אנציקלופדיית הניסויים של JoVE
מיקרוביולוגיה
0 צפיות • 2:49 דק׳ • October 30th, 2025
קח תרבית מלאי של Bacillus mycoides, ריזובקטריום המעודד צמיחת צמחים, ופס חיסון על צלחת תרבית.
דגרו על הצלחת כדי לקדם התפשטות חיידקים למושבות.
יש לחסן מושבה בודדת למדיום נוזלי ולדגור בניעור כדי לקדם צמיחת חיידקים.
לדלל את התרבות באמצעות המדיום הנוזלי כדי להשיג את הצפיפות האופטימלית לבדיקה.
הוסף הפרשות שורש תפוחי אדמה לתרבית כדי לחקות אינטראקציות בין צמח לחיידקים.
דגירה של התרבות בתסיסה, מה שמקל על האינטראקציה של מולקולות האיתות עם קולטני חיידקים.
אינטראקציה זו גורמת למסלולי איתות המפעילים חלבונים רגולטוריים, הנקשרים ל-DNA ומשנים את ביטוי הגנים.
העבירו את התרבית לתוך צינור וסובבו את תאי החיידקים לכדור.
השליכו את הסופרנטנט וטבלו את הצינור בחנקן נוזלי כדי להקפיא את התאים.
אחסן את התאים כדי לנתח שינויים הנגרמים על ידי הפרשות שורש הצמח בביטוי גנים של חיידקים.
כדי לגדל את החיידקים, פס זן B. mycoides ממלאי גליצרול מינוס 80 מעלות צלזיוס על צלחת אגר LB, ודגר את הצלחת ב-30 מעלות צלזיוס למשך הלילה. לאחר מכן יש לחסן את המדיום הנוזלי LB במושבה אחת מהצלחת, ולגדל את התרבית באינקובטור רועד ב-200 סל"ד למשך הלילה ב-30 מעלות צלזיוס.
כדי לטפל ולדגום את החיידקים, יש לדלל תרבית B . mycoides למשך הלילה עם 90 מיליליטר של מדיום LB מחומם מראש ל-OD600 הראשוני של אפס נקודה אפס חמש בבקבוק של 300 מיליליטר. לאחר מכן, הוסף 10
צפו בתמליל המלא וקבלו גישה לאלפי סרטונים מדעיים