אנציקלופדיית הניסויים של JoVE
מיקרוביולוגיה
0 צפיות • 2:41 דק׳ • October 30th, 2025
קחו צלחת תרבית המכילה סלמונלה טיפימוריום, חיידק פתוגני.
בעזרת לולאת חיידקים סטרילית, בחרו מושבה אחת ומבודדת היטב כדי להבטיח את טוהר התרבית וחסנו אותה למרק עירוי לב למוח.
דגירה עם טלטול לאוורור תקין ופיזור חומרים מזינים אחיד, המקדמים התפשטות חיידקים.
מדללים את תרבית הלילה למרק טרי כדי למנוע דלדול חומרים מזינים ולשמור על צמיחה אקספוננציאלית.
המשיכו לדגור עם טלטול.
השתמש בספקטרופוטומטר כדי למדוד את הצפיפות האופטית (OD) כדי לעקוב אחר צמיחת חיידקים.
אפשר לתרבית להגיע ל-OD של בערך אחד. זה מצביע על שלב הצמיחה האקספוננציאלי, שבמהלכו החיידקים מנצלים באופן פעיל חומרים מזינים כדי לעבור התפשטות מהירה.
העבירו את התרבית לצינור ולצנטריפוגה כדי להפריד בין החיידקים.
השליכו את הסופרנטנט והשעו מחדש את החיידקים במאגר כדי לשמור על שלמות החיידקים.
צנטריפוגה והסר שאריות מדיה.
השעו מחדש את החיידקים במאגר טרי כדי לקבל תרחיף אחיד ונטול זיהום.
כדי להתחיל בתרבית סלמונלה טיפימוריום , השתמש בלולאת חיידקים כדי לחסן מושבת חיידקים בודדת לתוך 5 מיליליטר של מרק עירוי לב מוח. לאחר מכן דגרו את המתלה באינקובטור של 37 מעלות צלזיוס למשך הלילה תוך כדי טלטול. העבירו מיליליטר אחד של תרחיף חיידקי זה למרק BHI של 19 מיליליטר בבקבוק חרוטי למחרת.
דגירה נוספת באינקובטור 37 מעלות צלזיוס תוך כדי טלטול. כאשר ה- OD600 מגיע לאחד, הסר את הבקבוק מה
צפו בתמליל המלא וקבלו גישה לאלפי סרטונים מדעיים